| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 缩略语表 | 第13-16页 |
| 文献回顾 | 第16-38页 |
| 1.rDNA(rRNA)的基本结构特征 | 第16-19页 |
| 2.rDNA(rRNA)特定片段和序列分析在原虫种、株鉴定中的应用 | 第19-30页 |
| 3.rDNA(rRNA)的检测及其在疟疾和某些原虫感染诊断中的应用 | 第30-38页 |
| 前言 | 第38-40页 |
| 实验材料 | 第40-47页 |
| 1.细菌菌种 | 第40页 |
| 2.噬菌体载体 | 第40页 |
| 3.限制性内切酶 | 第40页 |
| 4.其它核酸修饰酶 | 第40-42页 |
| 5.生化试剂及物品 | 第42-44页 |
| 6.各种样本 | 第44-45页 |
| 7.主要仪器 | 第45-47页 |
| 实验方法 | 第47-60页 |
| 第一部分 间日疟原虫SSUrDNA特定片段体外扩增及鉴定 | 第47-53页 |
| 1.寡聚核苷酸引物的设计 | 第47页 |
| 2.间日疟原虫SSUrDNA特定片段的体外扩增 | 第47-49页 |
| ·样本DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·PCR扩增 | 第48页 |
| ·产物的观察 | 第48-49页 |
| ·目的片段的回收 | 第49页 |
| 3.间日疟原虫DNA扩增片段的鉴定 | 第49-53页 |
| ·限制性酶切电泳 | 第49页 |
| ·Northern印迹杂交 | 第49-53页 |
| 第二部分 间日疟原虫SSUrDNA特定片段定向克隆及测序分析 | 第53-58页 |
| 1.间日疟原虫SSUrDNA特定片段的定向克隆 | 第53-57页 |
| ·特定片段及载体的处理 | 第53页 |
| ·连接反应 | 第53页 |
| ·感受态宿主菌的制备 | 第53-55页 |
| ·宿主菌的转化和筛选 | 第55页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第55-57页 |
| 2.间日疟原虫SSUrDNA特定片段的测序分析 | 第57-58页 |
| ·测序变性凝胶的灌制 | 第57页 |
| ·测序反应 | 第57页 |
| ·电泳及放射自显影 | 第57-58页 |
| ·DNA序列分析 | 第58页 |
| 第三部分 巢式PCR扩增SSUrDNA特定片段用于P.v检测及鉴定 | 第58-60页 |
| 1.内引物的设计 | 第58页 |
| 2.样本DNA的快速萃取 | 第58-59页 |
| ·冻存血样或培养物DNA萃取 | 第58-59页 |
| ·滤纸血样DNA萃取 | 第59页 |
| 3.巢式PCR | 第59-60页 |
| 结果 | 第60-87页 |
| 第一部分 间日疟原虫SSUrDNA特定片段体外扩增及鉴定 | 第60-66页 |
| 1.寡聚核苷酸引物的设计 | 第60-62页 |
| 2.间日疟原虫SSUrDNA特定片段的体外扩增 | 第62-63页 |
| 3.间日疟原虫DNA扩增片段的鉴定 | 第63-66页 |
| ·限制性内切酶酶切分析 | 第63-65页 |
| ·Northen印迹杂交分析 | 第65-66页 |
| 第二部分 间日疟原虫SSUrDNA特定片段定向克隆及测序分析 | 第66-79页 |
| 1.间日疟原虫SSUrDNA扩增片段重组克隆的鉴定 | 第66-69页 |
| 2.间日疟原虫不同地理株SSUrDNA扩增片段的序列分析 | 第69-79页 |
| 第三部分 巢式PCR扩增SSUrDNA特定片段用于P.v检测及鉴定 | 第79-87页 |
| 1.巢式PCR内引物的设计 | 第79-80页 |
| 2.巢式PCR扩增技术用于P.v的检测及鉴定 | 第80-87页 |
| ·巢式PCR检测P.v的灵敏度 | 第80-81页 |
| ·巢式PCR检测P.v的特异性 | 第81-82页 |
| ·不同疟区血样P.v的检测 | 第82-83页 |
| ·滤纸保存血样P.v检测的效果观察 | 第83-84页 |
| ·间日疟原虫和恶性疟原虫混合感染的鉴定 | 第84-87页 |
| 讨论 | 第87-101页 |
| 1.关于P.vSSUrDNA特定片段体外扩增的引物设计 | 第87-88页 |
| 2.关于双温度点PCR扩增方法的建立 | 第88-91页 |
| 3.关于扩增片段的鉴定 | 第91-92页 |
| 4.关于扩增片段的克隆及鉴定 | 第92-93页 |
| 5.关于rDNA序列水平的变异分析 | 第93-95页 |
| 6.关于PCR模板的制备 | 第95-97页 |
| 7.关于双温度点巢式PCR方法的建立及应用前景 | 第97-101页 |
| 小结 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-106页 |
