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水稻白叶枯病成株抗性机理研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
第一章 前言第13-22页
 1.1 文献综述第13-21页
  1.1.1 植物防卫反应类型第13-14页
   1.1.1.1 预存抗性第13页
   1.1.1.2 系统抗性第13页
   1.1.1.3 非寄主抗性第13-14页
   1.1.1.4 寄主抗性(R基因介导的抗性)第14页
  1.1.2 植物抗病的分子机制第14-18页
   1.1.2.1 无毒基因和抗病基因的互作第14-15页
   1.1.2.2 抗病基因(R gene)第15页
   1.1.2.3 植物防卫反应信号网络第15-18页
    1.1.2.3.1 局部防卫反应信号网络第15-17页
    1.1.2.3.2 系统防卫反应的防卫信号网络第17-18页
  1.1.3 植物成株抗性研究第18-20页
   1.1.3.1 成株抗性的发现与利用第18-19页
   1.1.3.2 成株抗性机理第19-20页
  1.1.4 水稻白叶枯病成株抗性研究第20-21页
 1.2 研究目的和意义第21-22页
第二章 水稻白叶枯病成株抗性相关基因的表达研究第22-36页
 2.1 材料和方法第22-23页
  2.1.1 供试白叶枯病菌株及水稻品种第22页
  2.1.2 菌株培养第22页
  2.1.3 供试水稻品种种植、接种鉴定及取样第22-23页
  2.1.4 抗性鉴定第23页
  2.1.5 RNA提取第23页
  2.1.6 DDRT-PCR和cDNA-AFLP分离成株抗性相关基因第23页
  2.1.7 差异表达片段的验证第23页
 2.2 结果分析第23-32页
  2.2.1 苗期、成株期植株抗病表现第23-24页
  2.2.2 DDRT-PCR分离成株抗性相关基因第24-25页
   2.2.2.1 DDRT-PCR原理第24页
   2.2.2.2 差异表达基因筛选第24-25页
   2.2.2.3 差异片段的回收克隆及测序第25页
   2.2.2.4 Northern Blot验证第25页
  2.2.3 cDNA-AFLP分离成株抗性相关基因第25-32页
   2.2.3.1 cDNA-AFLP原理第25-26页
   2.2.3.2 双链cDNA合成第26-27页
   2.2.3.3 差异表达基因筛选第27-28页
   2.2.3.4 差异表达基因片段的回收、克隆和测序第28-30页
   2.2.3.5 Northern Blot或 RT-PCR验证差异表达基因第30-31页
   2.2.3.6 差异表达基因的功能分析第31-32页
 2.3 讨论第32-36页
  2.3.1 DDRY-PCR和cDNA-AFLP技术的灵敏性第32-33页
  2.3.2 DDRT-PCR和cDNA-AFLP技术的假阳性第33页
  2.3.3 光反应与水稻白叶枯病成株抗性第33-34页
  2.3.4 外因遗传调节与水稻白叶枯病成株抗性第34-35页
  2.3.5 防卫基因第35-36页
第三章 水稻白叶枯病成株抗性的甲基化研究第36-42页
 3.1 材料与方法第37页
  3.1.1 供试白叶枯病菌株及水稻品种第37页
  3.1.2 取样及 DNA提取第37页
  3.1.2 Methylation-sensitive amplification polymorphism(MSAP)第37页
 3.2 结果与分析第37-40页
  3.2.1 MSAP检测到的甲基化模式第37-38页
  3.2.2 早生爱国3号苗期、成株期及不同处理间的甲基化差异第38-40页
 3.3 讨论第40-42页
第四章 逆转座子 Tos17激活与水稻白叶枯病成株抗性第42-48页
 4.1 材料与方法第43-44页
  4.1.1 供试白叶枯病菌株及水稻品种第43页
  4.1.2 取样及 DNA提取第43页
  4.1.3 Sequence-Specific Amplification Polymorphism(SSAP)第43-44页
 4.2 结果与分析第44-46页
  4.2.1 基于 Tos17-LTR的 SSAP第44-45页
  4.2.2 早生爱国3号苗期、成株期及不同处理间的 SSAP多态性第45-46页
 4.3 讨论第46-48页
  4.3.1 SSAP检测基因组激活的 LTR逆转座子的效率第46页
  4.3.2 LTR逆转座子与水稻白叶枯病成株抗性第46-48页
第五章 防卫基因在水稻白叶枯病成株抗性中的表达第48-53页
 5.1 材料与方法第48-49页
  5.1.1 供试白叶枯病菌株及水稻品种第48页
  5.1.2 RNA提取和 RT-PCR第48页
  5.1.3 PAL和 LOX酶活性分析第48-49页
 5.2 结果与分析第49-51页
  5.2.1 抗性鉴定第49页
  5.2.2 RT-PCR分析 PAL,LOX,PBZ1,Cht-1和 PR-1a的表达第49-50页
  5.2.3 PAL和 LOX酶活性分析第50-51页
 5.3 讨论第51-53页
第六章 H_2O_2含量及有关抗性相关酶活性的测定第53-60页
 6.1 材料与方法第53-55页
  6.1.1 供试白叶枯病菌株及水稻品种第53页
  6.1.2 H_2O_2含量测定第53-54页
  6.1.3 POD、PPO、CAT和 SOD制备与活性测定第54-55页
  6.1.4 蛋白质含量的测定第55页
 6.2 结果与分析第55-59页
  6.2.1 苗期、成株期叶片 H_2O_2含量变化第55页
  6.2.2 苗期、成株期叶片 POD活性变化第55-57页
  6.2.3 苗期、成株期叶片 PPO活性变化第57页
  6.2.4 苗期、成株期叶片 SOD活性变化第57-58页
  6.2.5 苗期、成株期叶片 CAT活性变化第58-59页
 6.3 讨论第59-60页
结语与展望第60-62页
参考文献第62-76页
致谢第76-77页
附录第77-87页
 Appendict Ⅰ Protocol for DDRT-PCR第77-79页
 Appendict Ⅱ Protocol for cDNA-AFLP第79-82页
 Appendict Ⅱ Northern Blot protocol(DIG Probe)第82-86页
 Appendict Ⅳ DNA Extraction Protocol第86页
 Appendict Ⅴ 感受态细胞制备及热击法质粒转化第86-87页
 Appendict Ⅵ 测序质粒的提取方法第87页

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