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枯草芽孢杆菌A3-2菌株的分离鉴定及其抗菌蛋白的分离纯化与性质研究

目录第1-5页
英文缩略表第5-6页
中文摘要第6-7页
1 前言第7-11页
 1.1 芽孢杆菌的研究现状第7-8页
  1.1.1 芽孢杆菌的主要特征第7页
  1.1.2 芽孢杆菌的研究现状第7-8页
 1.2 芽孢杆菌的实际应用第8-10页
  1.2.1 农业第8-9页
   1.2.1.1 生物肥料第8页
   1.2.1.2 生物农药第8-9页
  1.2.2 科学研究第9页
  1.2.3 工业第9-10页
  1.2.4 医药卫生第10页
 1.3 本研究的目的和意义第10-11页
2 材料与方法第11-21页
 2.1 材料第11-12页
  2.1.1 菌株第11页
  2.1.2 主要药品试剂第11页
  2.1.3 主要仪器第11-12页
 2.2 方法第12-21页
  2.2.1 菌株的分离筛选第12-13页
   2.2.1.1 土壤样品采集第12页
   2.2.1.2 菌悬液的制备第12页
   2.2.1.3 平板接种第12页
   2.2.1.4 分离培养第12页
   2.2.1.5 拮抗作用测定第12页
   2.2.1.6 继代培养第12页
   2.2.1.7 菌株保存第12-13页
  2.2.2 菌株鉴定第13-15页
   2.2.2.1 菌体形态观察第13页
   2.2.2.2 培养特征观察第13页
   2.2.2.3 需氧性测定和运动性测定第13页
   2.2.2.4 生长温度测定第13页
   2.2.2.5 pH5.7培养基中生长第13页
   2.2.2.6 耐盐性试验第13页
   2.2.2.7 柠檬酸盐利用试验第13-14页
   2.2.2.8 接触酶试验第14页
   2.2.2.9 脲酶试验第14页
   2.2.2.10 糖、醇类发酵试验第14页
   2.2.2.11 V-P试验第14页
   2.2.2.12 硝酸盐还原试验第14页
   2.2.2.13 淀粉水解第14页
   2.2.2.14 明胶液化第14页
   2.2.2.15 H_2S产生试验第14-15页
   2.2.2.16 M.R.试验(即甲基红试验)第15页
   2.2.2.17 纤维素分解第15页
   2.2.2.18 DNA的G+C含量测定第15页
  2.2.3 菌体发酵第15-16页
   2.2.3.1 拮抗活性测定第15页
   2.2.3.2 培养基配方研究第15页
   2.2.3.3 发酵过程中菌体形态观察及发酵液活性测定第15-16页
  2.2.4 抗菌蛋白的分离与纯化第16-17页
   2.2.4.1 硫酸铵分级盐析条件确定第16页
   2.2.4.2 Sephadex G-75柱层析第16页
   2.2.4.3 DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析第16-17页
   2.2.4.4 Sephadex G-50柱层析脱盐第17页
   2.2.4.5 样品的浓缩第17页
   2.2.4.6 蛋白质纯度鉴定第17页
  2.2.5 小分子多肽的理化性质研究第17-20页
   2.2.5.1 紫外吸收检测第17页
   2.2.5.2 茚三酮反应第17页
   2.2.5.3 蛋白质浓度的测定第17-18页
   2.2.5.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量第18-19页
   2.2.5.5 热稳定性试验第19页
   2.2.5.6 对蛋白酶的稳定性第19-20页
   2.2.5.7 对氯仿的稳定性第20页
   2.2.5.8 对酸碱的稳定性第20页
  2.2.6 对指示菌作用机理观察第20页
  2.2.7 对几种病原菌的拮抗作用第20-21页
3 结果与分析第21-39页
 3.1 菌株的分离筛选第21页
 3.2 菌株鉴定第21-24页
  3.2.1 形态特征及染色结果第21页
  3.2.2 培养特征第21-22页
  3.2.3 生理生化特征第22-23页
  3.2.4 菌株鉴定第23-24页
 3.3 菌体发酵结果第24-25页
  3.3.1 培养基配方第24页
  3.3.2 发酵时间第24-25页
 3.4 抗菌蛋白的分离纯化第25-29页
  3.4.1 硫酸铵分级盐析条件的确定第25-26页
  3.4.2 Sephadex G-75柱层析第26-27页
  3.4.3 DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析第27-29页
  3.4.4 Sephadex G-50柱层析脱盐第29页
 3.5 小分子多肽的理化性质研究第29-39页
  3.5.1 紫外吸收第29-30页
  3.5.2 茚三酮反应第30页
  3.5.3 蛋白质浓度的测定第30-31页
  3.5.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量第31-33页
  3.5.5 热稳定性试验第33页
  3.5.6 对氯仿稳定性第33-34页
  3.5.7 对pH稳定性第34页
  3.5.8 对蛋白酶的稳定性第34页
  3.5.9 对指示菌作用机理观察第34-36页
  3.5.10 对几种病原真菌的拮抗作用第36-39页
4 讨论第39-42页
 4.1 菌株筛选方法第39页
 4.2 菌株鉴定第39页
 4.3 发酵第39页
 4.4 抗菌蛋白的分离第39-40页
 4.5 蛋白质浓度检测第40页
 4.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量第40-41页
 4.7 对指示菌的作用机理第41页
 4.8 对几种病原真菌的拮抗作用第41页
 4.9 应用前景第41-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-48页
英文摘要第48-49页
致谢第49页

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