摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
一、萤光酶研究进展 | 第10-14页 |
1. 萤火虫萤光酶的基本特点 | 第10-12页 |
2. 海肾萤光酶的特点 | 第12-13页 |
3. 双萤光酶报告基因介绍 | 第13-14页 |
二、萤光酶与植物启动子 | 第14-16页 |
1. 拟南芥ACT7 基因及ACT7 启动子 | 第14页 |
2. Lehsp23.8 启动子 | 第14-15页 |
3. 萤光酶在研究植物启动子方面的应用 | 第15-16页 |
三、萤火虫萤光酶在研究植物抗逆性方面的应用 | 第16-19页 |
1. 植物热激蛋白 | 第16-17页 |
2. 萤火虫萤光酶与植物抗逆性 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-30页 |
一、实验材料 | 第19-21页 |
1. 植物材料 | 第19页 |
2. 菌种及质粒 | 第19页 |
3. 酶及化学试剂 | 第19页 |
4. 主要仪器设备 | 第19-20页 |
5. PCR 所用引物及序列 | 第20-21页 |
二、实验方法 | 第21-30页 |
1. 质粒的提取 | 第21页 |
2. PCR、酶切及连接 | 第21-22页 |
3. U-GENE 试剂盒从琼脂糖凝胶上回收插入片段 | 第22-23页 |
4. 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
5. 质粒及连接产物转化大肠杆菌感受态 | 第23页 |
6. 农杆菌感受态的制备及植物表达载体的农杆菌转化 | 第23-24页 |
7. 植物基因组DNA 的大量提取 | 第24页 |
8. CaMV35S-FLUC-3301 和HS-FLUC-3301 载体的构建 | 第24-25页 |
9. 双架载体的构建 | 第25-26页 |
10. 渗透法转化拟南芥 | 第26-27页 |
11. 拟南芥转化子的筛选 | 第27页 |
12. 转基因植株外源基因的PCR 检测 | 第27-28页 |
13. 萤光酶活力的检测 | 第28-30页 |
第三章 实验结果与分析 | 第30-40页 |
一、转CaMV35S-LUC-3301 和HS-LUC-3301 表达载体拟南芥的获得及表达分析 | 第30-32页 |
1. 转基因拟南芥的筛选及PCR 鉴定 | 第30-31页 |
2. 转CaMV35S-LUC-3301 表达载体拟南芥的萤光酶活力检测 | 第31页 |
3. 转HS-LUC-3301 表达载体拟南芥的萤光酶活力检测 | 第31-32页 |
二、转ACT7-DUAL-LUC-P81101 双架载体的拟南芥的获得及表达分析 | 第32-36页 |
1. 转基因拟南芥的筛选及其PCR 鉴定 | 第32-34页 |
2. 转 ACT7-DUAL-LUC-P81101 载体拟南芥萤光酶的检测及表达分析 | 第34-36页 |
三、转CaMV35S/HS-DUAL-LUC-PBI101 双架载体拟南芥的筛选及 PCR 鉴定 | 第36-37页 |
四、突变体热敏感机制的初步探索 | 第37-40页 |
1. 不同处理温度对转基因株系叶片萤光酶活力的影响 | 第37-38页 |
2. 突变体的表型分析 | 第38-39页 |
2. 转基因株系的获得 | 第39-40页 |
第四章 讨论与结论 | 第40-42页 |
一、萤光酶与植物启动子 | 第40页 |
二、萤光酶与植物耐热性 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
缩略语 | 第48-49页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |