英文缩写说明 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-30页 |
1 低聚果糖 | 第11-18页 |
1.1 概述 | 第11页 |
1.2 低聚果糖的产生 | 第11-13页 |
1.3 低聚果糖的结构及其物理化学性质 | 第13-14页 |
1.4 低聚果糖的生理功能 | 第14-16页 |
1.5 低聚果糖的安全性 | 第16页 |
1.6 低聚果糖的用途 | 第16页 |
1.7 低聚果糖的工业化生产 | 第16-18页 |
1.8 高浓度低聚果糖的生产 | 第18页 |
2 低聚果糖产生酶 | 第18-24页 |
2.1 低聚果糖产生酶的命名 | 第18-19页 |
2.2 低聚果糖产生酶的分离纯化 | 第19-21页 |
2.3 低聚果糖产生酶的性质 | 第21-22页 |
2.4 低聚果糖产生酶的作用机制 | 第22-24页 |
参考文献 | 第24-30页 |
第二篇 实验部分 | 第30-84页 |
1 低聚果糖组分的分离纯化及结构鉴定 | 第30-40页 |
1.1. 材料与仪器 | 第30-31页 |
1.2. 方法 | 第31-33页 |
1.2.1 黑曲霉(Aspergillus niger)SIPI-602菌丝体培养 | 第31-32页 |
1.2.2 低聚果糖糖浆的制备 | 第32页 |
1.2.3 总糖分析方法 | 第32页 |
1.2.4 高效液相色谱法分析糖含量 | 第32页 |
1.2.5 低聚果糖组分的分离纯化 | 第32-33页 |
1.2.6 GF_2和GF_3结构鉴定 | 第33页 |
1.3 结果与讨论 | 第33-39页 |
参考文献 | 第39-40页 |
2 低聚果糖生产相关酶的分离纯化 | 第40-61页 |
2.1 试剂与器材 | 第40-42页 |
2.2 方法 | 第42-51页 |
2.2.1 分析检测方法 | 第42-45页 |
2.2.1.1 HPLC测定糖含量 | 第42页 |
2.2.1.2 考马斯亮蓝法测定总蛋白浓度 | 第42-43页 |
2.2.1.3 蛋白纯度鉴定及分子量测定 | 第43-45页 |
2.2.1.4 β—果糖基转移酶与β—呋喃果糖苷酶活力的测定 | 第45页 |
2.2.2 黑曲霉SIPI-602的发酵培养 | 第45-46页 |
2.2.3 β—果糖基转移酶与β—呋喃果糖苷酶的分离纯化 | 第46-51页 |
2.2.3.1 无细胞抽提液的制备 | 第47-48页 |
2.2.3.2 硫酸铵分级沉淀 | 第48-49页 |
2.2.3.3 Octyl-Sepharose CL-4B疏水层析 | 第49-50页 |
2.2.3.4 Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析 | 第50-51页 |
2.2.3.5 Sephacryl S-300凝胶过滤 | 第51页 |
2.3 结果与讨论 | 第51-59页 |
2.3.1 结果 | 第51-55页 |
2.3.1.1 硫酸铵分级沉淀 | 第52页 |
2.3.1.2 疏水层析 | 第52页 |
2.3.1.3 阴离子交换层析 | 第52-53页 |
2.3.1.4 凝胶过滤层析 | 第53-54页 |
2.3.1.5 纯度鉴定及分子量的测定 | 第54页 |
2.3.1.6 分离纯化数据 | 第54-55页 |
2.3.2 讨论 | 第55-59页 |
2.3.2.1 无细胞抽提液的制备 | 第55-56页 |
2.3.2.2 硫酸铵分级沉淀 | 第56页 |
2.3.2.3 疏水层析 | 第56-57页 |
2.3.2.4 离子交换层析 | 第57页 |
2.3.2.5 凝胶过滤层析 | 第57页 |
2.3.2.6 蛋白质分子量 | 第57-58页 |
2.3.2.7 小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
3 β—果糖基转移酶的性质研究 | 第61-72页 |
3.1 试剂与器材 | 第61-62页 |
3.2 方法 | 第62-64页 |
3.2.1 分析检测方法 | 第62页 |
3.2.1.1 HPLC测定糖含量 | 第62页 |
3.2.1.2 β—果糖基转移酶活力的测定 | 第62页 |
3.2.2 β—果糖基转移酶动力学研究 | 第62页 |
3.2.3 葡萄糖对β—果糖基转移酶活力的影响 | 第62-63页 |
3.2.4 β—果糖基转移酶的最适pH | 第63页 |
3.2.5 β—果糖基转移酶的pH稳定性 | 第63页 |
3.2.6 β—果糖基转移酶反应的最适温度 | 第63页 |
3.2.7 β—果糖基转移酶的热稳定性 | 第63页 |
3.2.8 β—果糖基转移酶的反应进程 | 第63-64页 |
3.3 结果与讨论 | 第64-71页 |
3.3.1 β—果糖基转移酶的动力学常数 | 第64-65页 |
3.3.2 β—果糖基转移酶的最适pH | 第65-66页 |
3.3.3 β—果糖基转移酶的pH稳定性 | 第66页 |
3.3.4 β—果糖基转移酶反应的最适温度 | 第66-67页 |
3.3.5 β—果糖基转移酶的热稳定性 | 第67-68页 |
3.3.6 β—果糖基转移酶作用的专一性 | 第68页 |
3.3.7 β—果糖基转移酶的反应进程 | 第68-71页 |
参考文献 | 第71-72页 |
4 β—呋喃果糖昔酶的性质研究 | 第72-84页 |
4.1 试剂与器材 | 第72-73页 |
4.2 方法 | 第73-75页 |
4.2.1 分析检测方法 | 第73页 |
4.2.1.1 HPLC测定糖含量 | 第73页 |
4.2.1.2 β—呋喃果糖苷酶活力的测定 | 第73页 |
4.2.2 β—呋喃果糖苷酶动力学研究 | 第73页 |
4.2.3 葡萄糖对β—呋喃果糖苷酶活力的影响 | 第73-74页 |
4.2.4 果糖对β—呋喃果糖苷酶活力的影响 | 第74页 |
4.2.5 β—呋喃果糖苷酶反应的最适pH | 第74页 |
4.2.6 β—呋喃果糖苷酶的pH稳定性 | 第74页 |
4.2.7 β—呋喃果糖苷酶反应的最适温度 | 第74页 |
4.2.8 β—呋喃果糖苷酶的热稳定性 | 第74页 |
4.2.9 β—呋喃果糖苷酶对β—果糖基转移酶反应进程的影响 | 第74-75页 |
4.3 结果与讨论 | 第75-83页 |
4.3.1 β—呋喃果糖苷酶动力学常数测定 | 第75-77页 |
4.3.2 β—呋喃果糖苷酶反应的最适pH | 第77页 |
4.3.3 β—呋喃果糖苷酶的pH稳定性 | 第77-78页 |
4.3.4 β—呋喃果糖苷酶反应的最适温度 | 第78页 |
4.3.5 β—呋喃果糖苷酶的热稳定性 | 第78-79页 |
4.3.6 β—呋喃果糖苷酶的底物专一性 | 第79页 |
4.3.7 β—呋喃果糖苷酶对β—果糖基转移酶反应进程的影响 | 第79-83页 |
参考文献 | 第83-84页 |
总结 | 第84-86页 |
致谢 | 第86页 |