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植物抗逆基因:GbTPS与BnPrx的克隆和表达分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-29页
 第一节 植物抗逆性研究进展第12-18页
   ·逆境引起的膜伤害第12-13页
     ·影响膜透性及结构第12-13页
     ·发生膜脂过氧化作用第13页
     ·引起渗透不平衡第13页
     ·引发氧自由基爆发第13页
     ·导致光合系统变化第13页
   ·植物的抗逆机制和遗传工程第13-18页
     ·逆境信号的传导第13-15页
     ·活性氧的清除第15页
     ·渗透调节物质的合成第15-16页
     ·大分子蛋白的产生和积累第16-18页
 第二节 植物过氧化物酶第18-23页
   ·植物过氧化物酶的分子、结构特点第19-20页
   ·植物过氧化物酶的分类第20-21页
   ·植物过氧化物酶的功能和应用第21-23页
     ·参与环境胁迫反应,清除活性氧第21页
     ·污水处理第21页
     ·癌症治疗第21-22页
     ·应用于商业试剂盒第22-23页
 第三节 海藻糖代谢的研究进展概述第23-29页
   ·海藻糖的功能、应用第23-25页
     ·海藻糖作为能量储存第23页
     ·海藻糖作为胁迫保护剂第23-24页
     ·生物反应的稳定剂与激活剂第24页
     ·生物制剂与细胞、器官的保存第24-25页
     ·提高植物的抗逆性第25页
   ·海藻糖的代谢第25-29页
     ·海藻糖的生物合成第25-27页
     ·海藻糖的降解第27-29页
第二章 甘蓝型油菜过氧化物酶基因的克隆及表达分析第29-59页
   ·材料与试剂第29页
     ·植物材料第29页
     ·菌株和载体第29页
     ·酶与试剂盒第29页
     ·试剂第29页
   ·实验方法第29-42页
     ·实验材料的准备第29-30页
     ·植物RNA的抽提及RNA质量检测第30-31页
     ·SDS法提取基因组DNA第31页
     ·DNA片段的回收、连接、克隆和测序第31-32页
     ·用RT-PCR的方法获得过BnPrx保守片段第32页
     ·BnPrx 3’端目的基因的扩增第32-34页
     ·BnPrx的5’RACE第34页
     ·BnPrx全长的获取第34页
     ·BnPrx基因组全长的克隆第34-35页
     ·BnPrx基因启动子区的克隆第35-37页
     ·BnPrx拷贝数的分析第37-40页
     ·BnPrx在不同盐诱导下的表达分析(Northern blotting)第40页
     ·生物信息分析第40页
     ·植物表达载体pC1304-BnPrx的构建和植物转化第40-41页
     ·BnPrx基因启动子的分析和转基因验证第41-42页
   ·实验结果与讨论第42-58页
     ·BnPrx cDNA的全长克隆和性质分析第42-43页
     ·BnPrx推导的蛋白质序列的性质分析第43-45页
     ·BnPrx蛋白的三级结构预测第45-46页
     ·BnPrx的分子进化分析第46-50页
     ·BnPrx的基因组结构第50-51页
     ·BnPrx启动子区域克隆、分析功能鉴定第51-54页
     ·BnPrx的Southern杂交结果第54-55页
     ·BnPrx的组织特异性表达检测第55-56页
     ·BnPrx在不同逆境下的表达图谱第56-57页
     ·BnPrx烟草转化载体的构建第57-58页
   ·BnPrx小结第58-59页
第三章 银杏磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达和功能分析第59-89页
   ·材料与试剂第59-60页
     ·植物材料第59页
     ·菌株和载体第59页
     ·酶与试剂盒第59页
     ·试剂第59-60页
   ·实验方法第60-73页
     ·实验材料的准备第60页
     ·RNA的抽提及质量检测第60-62页
     ·CTAB法提取银杏基因组DNA第62-63页
     ·DNA片段的回收、连接、克隆和测序第63页
     ·GbTPS基因核心保守片段的克隆第63-64页
     ·GbTPS基因3’端的扩增第64-65页
     ·GbTPS基因5’末端克降第65-66页
     ·GbTPS基因全长的获取第66页
     ·GbTPS基因组全长的克隆第66-67页
     ·GbTPS基因5’和3’flanking区的克隆第67-70页
       ·walking文库的构建第67-69页
       ·GbTPS5’flanking区域walking第69-70页
       ·GbTPS3’flanking区域walking第70页
     ·GbTPS酵母表达载体的构建和功能互补第70-71页
     ·GbTPS的的拷贝数分析第71页
     ·GbTPS的表达情况分析(半定量RT-PCR)第71-72页
     ·GbTPS的生物信息学分析第72页
     ·GbTPS转基因烟草载体的构建第72页
     ·GbTPS启动子的功能分析第72-73页
   ·实验结果与讨论第73-87页
     ·GbTPS的克降与性质分析第73-78页
     ·GbTPS的基因组以及3’下游和5’上游序列克隆、分析第78-81页
     ·分子进化分析第81页
     ·Southern blotting分析第81-82页
     ·GbTPS组织特异性与个发育时期的表达情况第82-83页
     ·GbTPS在不同胁迫下的表达情况第83-84页
     ·酵母互补实验第84-86页
     ·GbTPS烟草转化载体的构建第86-87页
   ·GbTPS小结第87-89页
参考文献第89-99页
博士期间参与的其他工作第99-100页
攻读博士学位期间发表的SCI论文第100-102页
致谢第102-104页

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