| 前言 | 第1-26页 |
| 一 hMR-1的单链构象多态性分析 | 第10-13页 |
| (一) PCR-SSCP的基本原理 | 第11-12页 |
| (二) PCR-SSCP的基本应用 | 第12-13页 |
| 二 hMR-1蛋白分子水平功能分析 | 第13-19页 |
| (一) 酵母双杂交技术的基本原理 | 第14-15页 |
| (二) 酵母双杂交的优缺点 | 第15-17页 |
| (1) 酵母双杂交的优点 | 第15-16页 |
| (2) 酵母双杂交的缺点 | 第16页 |
| (3) 酵母双杂交的改进和发展 | 第16-17页 |
| (三) 酵母双杂交的应用 | 第17-19页 |
| 三 hMR-1高表达转基因动物的分析 | 第19-26页 |
| (一) 构建转基因的原则 | 第19-20页 |
| (二) 转基因小鼠的制备原理与方法 | 第20-23页 |
| (1) 产生转基因小鼠的程序 | 第20-21页 |
| (2) 产生转基因小鼠的方法 | 第21-23页 |
| (三) 转基因小鼠的检测 | 第23-24页 |
| (四) 转基因技术的应用 | 第24-26页 |
| 第一部分 hMR-1的基因多态性分析 | 第26-39页 |
| 一:材料与方法 | 第26-30页 |
| 1 材料部分 | 第26-27页 |
| ·特殊试剂及缓冲液 | 第26-27页 |
| ·样本来源 | 第27页 |
| 2 方法部分 | 第27-30页 |
| ·人类全血总DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·PCR-SSCP分析 | 第28-30页 |
| 二:实验结果与讨论 | 第30-39页 |
| 1 引物设计 | 第30-35页 |
| 2 PCR-SSCP分析 | 第35-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第二部分 hMR-1蛋白分子水平功能分析 | 第39-68页 |
| 一:材料与方法 | 第39-47页 |
| 1 材料部分 | 第39-44页 |
| ·菌种和质粒 | 第39-40页 |
| ·试剂 | 第40-44页 |
| 2 方法部分 | 第44-47页 |
| ·酵母双杂交方法 | 第44-47页 |
| 二:实验结果与讨论 | 第47-68页 |
| 1 MR-1酵母双杂交筛选骨骼肌文库 | 第47-63页 |
| ·酵母双杂BD-hMR-1载体构建 | 第47-48页 |
| ·BD-hMR-1表达载体构建及自激活分析 | 第48-49页 |
| ·筛选骨骼肌文库得到26个阳性酵母克隆 | 第49-50页 |
| ·酵母质粒分离得到9个阳性克隆共代表8种蛋白 | 第50-51页 |
| ·酵母双杂交得到AD克隆测序结果及序列分析 | 第51-63页 |
| 2 hMR-1分段与AD蛋白相互作用分析 | 第63-66页 |
| 3 讨 论 | 第66-68页 |
| 第三部分 hMR-1转基因小鼠家系的建立 | 第68-84页 |
| 一:材料与方法 | 第68-73页 |
| 1 材料部分 | 第68-71页 |
| ·质粒和实验动物 | 第68页 |
| ·特殊试剂和仪器 | 第68-71页 |
| 2 方法部分 | 第71-73页 |
| ·转基因动物方法 | 第71页 |
| ·鼠尾总DNA提取方法 | 第71-72页 |
| ·PCR鉴定转基因阳性小鼠的基因整合 | 第72页 |
| ·小鼠组织总蛋白Western Blot检测 | 第72-73页 |
| 二:实验结果与讨论 | 第73-84页 |
| 1 获得首建F1代hMR-1转基因小鼠 | 第73-77页 |
| ·构建转基因DNA片段 | 第73-75页 |
| ·F1代hMR-1转基因鼠的获得 | 第75-77页 |
| 2 繁殖获得F2代hMR-1转基因小鼠 | 第77-78页 |
| 3 繁殖获得F3代hMR-1转基因小鼠 | 第78-79页 |
| 4 F3代转基因小鼠心脏组织hMR-1蛋白表达水平检测 | 第79-81页 |
| 5 讨论 | 第81-84页 |
| ·转基因小鼠的获得 | 第81-82页 |
| ·转基因小鼠心脏组织的Western Blot分析 | 第82-84页 |
| 参考文献: | 第84-88页 |
| 致 谢 | 第88-89页 |
| 中文摘要 | 第89-91页 |
| ABSTRACT | 第91-92页 |