中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-23页 |
·杨树育种研究进展 | 第12-15页 |
·常规育种 | 第12-13页 |
·基因工程育种 | 第13-15页 |
·葡聚糖酶(BG2)的作用及研究进展 | 第15-19页 |
·BG2 的性质及分类 | 第15-16页 |
·BG2 的诱导产生 | 第16-17页 |
·BG2 的抗病机制和应用 | 第17-19页 |
·磷脂酶 D(PLD)基因的作用及研究进展 | 第19-21页 |
·磷脂酶 D 的发现和 PLD 基因家族 | 第19页 |
·PLD 的生理作用 | 第19-21页 |
·选题依据 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-34页 |
·试验材料 | 第23-27页 |
·植物材料 | 第23页 |
·农杆菌菌株和质粒 | 第23-24页 |
·细菌培养基 | 第24页 |
·植物激素和植物培养基 | 第24-25页 |
·植物激素 | 第24-25页 |
·植物培养基 | 第25页 |
·试剂 | 第25-27页 |
·抗生素 | 第25页 |
·植物基因组 DNA 提取液 | 第25-26页 |
·大肠杆菌质粒提取缓冲液 | 第26页 |
·农杆菌双元载体质粒提取试剂 | 第26页 |
·电泳缓冲液配制 | 第26页 |
·Southern 杂交试剂 | 第26-27页 |
·酶与生化试剂 | 第27页 |
·PCR 引物 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-34页 |
·黑杨 G1 再生体系的建立 | 第27-28页 |
·幼叶培养再生体系的建立 | 第27页 |
·G1 黑杨的壮苗培养 | 第27-28页 |
·组培苗根的诱导 | 第28页 |
·G1黑杨遗传转化体系的建立 | 第28-29页 |
·选择压的确定 | 第28页 |
·β-1,3-葡聚糖酶基因的转化 | 第28页 |
·反义PLDγ基因的转化 | 第28页 |
·农杆菌介导传统法与改良法的对比 | 第28-29页 |
·转化植株的分子检测 | 第29-34页 |
·大肠杆菌 DH5a 感受态细胞的制备及转化 | 第29页 |
·碱法少量提取质粒 DNA | 第29-30页 |
·提取农杆菌双元载体质粒 | 第30页 |
·植物基因组 DNA 的提取 | 第30-31页 |
·PCR 及电泳分析 | 第31-32页 |
·植物基因组 DNA 定量 | 第31页 |
·PCR 反应 | 第31-32页 |
·电泳 | 第32页 |
·PCR-Southern 检测 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-45页 |
·黑杨 G1 再生体系的建立 | 第34-39页 |
·外植体的芽分化 | 第34-36页 |
·再生芽的获得 | 第34-35页 |
·不同激素浓度对芽分化的影响 | 第35页 |
·pH 值对芽分化的影响 | 第35页 |
·光照对芽分化的影响 | 第35页 |
·外植体密度对芽分化的影响 | 第35-36页 |
·G1黑杨的壮苗 | 第36-38页 |
·黑杨 G1 根的诱导 | 第38-39页 |
·黑杨 G1 组培苗生根培养基的筛选 | 第38-39页 |
·封口材料的影响 | 第39页 |
·黑杨G1遗传转化体系的建立 | 第39-41页 |
·农杆菌介导法的改良 | 第39-40页 |
·转化植株的获得 | 第40页 |
·选择压的确定 | 第40-41页 |
·抑菌性抗生素的选择 | 第41页 |
·转化植株的分子生物学检测 | 第41-45页 |
·PCR 扩增检测 | 第41-43页 |
·植物基因组 DNA 的定量 | 第41-42页 |
·BG2 基因 PCR 扩增检测 | 第42-43页 |
·反义 PLDγ基因扩增检测 | 第43页 |
·PCR-Southern 杂交检测 | 第43-45页 |
·BG2 基因的 PCR-Southern 杂交检测 | 第43页 |
·反义PLDγ基因的PCR-Southern杂交检测 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
·农杆菌介导转化方法的优化 | 第45页 |
·β-1,3-葡聚糖酶基因转化的可行性 | 第45-46页 |
·预期结果的实现需要大田试验 | 第46页 |
·下一步工作设想 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
致谢 | 第56页 |