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竹节参再生体系的优化及SS基因在烟草毛状根中的功能验证

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
第1章 文献综述第11-23页
   ·竹节参生物学特征第11页
   ·竹节参药理作用第11-13页
     ·抗炎作用第11-12页
     ·抗氧化活性第12页
     ·降血脂和降血压作用第12页
     ·抗衰老及抗疲劳作用第12-13页
     ·抗肿瘤及免疫调节作用第13页
   ·竹节参中的有效成分及提取第13-14页
     ·竹节参中的有效成分第13-14页
     ·竹节参皂苷的提取及测定第14页
   ·竹节参组织培养研究第14-15页
   ·RI质粒介导的毛状根转化第15-17页
     ·发根农杆菌和Ri质粒第15-16页
     ·Ri质粒的应用第16-17页
   ·三萜皂苷生物合成途径及关键酶第17-23页
     ·三萜皂苷代谢途径第18-19页
     ·三萜皂苷代谢的关键酶第19-23页
第2章 绪论第23-25页
   ·研究的目的与意义第23页
   ·研究内容第23页
   ·技术路线第23-25页
第3章 竹节参离体培养及植株再生第25-35页
   ·材料第25页
   ·方法第25-26页
     ·培养基与培养条件第25页
     ·消毒第25页
     ·光照条件下竹节参愈伤组织的诱导第25页
     ·黑暗条件下竹节参愈伤组织的诱导第25页
     ·竹节参丛生芽的诱导第25页
     ·竹节参丛生芽的生根培养第25-26页
     ·竹节参再生植株的移栽第26页
   ·结果与分析第26-32页
     ·不同消毒方法对竹节参愈伤诱导的影响第26页
     ·不同激素水平对竹节参愈伤组织的影响第26-29页
     ·不同的光照条件对竹节参愈伤组织诱导的影响第29-30页
     ·不同激素水平对竹节参芽诱导的影响第30-31页
     ·不同激素水平对竹节参根诱导的影响第31页
     ·竹节参室外移栽第31-32页
   ·讨论第32-35页
第4章 竹节参SS基因植物表达载体的构建第35-47页
   ·实验材料第35-37页
     ·菌种和质粒第35页
     ·培养基第35页
     ·竹节参SS基因的获得第35-37页
   ·实验方法第37-43页
     ·竹节参SS基因植物表达载体构建路线第37-38页
     ·竹节参RNA的提取及质量检测第38-39页
     ·竹节参DNA或RNA质量检测第39页
     ·竹节参总RNA反转录合成cDNA第39页
     ·目的片段的扩增第39-40页
     ·目的片段的回收与连接第40-41页
     ·大肠杆菌DH5a细胞感受态的制备第41页
     ·重组载体pCXSN-SS转化大肠杆菌DH5a第41页
     ·大肠杆菌阳性转化菌株的筛选第41-42页
     ·质粒DNA提取第42页
     ·质粒酶切验证及测序第42-43页
     ·发根农杆菌C58C1细胞感受态的制备第43页
     ·重组载体pCXSN-SS转化发根农杆菌C58C1感受态第43页
   ·实验结果与分析第43-46页
     ·竹节参RNA的提取第43-44页
     ·SS基因的获得及植物表达载体的构建第44页
     ·大肠杆菌菌检结果第44-45页
     ·正义和反义SS基因的方向的酶切鉴定第45-46页
     ·竹节参SS基因双元载体导入发根农杆菌C58C1第46页
   ·讨论第46-47页
第5章 竹节参SS基因的遗传转化与分子检测第47-54页
   ·实验材料第47页
     ·植物材料第47页
     ·培养基第47页
   ·实验方法第47-49页
     ·C58C1工程菌叶盘法转化烟草第47-48页
     ·植物基因组DNA提取(CTAB法)第48页
     ·毛状根的分子检测第48-49页
   ·结果与分析第49-52页
     ·转基因毛状根的获得第49-50页
     ·毛状根中VirD基因检测第50页
     ·毛状根的rolB基因的检测第50-51页
     ·潮霉素抗性基因(hyg)检测第51页
     ·毛状根中外源竹节参SS基因的检测第51-52页
     ·转基因毛状根转录水平的检测第52页
   ·讨论第52-54页
第6章 竹节参皂苷的超声提取及转基因烟草毛状的总皂苷含量测定第54-61页
   ·材料第54页
   ·实验方法第54-55页
     ·竹节参皂苷提取方法第54页
     ·提取方法第54-55页
   ·结果与分析第55-59页
     ·竹节参人参皂苷的提取及Re的HPLC含量测定第55-57页
     ·分光光度法人参皂昔Re标准曲线的绘制第57页
     ·毛状根总皂苷含量测定第57-59页
   ·讨论第59-61页
第7章 结论与建议第61-63页
   ·结论第61页
   ·建议第61-63页
参考文献第63-71页
附录第71-73页
致谢第73-75页
在学期间发表的文章第75页

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