| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 主要实验材料 | 第12-15页 |
| 第一部分 新生隐球菌荚膜缺陷株cap60及cap70转化系统的建立 | 第15-48页 |
| 引言 | 第15页 |
| 实验步骤和方法 | 第15-29页 |
| 一． cap60和cap70受体菌的筛选 | 第15-23页 |
| 1． 体外重组片段的回收 | 第16-20页 |
| 2． 用化学法将体外重组片段导入受体菌 | 第20页 |
| 3． PCR检测 | 第20-21页 |
| 4． Southern杂交 | 第21-22页 |
| 5． 酵母突变体稳定性检测 | 第22页 |
| 6． G418基础抗性的测试 | 第22-23页 |
| 二． 转化载体的筛选 | 第23-26页 |
| 1． PX质粒的筛选 | 第23-25页 |
| 2． 质粒pCXJU的构建 | 第25-26页 |
| 三． 转化方法的建立 | 第26-27页 |
| 1． 化学法转化酵母 | 第26页 |
| 2． 电穿孔法转化隐球菌受体菌 | 第26-27页 |
| 四． 对转化系统的分析和鉴定 | 第27-29页 |
| 结果和讨论 | 第29-47页 |
| 小结 | 第47-48页 |
| 第二部分 新生隐球菌DNA库的构建 | 第48-57页 |
| 引言 | 第48页 |
| 实验步骤和方法 | 第48-52页 |
| 一． 用酶裂解法抽提新生隐球菌总DNA | 第48-49页 |
| 二． 建立总DNA Sau3AI的部分酶切条件 | 第49-50页 |
| 三． 总DNA用EcoRI和HindⅢ酶切 | 第50页 |
| 四． 蔗糖密度梯度离心回收DNA片段 | 第50-51页 |
| 五． 透析模回收DNA | 第51页 |
| 六． 基因的重组与转化 | 第51-52页 |
| 七． 基因库的保存与扩增 | 第52页 |
| 结果和讨论 | 第52-56页 |
| 小结 | 第56-57页 |
| 第三部分 对新生隐球菌荚膜基因CAP60的研究 | 第57-73页 |
| 引言 | 第57页 |
| 实验步骤和方法 | 第57-66页 |
| 一． CAP60基因的扩增 | 第57-58页 |
| 二． 扩增序列的验证 | 第58-66页 |
| 1． 获取质粒pKSP | 第58页 |
| 2． 扩增产物切开连入载体测序 | 第58-61页 |
| 3． 扩增产物装入穿梭质粒回复突变 | 第61-66页 |
| 结果和讨论 | 第66-72页 |
| 小结 | 第72-73页 |
| 第四部分 新生隐球菌荚膜基因CAP70的筛选 | 第73-80页 |
| 引言 | 第73页 |
| 实验步骤和方法 | 第73-76页 |
| 一． 基因库的转化 | 第73页 |
| 二． 转化子的收集 | 第73页 |
| 三． 乳胶凝集试验 | 第73-74页 |
| 四． 筛选方法 | 第74-75页 |
| 五． 获取新基因 | 第75-76页 |
| 结果和讨论 | 第76-79页 |
| 小结 | 第79-80页 |
| 全文总结 | 第80-86页 |
| 结束语 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 综述 | 第92-117页 |
| 致谢 | 第117页 |