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猪脐静脉血管内皮细胞的分离培养及猪瘟病毒对其的致病变作用

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-13页
文献综述第13-36页
 第一章 血管内皮的体外培养及其特征第13-25页
   ·血管内皮细胞培养的发展简况第13页
   ·血管内皮细胞体外培养的应用第13-14页
   ·血管内皮细胞的结构与功能第14-17页
     ·血管内皮细胞的结构第14页
     ·内皮细胞的表面抗原第14-15页
     ·EC 的激活第15页
     ·血管内皮细胞的功能第15-17页
       ·调节血管通透性第15-16页
       ·维持血管壁的完整性第16页
       ·抗凝与促凝作用第16页
       ·参与血管运动的调节第16页
       ·在溶解纤维蛋白中的作用第16页
       ·与血小板相互作用第16-17页
       ·与白细胞的相互作用第17页
       ·参与免疫疾病的发生第17页
       ·对肿瘤细胞产生一定程度的免疫应答第17页
   ·血管内皮细胞培养的特性第17-25页
     ·体外培养内皮细胞的来源第17-18页
     ·体外培养内皮细胞的形态结构第18页
       ·大体形态第18页
       ·超微结构第18页
     ·体外培养内皮细胞的培养条件第18-20页
       ·常用的合成培养基第19页
       ·血清第19页
       ·促生长因子第19-20页
       ·EC 的无血清培养第20页
     ·细胞的生存环境第20-22页
       ·温度第20-21页
       ·气相及 pH第21页
       ·渗透压第21页
       ·附着底物第21页
       ·无毒及无污染第21-22页
     ·生长方式及特点第22-23页
       ·生长方式第22页
       ·生长特点第22-23页
     ·细胞的生长和增殖第23-25页
 第二章 猪瘟及猪瘟病毒的研究进展第25-36页
   ·猪瘟概况第25-26页
   ·猪瘟病毒第26-31页
     ·病毒粒子结构、形态及理化特性第26-27页
     ·猪瘟病毒的基因组结构和全序列研究概述第27-29页
     ·猪瘟病毒基因组编码的蛋白质及其功能第29-31页
       ·猪瘟病毒的结构蛋白及其功能第29-30页
       ·非结构蛋白及功能第30-31页
   ·猪瘟病毒致病机理第31-36页
     ·猪瘟病毒与宿主细胞的相互作用第31-33页
     ·致细胞病变型CSFV第33-36页
实验研究第36-54页
 第三章 猪脐静脉血管内皮细胞的培养及生长特性的鉴定第36-45页
   ·材料第36-38页
     ·新鲜猪脐带第36页
     ·培养基第36页
     ·血清第36页
     ·胰岛素第36页
     ·肝素第36-37页
     ·3%谷氨酰胺第37页
     ·抗生素第37页
     ·缓冲液第37页
     ·消化液第37-38页
       ·胶原酶第37页
       ·ATV使用液第37-38页
       ·柠檬酸胰酶第38页
     ·间接免疫荧光试剂第38页
     ·主要仪器设备第38页
   ·方法第38-40页
     ·培养液的准备第38-39页
       ·原代培养用生长液第38-39页
       ·传代培养用生长液第39页
     ·猪脐静脉血管内皮细胞的分离第39页
     ·猪脐静脉血管内皮细胞的原代培养第39页
     ·血管内皮细胞传代第39页
     ·血管内皮细胞的纯化第39页
     ·血管内皮细胞生长曲线的测定第39-40页
     ·血管内皮细胞的鉴定第40页
       ·内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原(F-ⅧRAg)鉴定第40页
       ·电镜样本的制作和观察第40页
   ·结果第40-43页
     ·细胞形态和特征第40页
     ·细胞的生长曲线第40页
     ·细胞的鉴定结果第40-43页
       ·F-ⅧRAg 的检测第40-42页
       ·扫描电镜观察第42-43页
   ·讨论第43-44页
   ·小结第44-45页
 第四章 猪瘟病毒对猪血管内皮细胞的致病变作用第45-54页
   ·材料第45页
     ·毒株第45页
     ·猪脐静脉血管内皮细胞第45页
     ·主要试剂第45页
     ·主要仪器设备第45页
   ·方法第45-48页
     ·猪脐静脉血管内皮细胞分离与培养第45-46页
     ·病毒材料的准备第46页
     ·接毒及观察第46页
     ·引物的设计与合成第46页
     ·RNA 提取第46-47页
     ·RT-PCR 和 nPCR第47-48页
       ·反转录合成 cDNA第47页
       ·PCR 和 nPCR第47-48页
     ·琼脂糖凝胶电泳第48页
     ·接毒细胞电镜观察第48页
   ·结果第48-52页
     ·感染 CSFV 石门强毒株细胞的形态特征第48-50页
     ·CSFV 石门株 E2 基因 RT-PCR 检测第50页
     ·透射电镜观察第50-52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
结论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-64页
个人简介第64页

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