重组IFN-β大肠杆菌诱导表达系统的建立
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 中英文词汇对照 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-12页 |
| 第二章 材料与方法 | 第12-26页 |
| ·材料 | 第12-18页 |
| ·表达载体 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12-16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-26页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| ·pGEX4T-1质粒酶切 | 第19页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| ·凝胶回收以获取目的片段 | 第19-20页 |
| ·PCR | 第20页 |
| ·PCR产物与pGEX4T-1大片断连接 | 第20-21页 |
| ·菌种复苏 | 第21页 |
| ·制备感受态细菌 | 第21页 |
| ·转化 | 第21-22页 |
| ·重组质粒pGEX4T-1验证 | 第22-23页 |
| ·转化表达菌株E.coli BL21 | 第23页 |
| ·IFN-β蛋白诱导表达 | 第23页 |
| ·Tris-甘氨酸SDS—PAGE鉴别IFN-β | 第23-26页 |
| 第三章 结果 | 第26-30页 |
| ·IFN-β基因片段PCR结果琼脂糖凝胶电泳分析 | 第26页 |
| ·PGEX4T-1质粒图谱 | 第26-27页 |
| ·PGEX4T-1质粒琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| ·酶切对重组pGEX4T-1质粒进行验证 | 第27-28页 |
| ·菌体提取质粒PCR结果 | 第28-29页 |
| ·SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 | 第29-30页 |
| 第四章 讨论 | 第30-34页 |
| 第五章 结论 | 第34-35页 |
| 第六章 参考文献 | 第35-40页 |
| 第七章 综述 | 第40-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第51页 |
