| 1 引言 | 第1-14页 |
| 1．1 S糖蛋白的特点 | 第9-10页 |
| 1．2 果树自交不亲和性的研究进展 | 第10-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-22页 |
| 2．1 供试材料及设计 | 第14-15页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第14页 |
| 2．1．2 酶、试剂 | 第14页 |
| 2．1．3 主要仪器 | 第14页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第14-15页 |
| 2．2 试验方法 | 第15-22页 |
| 2．2．1 花粉发芽率的测定方法 | 第15页 |
| 2．2．2 花柱半离体培养 | 第15-16页 |
| 2．2．3 基因组 DNA的提取方法 | 第16-17页 |
| 2．2．4 基因组 DNA的纯化 | 第17页 |
| 2．2．5 DNA纯度和浓度测定 | 第17页 |
| 2．2．6 苹果 S基因的 PCR扩增 | 第17-19页 |
| 2．2．7 目的片断的回收 | 第19-20页 |
| 2．2．8 苹果 S基因 PCR-RFLP系统检测 | 第20-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-34页 |
| 3．1 花柱半离体培养法鉴定斗南苹果 S基因型 | 第22-23页 |
| 3．1．1 不同苹果品种花粉萌发率的调查 | 第22页 |
| 3．1．2 不同品种授粉后花柱内花粉管的生长情况 | 第22-23页 |
| 3．2 苹果基因组 DNA提取技术 | 第23-26页 |
| 3．2．1 不同提取方法对苹果基因组 DNA提取的影响 | 第23-24页 |
| 3．2．2 不同组织试材对提取基因组 DNA的影响 | 第24-25页 |
| 3．2．3 采用嫩叶为试材用改良CTAB法提取基因组 DNA | 第25-26页 |
| 3．3 S-等位基因PCR扩增最佳反应体系的建立 | 第26-30页 |
| 3．3．1 不同DNA模板含量对苹果 S基因的 PCR扩增的影响 | 第26-27页 |
| 3．3．2 不同Mg~(2+)浓度对苹果S基因的 PCR扩增的影响 | 第27页 |
| 3．3．3 不同dNTP浓度对苹果 S基因的 PCR扩增的影响 | 第27-28页 |
| 3．3．4 不同引物浓度对苹果 S基因的 PCR扩增的影响 | 第28页 |
| 3．3．5 不同Taq聚合酶浓度对苹果 S基因的 PCR扩增的影响 | 第28-29页 |
| 3．3．6 不同buffer浓度对苹果 S基因的 PCR扩增的影响 | 第29页 |
| 3．3．7 不同退火温度对苹果 S基因的 PCR扩增的影响 | 第29-30页 |
| 3．3．8 苹果 S基因最佳 PCR反应体系的建立 | 第30页 |
| 3．4 苹果 S基因的分离与鉴定 | 第30-34页 |
| 3．4．1 苹果 S基因的分离 | 第30-31页 |
| 3．4．2 S_1基因和S_9基因的扩增和回收 | 第31-32页 |
| 3．4．3 S_1基因和S_9基因的酶切检测 | 第32页 |
| 3．4．4 斗南苹果S基因的分离 | 第32-34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 在校期间发表学术论文 | 第44-45页 |
| 作者简历 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 附录 | 第47-53页 |
