第一章 前言 | 第1-21页 |
1 植物脂肪酸代谢的遗传调控与基因工程研究进展 | 第10-20页 |
·植物脂肪酸的代谢途径 | 第11-12页 |
·植物脂肪酸代谢调控的基因工程研究进展 | 第12-19页 |
·脂肪酸链长度的调控 | 第13-15页 |
·脂肪酸饱和度的调控 | 第15-16页 |
·种子含油量的调控 | 第16-17页 |
·新的不饱和脂肪酸的调控 | 第17-19页 |
·结语 | 第19-20页 |
2 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
第二章 甘蓝型油菜napin基因启动子的克隆与序列分析 | 第21-35页 |
1 材料和方法 | 第21-26页 |
·材料 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第21页 |
·质粒与菌种 | 第21-22页 |
·酶与试剂 | 第22页 |
·PCR引物 | 第22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·napin基因启动子的克隆及序列分析 | 第22-25页 |
·植物表达载体pBI121.N构建 | 第25页 |
·napin启动子的瞬时表达活性检测 | 第25-26页 |
2 结果 | 第26-32页 |
·油菜种子特异表达napin基因的克隆与序列分析 | 第26-31页 |
·植物表达载体pBI121.N的构建 | 第31页 |
·GUS基因瞬时表达检测 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-35页 |
·芸薹属植物中的napin基因及其启动子 | 第32-33页 |
·甘蓝型油菜napin基因启动子含种子特异表达的DNA保守序列 | 第33-34页 |
·GUS基因的瞬时表达 | 第34-35页 |
第三章 甘蓝型油菜FAD2基因片段的克隆及种子特异性反义表达载体的构建 | 第35-47页 |
1 材料与方法 | 第36-39页 |
·材料 | 第36页 |
·植物材料 | 第36页 |
·菌种与质粒 | 第36页 |
·酶与试剂 | 第36页 |
·PCR引物 | 第36页 |
·方法 | 第36-39页 |
·甘蓝型油菜FAD2基因的克隆及序列分析 | 第36-38页 |
·种子特异性反义表达载体pBI121.NF的构建 | 第38页 |
·pBI121.NF转化根癌农杆菌LBA4404 | 第38-39页 |
2 结果 | 第39-43页 |
·甘蓝型油菜FAD2基因片段的克隆及序列分析 | 第39-41页 |
·PCR产物及重组克隆的酶切鉴定 | 第39-40页 |
·FAD2基因片段的插入方向 | 第40-41页 |
·FAD2基因片段的序列分析 | 第41页 |
·种子特异性反义FAD2表达载体pBI121.NF构建 | 第41-43页 |
·根癌农杆菌的转化 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-47页 |
·FAD2基因片段的克隆与序列分析 | 第43-44页 |
·油菜脂肪酸代谢调控的研究 | 第44-45页 |
·脂肪酸调控基因工程中的启动子 | 第45-46页 |
·反义RNA策略在植物基因工程中的应用 | 第46-47页 |
第四章 甘蓝型油菜的遗传转化及转基因油菜的获得 | 第47-63页 |
1 材料和方法 | 第47-52页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
·植物品种 | 第47-48页 |
·菌种与质粒 | 第48页 |
·酶与试剂 | 第48页 |
·培养基 | 第48页 |
·方法 | 第48-52页 |
·油菜子叶柄的获得 | 第48-49页 |
·抗生素浓度筛选实验 | 第49页 |
·农杆菌介导的油菜子叶柄遗传转化体系的建立 | 第49页 |
·程序化转基因体系的建立及其有效性的验证 | 第49-50页 |
·基因枪法对油菜子叶柄遗传转化的探索 | 第50-51页 |
·移栽 | 第51页 |
·转基因油菜的分子生物学的检测 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-60页 |
·卡那霉素对湘油15号子叶柄分化能力的影响 | 第52-53页 |
·农杆菌介导的油菜的遗传转化 | 第53-55页 |
·预培养对转化效果的影响 | 第53-54页 |
·农杆菌的悬浮液对转化效果的影响 | 第54页 |
·不同浓度农杆菌浓度对子叶柄转化的影响 | 第54页 |
·共培养温度对农杆菌侵染力的影响 | 第54-55页 |
·共培养时间对转化的影响 | 第55页 |
·农杆菌介导转基因体系的建立 | 第55-56页 |
·基因枪法对油菜的遗传转化 | 第56-57页 |
·预培养对子叶柄转化频率的影响 | 第56-57页 |
·高渗处理对子叶柄转化频率的影响 | 第57页 |
·抗卡那霉素转基因绿苗的获得 | 第57-59页 |
·转基因油菜的PCR分析 | 第59页 |
·转基因油菜PCR-Southern杂交检测 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
·关于影响农杆菌介导油菜子叶柄遗传转化的因素探讨 | 第60页 |
·提高基因枪转化油菜的效率 | 第60页 |
·农杆菌转化法与基因枪转化法的比较 | 第60-61页 |
·对本研究的几点思考 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
附件 | 第70-75页 |
作者简介 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |