| 一 前言 | 第1-18页 |
| 二 材料与方法 | 第18-26页 |
| ·材料 | 第18-22页 |
| ·手术样本收集与处理 | 第18页 |
| ·PCR引物设计与合成 | 第18-21页 |
| ·试剂盒 | 第21页 |
| ·其他主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·提取基因组DNA | 第22页 |
| ·测定基因组DNA纯度和浓度 | 第22-23页 |
| ·PCR扩增四对微卫星标记和PTEN第4～8外显子 | 第23页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及银染 | 第23页 |
| ·用SP法检测食管癌及正常组织中PTEN表达水平 | 第23-24页 |
| ·结果判断标准和统计学分析方法 | 第24-26页 |
| ·LOH及MSI | 第24页 |
| ·PCR-SSCP | 第24页 |
| ·SP免疫组化 | 第24-25页 |
| ·统计学方法 | 第25-26页 |
| 三 结果 | 第26-42页 |
| ·基因组DNA提取及PCR扩增 | 第26-30页 |
| ·LOH和MSI分析 | 第30-34页 |
| ·PCR-SSCP检测PTEN基因第4～8外显子的突变 | 第34-35页 |
| ·PTEN蛋白质的SP法免疫组化染色 | 第35-42页 |
| 四 讨论 | 第42-46页 |
| ·10q23等位基因不平衡与食管癌 | 第42-43页 |
| ·PTEN基因突变与食管癌 | 第43-44页 |
| ·PTEN蛋白质表达与食管癌 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 五 结论 | 第46-47页 |
| 六 进一步研究设想 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 综述 | 第54-62页 |
| 综述参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第68页 |