摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-26页 |
·引言 | 第13页 |
·分子标记概述 | 第13-15页 |
·理想分子标记满足的条件 | 第13页 |
·主要分子标记的种类和特点 | 第13-15页 |
·限制性片段长度多态性 | 第13-14页 |
·随机扩增多态性DNA | 第14页 |
·微卫星标记 | 第14页 |
·小卫星标记 | 第14页 |
·扩增片段长度多态性 | 第14页 |
·单链构象多态性 | 第14-15页 |
·单核苷酸多态性 | 第15页 |
·猪繁殖性状相关基因的研究进展 | 第15-20页 |
·雌激素受体基因(Estrogen Receptor,ESR) | 第15-17页 |
·雌激素受体基因的功能 | 第15-16页 |
·雌激素受体基因的结构 | 第16页 |
·雌激素受体基因多态性与产仔数相关性的研究 | 第16-17页 |
·氟烷基因(Ryanodine receptor1,RYR1) | 第17-18页 |
·氟烷基因的功能 | 第17页 |
·氟烷基因的结构 | 第17-18页 |
·氟烷基因与猪生长、繁殖等性状的研究 | 第18页 |
·促卵泡激素β(Follicle-stimulatinghormone-β,FSHβ)亚基基因 | 第18-19页 |
·FSHβ基因的功能 | 第18页 |
·FSHβ基因的结构 | 第18页 |
·FSHβ基因多态性与产仔数相关性的研究 | 第18-19页 |
·催乳素受体基因(Prolactin receptor,PRLR) | 第19-20页 |
·催乳素受体基因的功能 | 第19页 |
·催乳素受体基因的结构 | 第19页 |
·催乳素受体基因多态性与产仔数相关性的研究 | 第19-20页 |
·视黄醇结合蛋白4基因(Retinol-binding protein4,RBP4) | 第20页 |
·骨调素基因(Osteopontin,OPN) | 第20页 |
·人类Y染色体结构及与精子发生相关基因的研究进展 | 第20-26页 |
·人类Y染色体的结构及其基因 | 第21-23页 |
·无精子因子(Azoospermia factor,AZF) | 第23页 |
·SMCY基因(selected mouse cDNA on Y) | 第23-24页 |
·DBY基因(DEAD/H box polypeptide,Y chromosome) | 第24-25页 |
·UTY基因(ubiguitous TPR motif Y) | 第25-26页 |
2 研究目的和意义 | 第26-27页 |
3 ESR、RYR1基因多态对产活仔数影响的研究 | 第27-44页 |
·试验材料 | 第27页 |
·精液样品 | 第27页 |
·毛囊样品 | 第27页 |
·血液样品 | 第27页 |
·主要仪器设备 | 第27页 |
·主要试剂及配制 | 第27-28页 |
·用于样品采集的溶液配制 | 第27-28页 |
·用于基因组DNA提取的溶液配制 | 第28页 |
·用于琼脂糖凝胶电泳及检测的溶液配制 | 第28页 |
·用于聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染的溶液配制 | 第28页 |
·分子生物学软件 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-32页 |
·DNA的提取 | 第29-30页 |
·PCR扩增的引物 | 第30页 |
·ESR基因的PCR-RFLP检测 | 第30-31页 |
·ESR基因的PCR扩增反应 | 第30页 |
·ESR基因的酶切反应 | 第30页 |
·聚丙烯酰胺凝胶的制备及RFLP的电泳检测 | 第30-31页 |
·RYR1基因的PCR-RFLP检测 | 第31页 |
·RYR1基因的PCR扩增反应 | 第31页 |
·RYR1基因的酶切反应及RFLP的电泳检测 | 第31页 |
·ESR、RYR1基因多态同时检测 | 第31-32页 |
·ESR和RYR1基因的双重PCR反应 | 第31-32页 |
·ESR和RYR1基因的双酶切反应及RFLP的电泳检测 | 第32页 |
·数据统计方法 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-42页 |
·从猪精液、毛囊和血样中提取基因组DNA效果的比较 | 第32-33页 |
·ESR、RYR1基因多态分别检测与同时检测效果的比较 | 第33-36页 |
·ESR基因的多态检测 | 第33-34页 |
·RYR1基因的多态检测 | 第34-35页 |
·ESR和RYR1两个基因多态同时检测 | 第35-36页 |
·ESR基因多态对产活仔数的影响 | 第36-38页 |
·ESR基因多态位点在引进品种与国内品种中等位基因频率和基因型频率的比较 | 第36-37页 |
·ESR基因位点多态性与产活仔数的相关性分析 | 第37-38页 |
·RYR1基因多态对产活仔数的影响 | 第38-39页 |
·RYR1基因位点在引进品种与国内品种中等位基因频率和基因型频率的比较 | 第38-39页 |
·RYR1基因位点多态性与产活仔数的相关性分析 | 第39页 |
·ESR、RYR1基因合并基因型与产活仔数的相关性分析 | 第39-40页 |
·杜洛克公猪RYR1基因位点多态与产活仔数的相关性分析 | 第40-41页 |
·杜洛克公母猪配种时RYR1位点基因型组合的筛选 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
·ESR、RYR1基因多态同时检测方法的探讨 | 第42页 |
·母猪的ESR、RYR1基因合并基因型对产活仔数的影响 | 第42-43页 |
·公母猪选择配种时,RYR1基因的较优基因型的筛选 | 第43-44页 |
4 四个基因SNP位点的检测 | 第44-54页 |
·材料与方法 | 第44-47页 |
·试验材料 | 第44页 |
·主要仪器设备、试剂及配制 | 第44页 |
·主要分子生物学软件 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-47页 |
·DNA的提取方法 | 第44页 |
·猪同源序列的寻找及其引物设计 | 第44-46页 |
·SMCY、SMCX、UTX、DBX基因的PCR扩增反应 | 第46页 |
·SSCP多态性检测 | 第46-47页 |
·采用直接测序的方法寻找SNP位点 | 第47页 |
·结果 | 第47-52页 |
·四个基因的PCR扩增结果 | 第47-50页 |
·猪SMCY基因的3个PCR扩增产物电泳结果 | 第47-48页 |
·猪DBX基因的2个PCR扩增产物电泳结果 | 第48-49页 |
·猪UTX基因的1个PCR扩增产物电泳结果 | 第49页 |
·猪SMCX基因的2个PCR扩增产物电泳结果 | 第49-50页 |
·寻找新的SNP位点 | 第50页 |
·向NCBI(GenBank)提交两条猪的新序列 | 第50-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
·关于寻找和筛选新的SNP位点 | 第52页 |
·关于引物设计的问题 | 第52-53页 |
·关于使用降落PCR(Touch-Down PCR,TD-PCR)扩增靶序列 | 第53-54页 |
5 小结 | 第54-56页 |
·本研究的主要结果 | 第54页 |
·本研究的创新点 | 第54-55页 |
·本研究的不足和进一步研究的内容 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63页 |