| 1 前言 | 第1-12页 |
| ·旋毛虫病的危害及流行现状 | 第10页 |
| ·旋毛虫病的诊断和预防 | 第10-11页 |
| ·旋毛虫43kDa的特性、定位、功能及现况 | 第11-12页 |
| ·研究的目的、内容及意义 | 第12页 |
| 2 材料与方法 | 第12-25页 |
| ·常用生化试剂 | 第12-13页 |
| ·主要仪器 | 第13-14页 |
| ·宿主菌与质粒 | 第14-15页 |
| ·虫种来源 | 第15页 |
| ·实验用小鼠与人血清 | 第15页 |
| ·培养基及常用试剂配方 | 第15-17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| ·引物设计 | 第18页 |
| ·旋毛虫感染动物及旋毛虫肌幼虫的收集 | 第18-19页 |
| ·总RNA的提取 | 第19页 |
| ·逆转录反应获得cDNA | 第19-20页 |
| ·PCR反应 | 第20页 |
| ·PCR产物鉴定 | 第20页 |
| ·43kDa抗原基因二轮PCR产物及表达载体pET30a(+)双酶切 | 第20页 |
| ·胶回收试剂盒回收酶切产物 | 第20-21页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·连接反应 | 第21页 |
| ·转化实验 | 第21-22页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第22页 |
| ·阳性重组子的保存 | 第22-23页 |
| ·上海生工公司测序 | 第23页 |
| ·序列分析 | 第23页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-37页 |
| ·43kDa抗原基因的引物设计 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR扩增产物电泳 | 第26-27页 |
| ·Ts43和pET30a(+)分别用BamHI和HindⅢ双酶切后胶回收 | 第27-28页 |
| ·pET30a(+)-Ts43重组表达质粒的构建及酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·目的基因的序列测定与同源性分析 | 第29-32页 |
| ·重组质粒pET30a(+)-Ts43在E.coliBL21中的表达 | 第32-33页 |
| ·旋毛虫Ts43基因重组蛋白的Western blot分析 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白与其他寄生虫感染的小鼠和人血清的Western blot结果 | 第34-35页 |
| ·旋毛虫43kDa重组蛋白二级结构及抗原性预测 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-46页 |
| ·旋毛虫43kDa抗原的分子结构、定位、生化特性及功能 | 第37页 |
| ·总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·目的基因的获得与扩增 | 第38-41页 |
| ·旋毛虫重组质粒pET30a(+)-Ts43的构建和Ts43基因序列分析 | 第41页 |
| ·旋毛虫pET30a(+)-Ts43／BL21的表达 | 第41-43页 |
| ·重组蛋白的免疫学鉴定 | 第43-44页 |
| ·交叉反应 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46页 |
| 6 参考文献 | 第46-51页 |
| 综述：旋毛虫重组抗原的体外表达及其影响因素 | 第51-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
