| 中文摘要 | 第1-3页 |
| 英文摘要 | 第3-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-32页 |
| ·马铃薯病毒病 | 第8-10页 |
| ·寄主因子的综述 | 第10-17页 |
| ·与RNA病毒复制相关寄主因子的发现 | 第11页 |
| ·研究植物RNA病毒寄主因子的模式系统 | 第11-13页 |
| ·植物RNA病毒寄主因子 | 第13-17页 |
| ·RNAi的研究进展 | 第17-24页 |
| ·RNA沉默在生物界中存在的普遍性 | 第18页 |
| ·RNAi的发生机制 | 第18-21页 |
| ·RNAi的意义及应用前景 | 第21-22页 |
| ·实施RNAi技术具体途径 | 第22-23页 |
| ·RNAi技术的优点和局限性 | 第23-24页 |
| ·双子叶植物的遗传转化 | 第24-31页 |
| ·双子叶植物遗传转化的受体系统 | 第24-25页 |
| ·双子叶植物遗传转化的受体的再生系统及其特性 | 第25-26页 |
| ·双子叶植物遗传转化的载体系统 | 第26-27页 |
| ·植物遗传转化的方法 | 第27-31页 |
| ·本研究工作的范围和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-45页 |
| ·本实验所用细菌菌株、培养基及其它溶液的种类与组成 | 第32-35页 |
| ·细菌菌株与质粒 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-34页 |
| ·溶液的配制 | 第34-35页 |
| ·基因克隆及分子操作 | 第35-43页 |
| ·马铃薯总RNA的提取纯化 | 第35-36页 |
| ·马铃薯总DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第37页 |
| ·质粒的热转化 | 第37页 |
| ·质粒的提取 | 第37-38页 |
| ·用三亲结合的方法向农杆菌导入目的质粒 | 第38页 |
| ·内切酶反应与连接反应 | 第38-39页 |
| ·cDNA的合成 | 第39-41页 |
| ·PCR反应 | 第41-42页 |
| ·凝胶电泳 | 第42页 |
| ·从凝胶中回收目的DNA片段 | 第42-43页 |
| ·马铃薯愈伤组织培养及转化 | 第43-45页 |
| ·马铃薯无菌苗系的建立 | 第43页 |
| ·预培养 | 第43-44页 |
| ·含表达载体的农杆菌活化 | 第44页 |
| ·共培养 | 第44页 |
| ·抗性愈伤组织的诱导 | 第44页 |
| ·植株再生 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-78页 |
| ·马铃薯全长PTOM1基因cDNA的克隆 | 第45-60页 |
| ·马铃薯总RNA制备 | 第45页 |
| ·PTOM1 cDNA的克隆(RT-PCR) | 第45-53页 |
| ·PTOM1基因与拟南芥TOM1基因同源性比较 | 第53-56页 |
| ·PTOM1基因片段的克隆 | 第56-58页 |
| ·PTOM1基因片段植物表达载体的构建 | 第58-60页 |
| ·用PTOM1 cDNA构建病毒表达载体 | 第60-62页 |
| ·RNA干涉质粒和植物表达载体的构建 | 第62-70页 |
| ·RNAi克隆中间载体pUCCRNAi质粒 | 第62-64页 |
| ·马铃薯cDNA RNAi质粒的构建 | 第64-70页 |
| ·马铃薯再生体系的建立和基因转化 | 第70-78页 |
| ·不同激素及其组合马铃薯外植体分化效率的影响 | 第70-72页 |
| ·不同浓度的头孢霉素(Cef)与羧苄青霉素(Car)对农杆菌EHA105生长的影响 | 第72页 |
| ·外植体对卡那霉素的敏感性 | 第72-73页 |
| ·转基因植株的分子鉴定 | 第73-78页 |
| 第四章 讨论 | 第78-81页 |
| ·马铃薯PTOM1基因 | 第78-79页 |
| ·RNAi转基因马铃薯的特点 | 第79页 |
| ·不同马铃薯品种对农杆菌介导的遗传转化效率的影响 | 第79-80页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 附录1 马铃薯组织培养用培养基 | 第91-94页 |
| 附录2 实验中用到的主要仪器 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |