| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-14页 |
| ·饲料酶制剂的应用现状 | 第8页 |
| ·饲料中非淀粉多糖(NSP)抗营养作用 | 第8页 |
| ·β-甘露聚糖酶和内切β?1,3?葡聚糖酶 | 第8-13页 |
| ·β-甘露聚糖酶 | 第8-12页 |
| ·内切β?1,3?葡聚糖酶 | 第12-13页 |
| ·本论文的研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 地衣芽孢杆菌β?甘露聚糖酶的纯化和基因克隆 | 第14-36页 |
| ·材料和方法 | 第14-21页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·工具酶和试剂 | 第14-15页 |
| ·培养基和培养条件 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·酶活力测定 | 第16页 |
| ·蛋白质测定 | 第16-17页 |
| ·酶的分离和纯化 | 第17-18页 |
| ·酶学分析 | 第18-19页 |
| ·SDS-PAGE | 第19页 |
| ·B.licheniformis 2004 染色体的提取 | 第19页 |
| ·DNA 操作技术 | 第19-20页 |
| ·基因的克隆和重组表达质粒的构建 | 第20-21页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中表达和表达产物分析 | 第21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-36页 |
| ·粗酶液的获得 | 第21-22页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分离纯化 | 第22-25页 |
| ·β-甘露聚糖酶的酶学性质 | 第25-30页 |
| ·地衣芽孢杆菌2004β-甘露聚糖酶基因的克隆和重组表达载体构建 | 第30-34页 |
| ·地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶基因的异源表达及产物分析 | 第34-36页 |
| 第三章 粗糙脉胞菌内切β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆,改造与初步表达 | 第36-45页 |
| ·材料与方法 | 第36-39页 |
| ·质粒和菌体 | 第36页 |
| ·引物和模板 | 第36页 |
| ·主要试剂及工具 | 第36-37页 |
| ·培养基及培养条件 | 第37页 |
| ·PCR 扩增内切β-1,3-葡聚糖酶基因(去编码信号肽部分)和测序确认 | 第37页 |
| ·pET28a-glu 重组载体的构建 | 第37-38页 |
| ·编码β?1,3?葡聚糖酶结构基因序列在大肠杆菌中的表达 | 第38页 |
| ·酶活测定 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-45页 |
| ·PCR 方法扩增和改造粗糙脉胞菌内切β-1,3-葡聚糖酶基因 | 第39-42页 |
| ·重组表达质粒pET28a-glu 的构建 | 第42-43页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达与检测 | 第43-45页 |
| 论文主要结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 硕士研究生期间发表的论文 | 第51页 |