| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1．1 课题的提出 | 第12页 |
| 1．2 前人研究进展 | 第12-22页 |
| 1．2．1 Bt基因研究进展 | 第12-16页 |
| 1．2．2 eIF的研究进展 | 第16-17页 |
| 1．2．3 辣椒遗传转化研究进展 | 第17-22页 |
| 1．2．3．1 辣椒再生体系的研究进展 | 第17-21页 |
| 1．2．3．2 辣椒转化体系的研究进展 | 第21-22页 |
| 1．3 课题研究内容 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-31页 |
| 2．1 实验材料 | 第24页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第24页 |
| 2．1．2 菌株、质粒 | 第24页 |
| 2．1．3 试剂 | 第24页 |
| 2．2 实验方法 | 第24-31页 |
| 2．2．1 辣椒再生体系的建立 | 第24-26页 |
| 2．2．1．1 无菌苗的获得和外植体的准备 | 第24-25页 |
| 2．2．1．2 再生体系的建立 | 第25页 |
| 2．2．1．3 AgNO_3及 STS对子叶分化的影响 | 第25页 |
| 2．2．1．4 不定芽的伸长 | 第25页 |
| 2．2．1．5 培养基有机成分对不定芽伸长的影响 | 第25页 |
| 2．2．1．6 辣椒幼苗茎叶提取液对不定芽伸长的影响 | 第25-26页 |
| 2．2．1．7 生根 | 第26页 |
| 2．2．1．8 斩首再生法 | 第26页 |
| 2．2．2 基因克隆与载体构建 | 第26-27页 |
| 2．2．2．1 Ca-eIF4E基因克隆及表达载体构建 | 第26-27页 |
| 2．2．2．2 cryIA(c)表达载体的构建 | 第27页 |
| 2．2．3 辣椒遗传转化体系的建立 | 第27-28页 |
| 2．2．3．1 Km对子叶不定芽诱导的影响 | 第27页 |
| 2．2．3．2 Cef与 Cb对子叶不定芽诱导的影响 | 第27页 |
| 2．2．3．3 农杆菌介导的遗传转化 | 第27-28页 |
| 2．2．3．3．1 菌液的准备 | 第27-28页 |
| 2．2．3．3．2 农杆菌侵染 | 第28页 |
| 2．2．3．3．3 选择培养 | 第28页 |
| 2．2．3．3．4 转化苗的生根与移栽 | 第28页 |
| 2．2．4 转基因植株的分子鉴定 | 第28-31页 |
| 2．2．4．1 PCR检测 | 第28-31页 |
| 2．2．4．1．1 辣椒基因组 DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2．2．4．1．2 质粒 DNA的提取 | 第29页 |
| 2．2．4．1．3 PCR扩增 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-46页 |
| 3．1 辣椒再生体系 | 第31-41页 |
| 3．1．1 不定芽的诱导 | 第31-36页 |
| 3．1．1．1 不同外植体类型对不定芽诱导的影响 | 第31-32页 |
| 3．1．1．2 不同基因型材料对子叶诱导不定芽的影响 | 第32-33页 |
| 3．1．1．3 不同苗龄的子叶外植体对不定芽诱导的影响 | 第33-34页 |
| 3．1．1．4 不同激素组合与配比对子叶诱导不定芽的影响 | 第34-35页 |
| 3．1．1．5 AgNO_3和 STS对子叶诱导不定芽的影响 | 第35-36页 |
| 3．1．2 不定芽的伸长 | 第36-41页 |
| 3．1．2．1 GA_3及6-BA+IAA对不定芽伸长的影响 | 第36-37页 |
| 3．1．2．2 不同的诱导时间对不定芽伸长的影响 | 第37-38页 |
| 3．1．2．3 不同激素组合与配比对不定芽伸长的影响 | 第38-39页 |
| 3．1．2．4 培养基有机成分对不定芽伸长的影响 | 第39-40页 |
| 3．1．2．5 辣椒幼苗提取液对不定芽伸长的影响 | 第40-41页 |
| 3．1．3 生根 | 第41页 |
| 3．2 Ca-eIF4E和cryIA(c)基因植物表达载体构建 | 第41-42页 |
| 3．3 农杆菌介导的辣椒转化体系 | 第42-44页 |
| 3．3．1 辣椒的子叶转化 | 第42-44页 |
| 3．3．1．1 外植体的 Km抗性 | 第42页 |
| 3．3．1．2 Cef与 Cb对辣椒子叶再生的影响 | 第42-43页 |
| 3．3．1．3 预培养、共培养及侵染时间对转化的影响 | 第43-44页 |
| 3．3．2 辣椒的斩首再生转化 | 第44页 |
| 3．3．2．1 Km对斩首再生的影响 | 第44页 |
| 3．3．2．2 预培养、共培养及侵染时间对转化的影响 | 第44页 |
| 3．4 转基因植株检测 | 第44-46页 |
| 3．4．1 PCR分析 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-53页 |
| 4．1 辣椒再生体系 | 第46-49页 |
| 4．1．1 基因型、外植体类型对辣椒再生的影响 | 第46页 |
| 4．1．2 激素的使用 | 第46-47页 |
| 4．1．3 乙烯抑制剂在芽诱导中的应用 | 第47-48页 |
| 4．1．4 有机物对不定芽伸长的影响 | 第48页 |
| 4．1．5 不同的诱导时间对不定芽伸长的影响 | 第48-49页 |
| 4．2 辣椒的转化 | 第49-52页 |
| 4．2．1 Km的应用 | 第49-50页 |
| 4．2．2 Cef与 Cb的应用 | 第50页 |
| 4．2．3 通过子叶再生的转化体系 | 第50-51页 |
| 4．2．4 通过斩首再生的转化体系 | 第51-52页 |
| 4．3 基因克隆 | 第52页 |
| 4．4 后续工作 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 图版 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63页 |
