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甘蓝型油菜高油酸基因工程研究

第一章 前言第1-21页
 1 植物脂肪酸代谢的遗传调控与基因工程研究进展第10-20页
   ·植物脂肪酸的代谢途径第11-12页
   ·植物脂肪酸代谢调控的基因工程研究进展第12-19页
     ·脂肪酸链长度的调控第13-15页
     ·脂肪酸饱和度的调控第15-16页
     ·种子含油量的调控第16-17页
     ·新的不饱和脂肪酸的调控第17-19页
   ·结语第19-20页
 2 本研究的目的意义第20-21页
第二章 甘蓝型油菜napin基因启动子的克隆与序列分析第21-35页
 1 材料和方法第21-26页
   ·材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·质粒与菌种第21-22页
     ·酶与试剂第22页
     ·PCR引物第22页
   ·方法第22-26页
     ·napin基因启动子的克隆及序列分析第22-25页
     ·植物表达载体pBI121.N构建第25页
     ·napin启动子的瞬时表达活性检测第25-26页
 2 结果第26-32页
   ·油菜种子特异表达napin基因的克隆与序列分析第26-31页
   ·植物表达载体pBI121.N的构建第31页
   ·GUS基因瞬时表达检测第31-32页
 3 讨论第32-35页
   ·芸薹属植物中的napin基因及其启动子第32-33页
   ·甘蓝型油菜napin基因启动子含种子特异表达的DNA保守序列第33-34页
   ·GUS基因的瞬时表达第34-35页
第三章 甘蓝型油菜FAD2基因片段的克隆及种子特异性反义表达载体的构建第35-47页
 1 材料与方法第36-39页
   ·材料第36页
     ·植物材料第36页
     ·菌种与质粒第36页
     ·酶与试剂第36页
     ·PCR引物第36页
   ·方法第36-39页
     ·甘蓝型油菜FAD2基因的克隆及序列分析第36-38页
     ·种子特异性反义表达载体pBI121.NF的构建第38页
     ·pBI121.NF转化根癌农杆菌LBA4404第38-39页
 2 结果第39-43页
   ·甘蓝型油菜FAD2基因片段的克隆及序列分析第39-41页
     ·PCR产物及重组克隆的酶切鉴定第39-40页
     ·FAD2基因片段的插入方向第40-41页
     ·FAD2基因片段的序列分析第41页
   ·种子特异性反义FAD2表达载体pBI121.NF构建第41-43页
   ·根癌农杆菌的转化第43页
 3 讨论第43-47页
   ·FAD2基因片段的克隆与序列分析第43-44页
   ·油菜脂肪酸代谢调控的研究第44-45页
   ·脂肪酸调控基因工程中的启动子第45-46页
   ·反义RNA策略在植物基因工程中的应用第46-47页
第四章 甘蓝型油菜的遗传转化及转基因油菜的获得第47-63页
 1 材料和方法第47-52页
   ·实验材料第47-48页
     ·植物品种第47-48页
     ·菌种与质粒第48页
     ·酶与试剂第48页
     ·培养基第48页
   ·方法第48-52页
     ·油菜子叶柄的获得第48-49页
     ·抗生素浓度筛选实验第49页
     ·农杆菌介导的油菜子叶柄遗传转化体系的建立第49页
     ·程序化转基因体系的建立及其有效性的验证第49-50页
     ·基因枪法对油菜子叶柄遗传转化的探索第50-51页
     ·移栽第51页
     ·转基因油菜的分子生物学的检测第51-52页
 2 结果与分析第52-60页
   ·卡那霉素对湘油15号子叶柄分化能力的影响第52-53页
   ·农杆菌介导的油菜的遗传转化第53-55页
     ·预培养对转化效果的影响第53-54页
     ·农杆菌的悬浮液对转化效果的影响第54页
     ·不同浓度农杆菌浓度对子叶柄转化的影响第54页
     ·共培养温度对农杆菌侵染力的影响第54-55页
     ·共培养时间对转化的影响第55页
   ·农杆菌介导转基因体系的建立第55-56页
   ·基因枪法对油菜的遗传转化第56-57页
     ·预培养对子叶柄转化频率的影响第56-57页
     ·高渗处理对子叶柄转化频率的影响第57页
   ·抗卡那霉素转基因绿苗的获得第57-59页
   ·转基因油菜的PCR分析第59页
   ·转基因油菜PCR-Southern杂交检测第59-60页
 3 讨论第60-63页
   ·关于影响农杆菌介导油菜子叶柄遗传转化的因素探讨第60页
   ·提高基因枪转化油菜的效率第60页
   ·农杆菌转化法与基因枪转化法的比较第60-61页
   ·对本研究的几点思考第61-63页
参考文献第63-70页
附件第70-75页
作者简介第75-76页
致谢第76页

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