| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.芸薹属植物自交不亲和性的研究进展 | 第12-14页 |
| ·芸薹属植物自交不亲和相关基因 | 第12-14页 |
| ·SLG、SRK和SCR基因之间的物理距离 | 第14页 |
| 2.原位杂交组织化学技术的起源及发展 | 第14-26页 |
| ·染色体制片技术和探针制备技术的进展 | 第15-20页 |
| ·染色体制片技术和探针制备技术的发展 | 第16页 |
| ·探针制备技术的进展 | 第16-20页 |
| ·EDF制备技术的改进与Fiber-FISH的起源与发展 | 第20-23页 |
| ·玻片的处理 | 第20-21页 |
| ·消化液的功用 | 第21页 |
| ·制备EDF的选材 | 第21-22页 |
| ·DNA纤维的制备 | 第22-23页 |
| ·原位杂交技术在植物研究中的应用 | 第23-26页 |
| ·应用于中期及间期细胞遗传学分析 | 第23页 |
| ·染色体结构变异鉴定 | 第23-24页 |
| ·检测基因扩增和缺失 | 第24页 |
| ·基因或者特异性DNA序列的定位 | 第24-25页 |
| ·染色体RNA和基因组进化的研究 | 第25-26页 |
| 第2章 引言 | 第26-30页 |
| 第3章 材料与方法 | 第30-44页 |
| (一) extended DNA fibers(EDFs)的制备 | 第30-36页 |
| 1.实验材料 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·工具酶和主要的分子细胞遗传学试剂 | 第30页 |
| ·常用溶液的配置 | 第30-31页 |
| 2.方法 | 第31-36页 |
| ·载玻片处理 | 第31页 |
| ·用于EDF制备的材料的选择 | 第31-32页 |
| ·甘蓝游离态中期染色体的制备 | 第31页 |
| ·甘蓝间期细胞核的获取 | 第31-32页 |
| ·前期染色体的制备 | 第32页 |
| ·伸长夜最佳成分的选择 | 第32-34页 |
| ·蛋白酶K缓冲液最佳成分及其浓度的选择 | 第32-33页 |
| ·酶液最适浓度的确定 | 第33-34页 |
| ·制备EDF程序 | 第34-36页 |
| ·以中期染色体为材料制备EDF | 第34-35页 |
| ·以间期染色质材料制取EDF | 第35页 |
| ·以前期染色体材料制取EDF | 第35-36页 |
| (二) 荧光原位杂交 | 第36-44页 |
| 1.实验材料和主要药品 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·主要的分子生物学试剂及分子细胞遗传学试剂 | 第36页 |
| ·常用溶液的配置 | 第36-37页 |
| 2.方法 | 第37-44页 |
| ·探针的制备 | 第37-40页 |
| ·甘蓝基因组DNA的提取(CTAB法提取DNA) | 第37-38页 |
| ·探针的合成与标记 | 第38-40页 |
| ·粗线期染色体的荧光原位杂交 | 第40-42页 |
| ·染色体制片 | 第40页 |
| ·制片的预处理 | 第40-41页 |
| ·杂交 | 第41-42页 |
| ·EDF-FISH | 第42-44页 |
| 第4章 结果与分析 | 第44-60页 |
| 1.植物中EDF制备技术的探索 | 第44-48页 |
| ·提高EDF前体粘附率的探索 | 第44-45页 |
| ·EDF前体制备的方法改进效果 | 第45-46页 |
| ·游离态中期染色体的制取效果 | 第45-46页 |
| ·间期细胞质的提取效果 | 第46页 |
| ·分裂前期细胞染色体的制取效果 | 第46页 |
| ·伸长液的最佳成分的选择 | 第46-48页 |
| ·蛋白酶K缓冲液的最佳成分及其浓度的选择 | 第46-47页 |
| ·伸长液中酶浓度的选择 | 第47-48页 |
| 2.EDF的制备效果 | 第48-50页 |
| ·利用中期材料制备的EDF | 第48页 |
| ·利用间期材料制备的EDF | 第48页 |
| ·采用前期材料制备的EDF | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 3.FISH的结果与分析 | 第50-52页 |
| ·探针的获取 | 第50-51页 |
| ·甘蓝基因组DNA的提取 | 第50页 |
| ·探针的标记 | 第50-51页 |
| ·甘蓝S-locus的定位分析 | 第51-52页 |
| ·粗线期染色体中的荧光原位杂交 | 第51-52页 |
| ·染色体纤维上的原位杂交 | 第52页 |
| 4.论文所需的主要荧光图片 | 第52-60页 |
| 第5章 讨论 | 第60-66页 |
| 1.EDFs制备方法的探讨 | 第60-62页 |
| ·制片技术的选择 | 第60页 |
| ·伸长液与EDFs的制备效果的关系 | 第60-61页 |
| ·最佳实验材料的选择及EDFs空间分辨率的浅析 | 第61-62页 |
| 2.S基因的定位研究 | 第62-66页 |
| ·硫酸葡聚糖和甲酰胺的用量探索 | 第63页 |
| ·DAPI的功用探讨 | 第63页 |
| ·甘蓝S基因的定位与EDF-FISH的优势 | 第63-64页 |
| ·甘蓝染色体组与甘蓝型油菜中甘蓝组的异同点的初步探讨 | 第64页 |
| ·提高杂交信号检测效率的探索 | 第64-66页 |
| 第6章 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 硕士期间发表论文及参与课题情况 | 第74页 |
