| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 部分缩略语表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-23页 |
| 1. 玉米丝黑穗病的研究现状 | 第9-17页 |
| ·玉米丝黑穗病的分布与危害 | 第9页 |
| ·病原及流行学 | 第9-10页 |
| ·玉米丝黑穗病的症状与鉴定方法 | 第10-11页 |
| ·症状 | 第10页 |
| ·鉴定方法 | 第10-11页 |
| ·病原菌生理小种分化 | 第11页 |
| ·丝轴黑粉菌的生理生态研究 | 第11-12页 |
| ·冬孢子的萌发及菌丝的形成 | 第11-12页 |
| ·菌丝在植物体内的生长 | 第12页 |
| ·玉米丝黑穗病抗性机制的研究 | 第12-14页 |
| ·病害防治 | 第14-15页 |
| ·抗性遗传的研究 | 第15-17页 |
| ·遗传机理 | 第15-16页 |
| ·分子标记及 QTL研究 | 第16-17页 |
| 2. 植物抗病性研究进展 | 第17-22页 |
| ·植物抗病性的分子生物学基础 | 第17页 |
| ·植物抗病反应的类型 | 第17-18页 |
| ·超敏反应 | 第17-18页 |
| ·系统获得性抗性 | 第18页 |
| ·诱导系统抗性 | 第18页 |
| ·抗病反应涉及的基因 | 第18-19页 |
| ·植物的抗病基因 | 第18-19页 |
| ·植物的抗病相关基因 | 第19页 |
| ·植物抗病基因的克隆方法 | 第19-20页 |
| ·抑制差减杂交技术 | 第20页 |
| ·cDNA芯片技术 | 第20-22页 |
| 3. 本课题研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 材料与方法 | 第23-31页 |
| 1 材料及处理 | 第23-24页 |
| ·玉米试材及幼苗培养 | 第23页 |
| ·真菌孢子的培养及接种 | 第23页 |
| ·侵染玉米植株的鉴定 | 第23-24页 |
| ·玉米材料 DNA的提取 | 第23页 |
| ·特异片段的 PCR扩增与电泳 | 第23-24页 |
| ·光学显微镜观察 | 第24页 |
| ·玉米mRNA的获取 | 第24页 |
| ·总 RNA的提取 | 第24页 |
| ·mRNA的分离 | 第24页 |
| 2. SSH文库的构建 | 第24-29页 |
| ·mRNA反转录 | 第25页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第25页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第25页 |
| ·用 RsaI酶切消化双链cDNA | 第25-26页 |
| ·Tester cDNA接头连接 | 第26页 |
| ·第一次杂交 | 第26-27页 |
| ·第二次杂交 | 第27页 |
| ·第一次 PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·第二次 PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·PCR产物和 T-载体连接 | 第29页 |
| ·电转化(以下操作均在无菌环境下进行) | 第29页 |
| 3. SSH文库的筛选 | 第29-30页 |
| 4. 利用cDNA芯片筛选抗病相关克隆 | 第30页 |
| 5. RT-PCR验证 | 第30-31页 |
| 结果与分析 | 第31-42页 |
| 1. 丝轴黑粉菌 PCR检测 | 第31-33页 |
| 2. 病原菌的培养 | 第33-35页 |
| ·冬孢子的萌发 | 第33-34页 |
| ·担孢子的生长 | 第34-35页 |
| 3. 菌丝侵染玉米的普通显微观察 | 第35页 |
| 4. 发病期玉米株高调查结果 | 第35页 |
| 5. RNA含量和质量的检测 | 第35-36页 |
| 6. mRNA的质量检测 | 第36页 |
| 7. SSH文库的构建 | 第36-37页 |
| 8. SSH文库的筛选 | 第37页 |
| 9. 芯片杂交筛选结果 | 第37页 |
| 10. SSH文库和cDNA芯片中筛选到的阳性克隆的分析 | 第37-40页 |
| 11. Rf-PCR验证 | 第40-42页 |
| 讨论 | 第42-46页 |
| 1. 病原菌基因组特异引物的PCR技术的可行性 | 第42页 |
| 2. 早期侵染的鉴定 | 第42页 |
| 3. 菌丝在叶片的扩展 | 第42-43页 |
| 4. 玉米成株期菌丝在植株中的分布 | 第43页 |
| 5 本研究中筛选到可能与玉米抗丝黑穗病相关的几个基因 | 第43-46页 |
| ·糖代谢相关基因 | 第43-44页 |
| ·乙烯响应的表达的基因 | 第44页 |
| ·黄酮醇合成酶 | 第44-45页 |
| ·和植株生长发育相关的基因 | 第45-46页 |
| 总结 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |