中文摘要 | 第1-12页 |
第一部分: 文献综述 | 第12-62页 |
综述一 抗体酶的研究进展 | 第12-46页 |
1.1 抗体和抗体酶 | 第12页 |
1.2 抗体分子的结构 | 第12-14页 |
1.3 抗体酶产生的背景 | 第14-15页 |
1.4 抗体酶的制备方法 | 第15-24页 |
1.5 抗体酶的应用 | 第24-32页 |
1.6 抗体酶研究的现状与未来 | 第32-46页 |
综述二 卟啉配体、金属卟啉配合物合成及金属卟啉超分子自组装 | 第46-62页 |
1 卟啉配体的合成 | 第46-49页 |
2 金属卟啉配合物 | 第49-53页 |
3 金属卟啉超分子自组装 | 第53-62页 |
第二部分: 研究内容 | 第62-117页 |
实验一 啉类半抗原的分子设计、制备及性质鉴定 | 第62-69页 |
1.1 材料 | 第62-63页 |
1.1.1 主要试剂 | 第62-63页 |
1.1.2 仪器 | 第63页 |
1.2 实验方法 | 第63-64页 |
1.2.1 meso-四(邻-硝基苯)卟啉的合成 | 第63页 |
1.2.2 meso-四(邻-胺基苯)卟啉的制备 | 第63页 |
1.2.3 H_2TamPP异构体的分离 | 第63-64页 |
1.2.4 meso-四(α,α,α,α-o-苯乙酰胺苯)卟啉的制备 | 第64页 |
1.2.5 基质辅助激光解吸飞行时间质谱分析 | 第64页 |
1.2.6 富里叶变换红外光谱分析 | 第64页 |
1.2.7 ~1H-NMR分析 | 第64页 |
1.3 结果与讨论 | 第64-69页 |
1.3.1 H_2TNO_2PP的紫外可见光谱分析 | 第64页 |
1.3.2 H_2TNH_2PP的紫外可见光谱分析 | 第64-65页 |
1.3.3 meso-四(α,α,α,α-o-苯乙酰胺苯)卟啉的紫外可见及元素分析结果 | 第65-66页 |
1.3.4 基质辅助激光解吸飞行时间质谱分析 | 第66页 |
1.3.5 富里叶变换红外光谱分析 | 第66页 |
1.3.6 ~1H-NMR分析 | 第66-69页 |
实验二 单克隆抗体的制备及鉴定 | 第69-84页 |
2.1 材料 | 第70-71页 |
2.1.1 试剂 | 第70-71页 |
2.1.2 仪器 | 第71页 |
2.2 方法 | 第71-77页 |
2.2.1 饲养细胞的制备 | 第71-72页 |
2.2.2 骨髓瘤细胞Sp/20的复苏和培养 | 第72页 |
2.2.3 小鼠免疫 | 第72页 |
2.2.4 免疫脾细胞的制备 | 第72-73页 |
2.2.5 细胞融合 | 第73页 |
2.2.6 细胞融合的早期培养 | 第73-74页 |
2.2.7 酶联免疫检测 | 第74页 |
2.2.8 杂交瘤细胞的克隆化 | 第74页 |
2.2.9 杂交瘤细胞冻存和复苏 | 第74-75页 |
2.2.10 单克隆抗体的制备 | 第75页 |
2.2.11 单克隆抗体的纯化 | 第75页 |
2.2.12 蛋白质浓度测定 | 第75-76页 |
2.2.13 单克隆抗体纯度的鉴定 | 第76-77页 |
2.2.14 兔抗鼠亚型抗体检测试剂盒测定抗体亚型 | 第77页 |
2.3 结果与讨论 | 第77-84页 |
2.3.1 杂交瘤细胞的建立 | 第77页 |
2.3.2 抗体效价 | 第77-78页 |
2.3.3 单克隆抗体的纯化 | 第78-79页 |
2.3.4 蛋白质浓度的测定 | 第79页 |
2.3.5 单克隆抗体纯度的测定 | 第79-81页 |
2.3.6 兔抗鼠亚型抗体检测试剂盒测定抗体亚型 | 第81-84页 |
实验三 催化抗体的酶学性质研究 | 第84-94页 |
3.1 加氯过氧化物酶活性测定 | 第85-90页 |
3.1.1 主要试剂和仪器 | 第85-86页 |
3.1.2 实验方法 | 第86页 |
3.1.2.1 铁卟啉辅基制备 | 第86页 |
3.1.2.2 荧光淬灭法测定结合常数 | 第86页 |
3.1.2.3 圆二色谱(CD)和紫外—可见强度对pH的依赖性 | 第86页 |
3.1.2.4 加氯过氧化物酶活性的测定 | 第86页 |
3.1.2.5 加氯过氧化物酶的热稳定性 | 第86页 |
3.1.3 结果与讨论 | 第86-90页 |
3.1.3.1 荧光淬灭法测定结合常数 | 第87页 |
3.1.3.2 卟啉—抗体的CD和UV强度对pH的依赖性 | 第87-88页 |
3.1.3.3 催化反应得动力学 | 第88页 |
3.1.3.4 加氯过氧化物酶的热稳定性 | 第88-90页 |
3.2 过氧化物酶活性测定 | 第90-94页 |
3.2.1 主要试剂和仪器 | 第90-91页 |
3.2.2 过氧化物酶活力测定 | 第91页 |
4.2.3 结果和讨论 | 第91-94页 |
实验四 圆二色谱、紫外可见光谱及紫外可见差光谱研究抗体-卟啉的相互作用 | 第94-107页 |
4.1 圆二色谱原理 | 第94-96页 |
4.2 紫外-可见差光谱原理 | 第96-97页 |
4.3 McAb 1F2实验部分 | 第97-101页 |
4.3.1 材料与方法 | 第97页 |
4.3.2 结果和讨论 | 第97-101页 |
4.3.2.1 UV-VIS研究 | 第97-99页 |
4.3.2.2 诱导的CD | 第99-100页 |
4.3.2.3 CD光谱差异 | 第100-101页 |
4.4 McAb 3E4实验部分 | 第101-107页 |
4.4.1 材料和方法 | 第101页 |
4.4.1.1 紫外可见差光谱研究 | 第101页 |
4.4.1.2 圆二色谱测定 | 第101页 |
4.4.2 结果和讨论 | 第101-107页 |
4.4.2.1 紫外可见差光谱 | 第101页 |
4.4.2.1 圆二色谱 | 第101-107页 |
实验五 McAb荧光光谱研究 | 第107-117页 |
5.1 荧光光谱 | 第107-109页 |
5.1.1 荧光光谱基本原理 | 第107-108页 |
5.1.2 荧光激发光谱和发射光谱 | 第108页 |
5.1.3 同步荧光光谱 | 第108-109页 |
5.2 蛋白质的荧光 | 第109-110页 |
5.2.1 芳香簇氨基酸的光谱性质 | 第109-110页 |
5.2.2 蛋白质荧光的一般特性 | 第110页 |
5.2.3 蛋白质的荧光淬灭 | 第110页 |
5.3 单克隆抗体1F2的荧光光谱研究 | 第110-112页 |
5.3.1 单克隆抗体1F2的普通荧光光谱研究 | 第110-111页 |
5.3.2 单克隆抗体1F2的同步荧光光谱研究 | 第111-112页 |
5.4 单克隆抗体1F2的荧光淬灭研究 | 第112-117页 |
5.4.1 同步荧光光谱法测定卟啉淬灭酪氨酸的荧光 | 第112页 |
5.4.2 同步荧光光谱测定卟啉淬灭色氨酸的荧光 | 第112-113页 |
5.4.3 同步荧光光谱测定NBS淬灭抗体1F2的色氨酸荧光 | 第113-117页 |
结论 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-119页 |
英文摘要 | 第119-122页 |
个人简历 | 第122-125页 |