目录 | 第1-5页 |
英文缩略表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
1 前言 | 第7-11页 |
1.1 芽孢杆菌的研究现状 | 第7-8页 |
1.1.1 芽孢杆菌的主要特征 | 第7页 |
1.1.2 芽孢杆菌的研究现状 | 第7-8页 |
1.2 芽孢杆菌的实际应用 | 第8-10页 |
1.2.1 农业 | 第8-9页 |
1.2.1.1 生物肥料 | 第8页 |
1.2.1.2 生物农药 | 第8-9页 |
1.2.2 科学研究 | 第9页 |
1.2.3 工业 | 第9-10页 |
1.2.4 医药卫生 | 第10页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第10-11页 |
2 材料与方法 | 第11-21页 |
2.1 材料 | 第11-12页 |
2.1.1 菌株 | 第11页 |
2.1.2 主要药品试剂 | 第11页 |
2.1.3 主要仪器 | 第11-12页 |
2.2 方法 | 第12-21页 |
2.2.1 菌株的分离筛选 | 第12-13页 |
2.2.1.1 土壤样品采集 | 第12页 |
2.2.1.2 菌悬液的制备 | 第12页 |
2.2.1.3 平板接种 | 第12页 |
2.2.1.4 分离培养 | 第12页 |
2.2.1.5 拮抗作用测定 | 第12页 |
2.2.1.6 继代培养 | 第12页 |
2.2.1.7 菌株保存 | 第12-13页 |
2.2.2 菌株鉴定 | 第13-15页 |
2.2.2.1 菌体形态观察 | 第13页 |
2.2.2.2 培养特征观察 | 第13页 |
2.2.2.3 需氧性测定和运动性测定 | 第13页 |
2.2.2.4 生长温度测定 | 第13页 |
2.2.2.5 pH5.7培养基中生长 | 第13页 |
2.2.2.6 耐盐性试验 | 第13页 |
2.2.2.7 柠檬酸盐利用试验 | 第13-14页 |
2.2.2.8 接触酶试验 | 第14页 |
2.2.2.9 脲酶试验 | 第14页 |
2.2.2.10 糖、醇类发酵试验 | 第14页 |
2.2.2.11 V-P试验 | 第14页 |
2.2.2.12 硝酸盐还原试验 | 第14页 |
2.2.2.13 淀粉水解 | 第14页 |
2.2.2.14 明胶液化 | 第14页 |
2.2.2.15 H_2S产生试验 | 第14-15页 |
2.2.2.16 M.R.试验(即甲基红试验) | 第15页 |
2.2.2.17 纤维素分解 | 第15页 |
2.2.2.18 DNA的G+C含量测定 | 第15页 |
2.2.3 菌体发酵 | 第15-16页 |
2.2.3.1 拮抗活性测定 | 第15页 |
2.2.3.2 培养基配方研究 | 第15页 |
2.2.3.3 发酵过程中菌体形态观察及发酵液活性测定 | 第15-16页 |
2.2.4 抗菌蛋白的分离与纯化 | 第16-17页 |
2.2.4.1 硫酸铵分级盐析条件确定 | 第16页 |
2.2.4.2 Sephadex G-75柱层析 | 第16页 |
2.2.4.3 DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第16-17页 |
2.2.4.4 Sephadex G-50柱层析脱盐 | 第17页 |
2.2.4.5 样品的浓缩 | 第17页 |
2.2.4.6 蛋白质纯度鉴定 | 第17页 |
2.2.5 小分子多肽的理化性质研究 | 第17-20页 |
2.2.5.1 紫外吸收检测 | 第17页 |
2.2.5.2 茚三酮反应 | 第17页 |
2.2.5.3 蛋白质浓度的测定 | 第17-18页 |
2.2.5.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 | 第18-19页 |
2.2.5.5 热稳定性试验 | 第19页 |
2.2.5.6 对蛋白酶的稳定性 | 第19-20页 |
2.2.5.7 对氯仿的稳定性 | 第20页 |
2.2.5.8 对酸碱的稳定性 | 第20页 |
2.2.6 对指示菌作用机理观察 | 第20页 |
2.2.7 对几种病原菌的拮抗作用 | 第20-21页 |
3 结果与分析 | 第21-39页 |
3.1 菌株的分离筛选 | 第21页 |
3.2 菌株鉴定 | 第21-24页 |
3.2.1 形态特征及染色结果 | 第21页 |
3.2.2 培养特征 | 第21-22页 |
3.2.3 生理生化特征 | 第22-23页 |
3.2.4 菌株鉴定 | 第23-24页 |
3.3 菌体发酵结果 | 第24-25页 |
3.3.1 培养基配方 | 第24页 |
3.3.2 发酵时间 | 第24-25页 |
3.4 抗菌蛋白的分离纯化 | 第25-29页 |
3.4.1 硫酸铵分级盐析条件的确定 | 第25-26页 |
3.4.2 Sephadex G-75柱层析 | 第26-27页 |
3.4.3 DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第27-29页 |
3.4.4 Sephadex G-50柱层析脱盐 | 第29页 |
3.5 小分子多肽的理化性质研究 | 第29-39页 |
3.5.1 紫外吸收 | 第29-30页 |
3.5.2 茚三酮反应 | 第30页 |
3.5.3 蛋白质浓度的测定 | 第30-31页 |
3.5.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 | 第31-33页 |
3.5.5 热稳定性试验 | 第33页 |
3.5.6 对氯仿稳定性 | 第33-34页 |
3.5.7 对pH稳定性 | 第34页 |
3.5.8 对蛋白酶的稳定性 | 第34页 |
3.5.9 对指示菌作用机理观察 | 第34-36页 |
3.5.10 对几种病原真菌的拮抗作用 | 第36-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
4.1 菌株筛选方法 | 第39页 |
4.2 菌株鉴定 | 第39页 |
4.3 发酵 | 第39页 |
4.4 抗菌蛋白的分离 | 第39-40页 |
4.5 蛋白质浓度检测 | 第40页 |
4.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 | 第40-41页 |
4.7 对指示菌的作用机理 | 第41页 |
4.8 对几种病原真菌的拮抗作用 | 第41页 |
4.9 应用前景 | 第41-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
英文摘要 | 第48-49页 |
致谢 | 第49页 |