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改善泛素系统提高植物逆境适应性研究

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-16页
1 前言第16-51页
   ·泛素途径的基本特点第17-29页
     ·泛素第17-22页
     ·泛素连接级联反应第22-29页
   ·26S 蛋白酶体第29-32页
   ·Ub-C 末端水解酶(Ubiquitin-C-terminal hydrolases)第32页
   ·泛素类似蛋白(ubiquitin-like proteins)第32-34页
   ·Ub/26s 蛋白酶体途径的生理功能第34-44页
     ·Ub/26s 蛋白酶体途径与植物激素第34-37页
     ·Ub/26s 蛋白酶体途径与信号转导第37页
     ·Ub/26s 蛋白酶体途径与植物抗病第37-38页
     ·Ub/26s 蛋白酶体途径与光形态建成第38-39页
     ·Ub/26s 蛋白酶体途径与叶绿体中蛋白质周转第39页
     ·Ub 在逆境条件下的表达第39-43页
     ·细胞周期调控第43-44页
   ·泛素的非蛋白质降解通路第44-48页
     ·泛素DNA 损伤耐受通路第45-46页
     ·泛素 NF-κB 激活通路第46-47页
     ·泛素核糖体蛋白质合成通路第47页
     ·泛素蛋白质转运通路第47-48页
   ·研究泛素途径的技术、方法及尚未解决的问题第48-49页
   ·作物综合逆境适应性研究第49-51页
2 材料与方法第51-69页
   ·试验材料与处理第51-52页
     ·植物材料第51页
     ·材料培养与处理第51页
     ·菌株与质粒第51页
     ·酶及生化试剂第51-52页
     ·PCR引物第52页
   ·试验方法第52-69页
     ·利用Trizol试剂盒提取RNA第52-54页
     ·RNA反转录第54页
     ·烟草Nt-Ub1泛素基因的克隆及测序第54-58页
     ·表达载体的构建第58-60页
     ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备及转化第60-62页
     ·转基因烟草植株的PCR检测第62-64页
     ·半定量RT-PCR第64页
     ·蛋白杂交分析第64-67页
     ·NBT 染色检测植物组织内超氧阴离子第67页
     ·生理指标的测定第67-69页
3 结果与分析第69-94页
   ·小麦中泛素基因的表达分析第69-70页
     ·小麦Ta-Ub1基因转录表达对水分胁迫的响应第69页
     ·小麦Ta-Ub2基因转录表达对水分胁迫的响应第69-70页
   ·构建泛素基因表达载体转化烟草及转基因苗的分子检测第70-74页
     ·烟草中泛素基因 Nt-Ub1 的克隆第71页
     ·泛素基因正义及反义表达载体的构建第71-72页
     ·基因转化及转基因苗的分子检测第72-74页
   ·转正义Ta-Ub2 泛素基因提高了转基因烟草的抗逆性第74-87页
     ·转正义Ta-Ub2泛素基因提高了烟草的抗旱性第75-80页
     ·转正义Ta-Ub2泛素基因提高了烟草的抗盐性第80-84页
     ·转正义 Ta-Ub2 泛素基因提高了烟草的抗冷性第84-85页
     ·转正义 Ta-Ub2 泛素基因提高了烟草的对综合逆境的抗性第85-87页
   ·转反义 Nt-Ub1 泛素基因的 T0 代转基因烟草植株综合性状及抗逆性分析第87-92页
     ·转反义 Nt-Ub1 泛素基因使烟草植株生长变差并加速了衰老第87-88页
     ·干旱胁迫对转反义 Nt-Ub1 泛素基因的烟草生理状况的影响第88-91页
     ·盐胁迫对 T1 代转反义 Nt-Ub1 泛素基因的烟草幼苗生长的影响第91-92页
   ·转泛素基因烟草植株的表型变化可能与体内活性氧(ROS)的积累有关第92-94页
4 讨论第94-99页
   ·小麦泛素基因的表达受水分胁迫调控第94页
   ·转基因植株体内泛素蛋白水平检测第94-95页
   ·过量表达泛素单体提高了转基因烟草对环境的适应能力第95-96页
   ·转反义Nt-Ub1泛素基因导致转基因烟草叶片出现早衰现象第96-97页
   ·转基因植株体内泛素基因表达与活性氧的积累有关第97页
   ·泛素系统可能与植物的多重抗性、综合抗性及交叉适应有关第97-99页
参考文献第99-115页
攻读学位期间发表论文及获奖情况第115-116页
致谢第116页

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