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杨树转β-1,3-葡聚糖酶(BG2)及反义磷脂酶D_γ(PLD_γ)基因的研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 引言第12-23页
   ·杨树育种研究进展第12-15页
     ·常规育种第12-13页
     ·基因工程育种第13-15页
   ·葡聚糖酶(BG2)的作用及研究进展第15-19页
     ·BG2 的性质及分类第15-16页
     ·BG2 的诱导产生第16-17页
     ·BG2 的抗病机制和应用第17-19页
   ·磷脂酶 D(PLD)基因的作用及研究进展第19-21页
     ·磷脂酶 D 的发现和 PLD 基因家族第19页
     ·PLD 的生理作用第19-21页
   ·选题依据第21-23页
2 材料与方法第23-34页
   ·试验材料第23-27页
     ·植物材料第23页
     ·农杆菌菌株和质粒第23-24页
     ·细菌培养基第24页
     ·植物激素和植物培养基第24-25页
       ·植物激素第24-25页
       ·植物培养基第25页
     ·试剂第25-27页
       ·抗生素第25页
       ·植物基因组 DNA 提取液第25-26页
       ·大肠杆菌质粒提取缓冲液第26页
       ·农杆菌双元载体质粒提取试剂第26页
       ·电泳缓冲液配制第26页
       ·Southern 杂交试剂第26-27页
       ·酶与生化试剂第27页
     ·PCR 引物第27页
   ·实验方法第27-34页
     ·黑杨 G1 再生体系的建立第27-28页
       ·幼叶培养再生体系的建立第27页
       ·G1 黑杨的壮苗培养第27-28页
       ·组培苗根的诱导第28页
     ·G1黑杨遗传转化体系的建立第28-29页
       ·选择压的确定第28页
       ·β-1,3-葡聚糖酶基因的转化第28页
       ·反义PLDγ基因的转化第28页
       ·农杆菌介导传统法与改良法的对比第28-29页
     ·转化植株的分子检测第29-34页
       ·大肠杆菌 DH5a 感受态细胞的制备及转化第29页
       ·碱法少量提取质粒 DNA第29-30页
       ·提取农杆菌双元载体质粒第30页
       ·植物基因组 DNA 的提取第30-31页
       ·PCR 及电泳分析第31-32页
         ·植物基因组 DNA 定量第31页
         ·PCR 反应第31-32页
         ·电泳第32页
       ·PCR-Southern 检测第32-34页
3 结果与分析第34-45页
   ·黑杨 G1 再生体系的建立第34-39页
     ·外植体的芽分化第34-36页
       ·再生芽的获得第34-35页
       ·不同激素浓度对芽分化的影响第35页
       ·pH 值对芽分化的影响第35页
       ·光照对芽分化的影响第35页
       ·外植体密度对芽分化的影响第35-36页
     ·G1黑杨的壮苗第36-38页
     ·黑杨 G1 根的诱导第38-39页
       ·黑杨 G1 组培苗生根培养基的筛选第38-39页
       ·封口材料的影响第39页
   ·黑杨G1遗传转化体系的建立第39-41页
     ·农杆菌介导法的改良第39-40页
     ·转化植株的获得第40页
     ·选择压的确定第40-41页
     ·抑菌性抗生素的选择第41页
   ·转化植株的分子生物学检测第41-45页
     ·PCR 扩增检测第41-43页
       ·植物基因组 DNA 的定量第41-42页
       ·BG2 基因 PCR 扩增检测第42-43页
       ·反义 PLDγ基因扩增检测第43页
     ·PCR-Southern 杂交检测第43-45页
       ·BG2 基因的 PCR-Southern 杂交检测第43页
       ·反义PLDγ基因的PCR-Southern杂交检测第43-45页
4 讨论第45-47页
   ·农杆菌介导转化方法的优化第45页
   ·β-1,3-葡聚糖酶基因转化的可行性第45-46页
   ·预期结果的实现需要大田试验第46页
   ·下一步工作设想第46-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-56页
致谢第56页

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