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低氧运动促进肌组织血管生成的机制

摘要第1-4页
英文摘要第4-12页
1 前言第12-17页
   ·研究背景第12-13页
   ·研究意义与目前研究状况第13-14页
   ·研究内容第14-15页
   ·研究总体思路第15-17页
     ·基本理论第15页
     ·细胞培养实验流程第15-16页
     ·动物实验流程第16-17页
2 低氧调节培养人脐静脉内皮细胞HIF-1 与VEGF、Flt-1 DNA 结合活性的研究第17-28页
   ·材料与方法第18-23页
     ·实验仪器第18页
     ·主要实验试剂及配制第18-19页
       ·主要实验试剂第18-19页
       ·主要实验试剂的配制第19页
     ·细胞的培养及低氧处理第19-20页
       ·人脐静脉内皮细胞培养第19-20页
       ·低氧处理第20页
     ·实验方法第20-23页
       ·核蛋白抽提第20-21页
       ·凝胶迁移率变动实验第21-22页
       ·转膜第22页
       ·检测第22-23页
       ·凝胶迁移率变动实验结果的凝胶图像分析第23页
   ·研究结果第23-25页
     ·不同低氧条件下培养液中氧分压检测结果第23页
     ·HIF-1 蛋白与VEGF 增强子序列的EMSA 实验观察结果第23-24页
     ·HIF-1 蛋白与Flt-1 启动子序列的EMSA 实验观察结果第24页
     ·HIF-1 蛋白与VEGF 增强子、Flt-1 启动子序列的EMSA 凝胶图像分析结果第24-25页
   ·分析与讨论第25-27页
   ·小结第27-28页
3 低氧及运动促进HIF-1α表达对大鼠肌组织VEGF、Flt-1 mRNA 的影响第28-57页
   ·材料与方法第29-35页
     ·实验仪器第29页
     ·实验试剂及药品第29-30页
     ·实验对象及分组第30页
     ·运动训练安排第30-31页
     ·低氧处理第31页
     ·实验取材第31页
     ·实验方法第31-34页
       ·动脉血气分析第31页
       ·HIF-1α免疫组织化学标本制作第31-32页
       ·VEGF、Flt-1 mRNA 原位杂交标本制作第32-34页
       ·免疫组织化学及原位杂交显微图像分析第34页
     ·统计分析第34-35页
   ·实验结果第35-52页
     ·大鼠动脉血气指标检测第35-36页
       ·动脉血气指标PaO_2、O_2sat、O_2cont 检测结果第35页
       ·PaO_2析因试验结果的方差分析第35-36页
     ·大鼠肌组织HIF-1α免疫组织化学及显微图像分析结果第36-38页
       ·心肌组织HIF-1α免疫组织化学观察结果第36页
       ·心肌组织HIF-1α免疫组织化学染色的显微图像分析结果第36页
       ·心肌组织 HIF-1α免疫组织化学染色析因试验结果的方差分析第36-37页
       ·骨骼肌组织HIF-1α免疫组织化学观察结果第37页
       ·骨骼肌组织HIF-1α免疫组织化学染色显微图像分析结果第37-38页
       ·骨骼肌组织 HIF-1α免疫组织化学染色析因试验结果的方差分析第38页
     ·大鼠肌组织VEGF mRNA 原位杂交及显微图像分析第38-41页
       ·心肌组织VEGF mRNA 原位杂交观察结果第38页
       ·心肌组织VEGF mRNA 原位杂交显微图像分析结果第38-39页
       ·心肌组织VEGF 原位杂交染色析因试验结果的方差分析第39页
       ·骨骼肌组织VEGF mRNA 原位杂交观察结果第39-40页
       ·骨骼肌组织VEGF mRNA 原位杂交显微图像分析结果第40页
       ·骨骼肌组织VEGF mRNA 原位杂交染色析因试验结果的方差分析第40-41页
     ·大鼠肌组织Flt-1 mRNA 原位杂交及显微图像分析第41-44页
       ·心肌组织Flt-1 mRNA 原位杂交观察结果第41页
       ·心肌组织Flt-1 mRNA 原位杂交染色显微图像分析结果第41-42页
       ·心肌组织Flt-1 mRNA 原位杂交染色析因试验结果的方差分析第42页
       ·骨骼肌组织Flt-1 mRNA 原位杂交观察结果第42页
       ·骨骼肌组织Flt-1 mRNA 原位杂交显微图像分析结果第42-43页
       ·骨骼肌组织Flt-1 mRNA 原位杂交染色析因试验结果的方差分析第43-44页
     ·大鼠肌组织 HIF-1α免疫组织化学染色阳性指数与 PaO_2 相关分析第44页
     ·大鼠肌组织VEGF mRNA、Flt-1 mRNA 与HIF-1α相关分析第44-52页
       ·心肌组织VEGF mRNA、Flt-1 mRNA 与HIF-1α相关分析结果第44页
       ·骨骼肌组织VEGF mRNA、Flt-1 m RNA 与HIF-1α相关分析第44-52页
   ·分析与讨论第52-56页
     ·低氧及运动对大鼠动脉血氧合状态的不同作用第52页
     ·低氧及运动大鼠动脉血氧合状态的改变对肌组织 HIF-1α蛋白表达的影响第52-54页
     ·低氧及运动对大鼠肌组织VEGF、Flt-1 mRNA 的影响第54-55页
     ·HIF-1α对肌组织VEGF、Flt-1 mRNA 的促进作用第55-56页
   ·小结第56-57页
4 VEGF、Flt-1 促进低氧及运动大鼠肌组织血管生成的作用第57-83页
   ·材料与方法第58-61页
     ·实验仪器第58页
     ·实验试剂及药品第58页
     ·实验动物饲养及分组第58页
     ·运动训练安排第58页
     ·低氧处理第58页
     ·取材及制备第58页
     ·实验方法第58-60页
       ·血清VEGF 含量的酶联免疫吸附检测第58-59页
       ·VEGF、Flt-1、CD34 免疫组织化学标本制作第59页
       ·VEGF、Flt-1、CD34 免疫组织化学显微图像分析第59页
       ·微血管密度参数的测算方法第59-60页
     ·统计分析第60-61页
   ·实验结果第61-78页
     ·大鼠血清VEGF 含量的酶联免疫吸附检测第61-62页
       ·血清VEGF 含量的酶联免疫吸附检测结果第61页
       ·血清VEGF 含量析因试验结果的方差分析第61-62页
     ·大鼠肌组织VEGF 免疫组织化学染色及图像分析第62-64页
       ·心肌组织VEGF 免疫组织化学染色观察结果第62页
       ·心肌组织VEGF 免疫组织化学染色的图像分析结果第62页
       ·心肌组织VEGF 免疫组织化学染色析因试验结果的方差分析第62-63页
       ·骨骼肌组织VEGF 免疫组织化学染色观察结果第63页
       ·骨骼肌组织VEGF 免疫组织化学染色的图像分析结果第63-64页
       ·骨骼肌组织VEGF 免疫组织化学染色析因试验结果的方差分析第64页
     ·大鼠肌组织Flt-1 免疫组织化学染色及图像分析第64-67页
       ·心肌组织Flt-1 免疫组织化学染色观察结果第64页
       ·心肌组织Flt-1 免疫组织化学染色的图像分析结果第64-65页
       ·心肌组织 Flt-1 免疫组织化学染色析因试验结果的方差分析第65页
       ·骨骼肌组织Flt-1 免疫组织化学染色观察结果第65-66页
       ·骨骼肌组织Flt-1 免疫组织化学染色的图像分析结果第66页
       ·骨骼肌组织 Flt-1 免疫组织化学染色析因试验结果的方差分析第66-67页
     ·大鼠肌组织CD34 免疫组织化学染色及微血管体视学分析第67-70页
       ·心肌组织CD34 免疫组织化学染色观察结果第67页
       ·心肌组织微血管体视学分析结果第67页
       ·心肌组织微血管密度参数析因试验结果的方差分析第67-68页
       ·骨骼肌组织CD34 免疫组织化学染色观察结果第68页
       ·骨骼肌组织微血管体视学分析结果第68-69页
       ·骨骼肌组织微血管密度参数析因试验结果的方差分析第69-70页
     ·大鼠肌组织微血管密度与血清VEGF 含量的相关分析第70-71页
       ·心肌组织微血管密度与血清VEGF 含量的相关分析结果第70页
       ·骨骼肌组织微血管密度与血清VEGF 含量的相关分析结果第70-71页
     ·大鼠肌组织微血管密度与VEGF 阳性指数的相关分析第71页
       ·心肌组织微血管密度与VEGF 阳性指数的相关分析结果第71页
       ·骨骼肌组织微血管密度与VEGF 阳性指数的相关分析结果第71页
     ·大鼠肌组织微血管密度与Flt-1 阳性指数的相关分析第71-78页
       ·心肌组织微血管密度与Flt-1 阳性指数的相关分析结果第72页
       ·骨骼肌组织微血管密度与Flt-1 阳性指数的相关分析结果第72-78页
   ·分析与讨论第78-82页
     ·低氧及运动对大鼠肌组织微血管数量的影响第78-80页
     ·低氧及运动影响大鼠肌组织VEGF、Flt-1 蛋白含量对肌组织微血管生成的促进作用第80-81页
     ·低氧及运动影响大鼠血浆 VEGF 含量对肌组织微血管生成的促进作用第81-82页
   ·小结第82-83页
5 低氧及运动大鼠肌组织血管生成方式的超微结构研究第83-98页
   ·材料与方法第84-86页
     ·实验仪器第84页
     ·实验试剂及药品第84页
     ·实验对象及分组第84页
     ·运动训练安排第84页
     ·低氧处理第84页
     ·实验取材第84页
     ·电镜标本制作第84-86页
   ·实验结果第86-94页
     ·大鼠心肌组织毛细血管、肌纤维超微结构透射电镜观察第86页
       ·心肌组织毛细血管透射电镜观察结果第86页
       ·心肌组织肌纤维透射电镜观察结果第86页
     ·大鼠骨骼肌组织毛细血管、肌纤维超微结构透射电镜观察第86-94页
       ·骨骼肌组织毛细血管透射电镜观察结果第86页
       ·骨骼肌组织肌纤维透射电镜观察结果第86-94页
   ·分析与讨论第94-97页
     ·低氧及运动对大鼠肌组织毛细血管超微结构的影响第94-95页
     ·低氧及运动对大鼠肌纤维超微结构的影响第95-97页
   ·小结第97-98页
6 结论第98-99页
致谢第99-100页
参考文献第100-108页
附录A 运动肌组织血管生成的低氧适应机制研究进展第108-123页
 A.1 低氧介导HIF-1α对血管生成缺氧诱导基因转录的调控第108-111页
  A.1.1 VEGF、Flt-1 基因的HIF-1 DNA 结合位点的确定第109-110页
  A.1.2 低氧对HIF-1α与VEGF 基因DNA 结合活性的影响第110页
  A.1.3 低氧介导HIF-1α对VEGF、Flt-1 的转录活性第110-111页
 A.2 低氧对运动肌组织血管生成的作用第111-113页
  A.2.1 低氧对运动骨骼肌血管生成的作用第111-113页
  A.2.2 低氧或运动对心肌血管生成的作用第113页
 A.3 低氧对运动肌组织HIF-1α、VEGF、Flt-1 基因表达的影响第113-117页
  A.3.1 低氧运动对肌组织HIF-1α的影响第113-114页
  A.3.2 低氧运动对肌组织血管生成低氧诱导基因的影响第114-115页
  A.3.3 低氧运动下HIF-1α调节肌组织血管生成低氧反应基因的研究第115-117页
 文献综述参考文献第117-123页

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