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口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC的克隆及3AB基因在大肠杆菌中的表达

中文摘要第1-6页
1 前言第6-8页
2 材料与方法第8-22页
 2.1 材料第8-10页
  2.1.1 口蹄疫病毒株、细菌菌株及质粒载体第8页
  2.1.2 各种酶类和生物试剂第8-9页
  2.1.3 引物第9页
  2.1.4 主要仪器第9-10页
  2.1.5 实验动物及细胞第10页
 2.2 方法第10-22页
  2.2.1 口蹄疫病毒适应乳鼠及适应细胞传代第10页
  2.2.2 病毒RNA提取第10-11页
  2.2.3 反转录第11页
  2.2.4 PCR扩增第11-12页
  2.2.5 目的DNA片段的纯化与回收第12-13页
  2.2.6 目的DNA片段与载体的连接第13页
  2.2.7 感受态细胞的制备第13-14页
  2.2.8 感受态细胞的转化第14页
  2.2.9 挑斑第14页
  2.2.10 质粒的提取第14-16页
  2.2.11 阳性克隆的鉴定第16页
  2.2.12 重组表达载体的构建第16-20页
  2.2.13 重组质粒的诱导表达第20页
  2.2.14 表达产物的检测第20-22页
3 结果第22-31页
 3.1 PCR第22页
 3.2 重组质粒的鉴定第22-25页
  3.2.1 电泳鉴定第22页
  3.2.2 酶切鉴定第22页
  3.2.3 PCR鉴定第22页
  3.2.4 重组质粒的序列分析第22-25页
 3.3 重组表达载体的构建第25-30页
  3.3.1 目的片段pGXM-3ABC与pTriEx载体的酶切第25页
  3.3.2 重组表达质粒的电泳鉴定第25页
  3.3.3 重组表达质粒酶切及PCR鉴定第25-26页
  3.3.4 重组表达质粒的序列分析第26-30页
 3.4 表达产物的检测第30-31页
  3.4.1 SDS-PAGE电泳第30页
  3.4.2 Western blotting分析第30-31页
4 讨论第31-34页
 4.1 RNA提取第31页
 4.2 RT-PCR及其cDNA克隆第31-32页
 4.3 3AB基因的表达及蛋白检测第32-34页
结论第34-37页
5文献综述第37-58页
 5.1 概述第37-38页
 5.2 分布及流行现状第38-40页
 5.3 FMDV基因组结构与功能研究第40-42页
 5.4 FMDV诊断检疫技术研究第42-47页
 5.5 FMDV疫苗研究概况第47-58页
英文摘要第58-59页
致谢第59页

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