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具有加卤过氧化物酶活性含卟啉辅基的抗体酶研究

中文摘要第1-12页
第一部分: 文献综述第12-62页
 综述一 抗体酶的研究进展第12-46页
  1.1 抗体和抗体酶第12页
  1.2 抗体分子的结构第12-14页
  1.3 抗体酶产生的背景第14-15页
  1.4 抗体酶的制备方法第15-24页
  1.5 抗体酶的应用第24-32页
  1.6 抗体酶研究的现状与未来第32-46页
 综述二 卟啉配体、金属卟啉配合物合成及金属卟啉超分子自组装第46-62页
  1 卟啉配体的合成第46-49页
  2 金属卟啉配合物第49-53页
  3 金属卟啉超分子自组装第53-62页
第二部分: 研究内容第62-117页
 实验一 啉类半抗原的分子设计、制备及性质鉴定第62-69页
  1.1 材料第62-63页
   1.1.1 主要试剂第62-63页
   1.1.2 仪器第63页
  1.2 实验方法第63-64页
   1.2.1 meso-四(邻-硝基苯)卟啉的合成第63页
   1.2.2 meso-四(邻-胺基苯)卟啉的制备第63页
   1.2.3 H_2TamPP异构体的分离第63-64页
   1.2.4 meso-四(α,α,α,α-o-苯乙酰胺苯)卟啉的制备第64页
   1.2.5 基质辅助激光解吸飞行时间质谱分析第64页
   1.2.6 富里叶变换红外光谱分析第64页
   1.2.7 ~1H-NMR分析第64页
  1.3 结果与讨论第64-69页
   1.3.1 H_2TNO_2PP的紫外可见光谱分析第64页
   1.3.2 H_2TNH_2PP的紫外可见光谱分析第64-65页
   1.3.3 meso-四(α,α,α,α-o-苯乙酰胺苯)卟啉的紫外可见及元素分析结果第65-66页
   1.3.4 基质辅助激光解吸飞行时间质谱分析第66页
   1.3.5 富里叶变换红外光谱分析第66页
   1.3.6 ~1H-NMR分析第66-69页
 实验二 单克隆抗体的制备及鉴定第69-84页
  2.1 材料第70-71页
   2.1.1 试剂第70-71页
   2.1.2 仪器第71页
  2.2 方法第71-77页
   2.2.1 饲养细胞的制备第71-72页
   2.2.2 骨髓瘤细胞Sp/20的复苏和培养第72页
   2.2.3 小鼠免疫第72页
   2.2.4 免疫脾细胞的制备第72-73页
   2.2.5 细胞融合第73页
   2.2.6 细胞融合的早期培养第73-74页
   2.2.7 酶联免疫检测第74页
   2.2.8 杂交瘤细胞的克隆化第74页
   2.2.9 杂交瘤细胞冻存和复苏第74-75页
   2.2.10 单克隆抗体的制备第75页
   2.2.11 单克隆抗体的纯化第75页
   2.2.12 蛋白质浓度测定第75-76页
   2.2.13 单克隆抗体纯度的鉴定第76-77页
   2.2.14 兔抗鼠亚型抗体检测试剂盒测定抗体亚型第77页
  2.3 结果与讨论第77-84页
   2.3.1 杂交瘤细胞的建立第77页
   2.3.2 抗体效价第77-78页
   2.3.3 单克隆抗体的纯化第78-79页
   2.3.4 蛋白质浓度的测定第79页
   2.3.5 单克隆抗体纯度的测定第79-81页
   2.3.6 兔抗鼠亚型抗体检测试剂盒测定抗体亚型第81-84页
 实验三 催化抗体的酶学性质研究第84-94页
  3.1 加氯过氧化物酶活性测定第85-90页
   3.1.1 主要试剂和仪器第85-86页
   3.1.2 实验方法第86页
    3.1.2.1 铁卟啉辅基制备第86页
    3.1.2.2 荧光淬灭法测定结合常数第86页
    3.1.2.3 圆二色谱(CD)和紫外—可见强度对pH的依赖性第86页
    3.1.2.4 加氯过氧化物酶活性的测定第86页
    3.1.2.5 加氯过氧化物酶的热稳定性第86页
   3.1.3 结果与讨论第86-90页
    3.1.3.1 荧光淬灭法测定结合常数第87页
    3.1.3.2 卟啉—抗体的CD和UV强度对pH的依赖性第87-88页
    3.1.3.3 催化反应得动力学第88页
    3.1.3.4 加氯过氧化物酶的热稳定性第88-90页
  3.2 过氧化物酶活性测定第90-94页
   3.2.1 主要试剂和仪器第90-91页
   3.2.2 过氧化物酶活力测定第91页
   4.2.3 结果和讨论第91-94页
 实验四 圆二色谱、紫外可见光谱及紫外可见差光谱研究抗体-卟啉的相互作用第94-107页
  4.1 圆二色谱原理第94-96页
  4.2 紫外-可见差光谱原理第96-97页
  4.3 McAb 1F2实验部分第97-101页
   4.3.1 材料与方法第97页
   4.3.2 结果和讨论第97-101页
    4.3.2.1 UV-VIS研究第97-99页
    4.3.2.2 诱导的CD第99-100页
    4.3.2.3 CD光谱差异第100-101页
  4.4 McAb 3E4实验部分第101-107页
   4.4.1 材料和方法第101页
    4.4.1.1 紫外可见差光谱研究第101页
    4.4.1.2 圆二色谱测定第101页
   4.4.2 结果和讨论第101-107页
    4.4.2.1 紫外可见差光谱第101页
    4.4.2.1 圆二色谱第101-107页
 实验五 McAb荧光光谱研究第107-117页
  5.1 荧光光谱第107-109页
   5.1.1 荧光光谱基本原理第107-108页
   5.1.2 荧光激发光谱和发射光谱第108页
   5.1.3 同步荧光光谱第108-109页
  5.2 蛋白质的荧光第109-110页
   5.2.1 芳香簇氨基酸的光谱性质第109-110页
   5.2.2 蛋白质荧光的一般特性第110页
   5.2.3 蛋白质的荧光淬灭第110页
  5.3 单克隆抗体1F2的荧光光谱研究第110-112页
   5.3.1 单克隆抗体1F2的普通荧光光谱研究第110-111页
   5.3.2 单克隆抗体1F2的同步荧光光谱研究第111-112页
  5.4 单克隆抗体1F2的荧光淬灭研究第112-117页
   5.4.1 同步荧光光谱法测定卟啉淬灭酪氨酸的荧光第112页
   5.4.2 同步荧光光谱测定卟啉淬灭色氨酸的荧光第112-113页
   5.4.3 同步荧光光谱测定NBS淬灭抗体1F2的色氨酸荧光第113-117页
结论第117-118页
致谢第118-119页
英文摘要第119-122页
个人简历第122-125页

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