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山东省鸡肾型IBV的分离鉴定及其核蛋白基因的遗传变异分析

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
英文缩略表第12-13页
引言第13-38页
 1 鸡传染性支气管炎概述第13-14页
 2 鸡传染性支气管炎病毒的分子生物学研究进展第14-23页
   ·鸡传染性支气管炎病毒生物学分类地位第14-15页
   ·鸡传染性支气管炎病毒粒子结构及基因组第15-17页
     ·鸡传染性支气管炎病毒粒子结构第15-16页
     ·鸡传染性支气管炎病毒基因组结构第16-17页
   ·鸡传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白及其复制第17-23页
     ·鸡传染性支气管炎病毒编码蛋白及生物学功能第17-22页
     ·鸡传染性支气管炎病毒的转录复制第22-23页
 3 鸡传染性支气管炎流行病学研究概况第23-36页
   ·鸡传染性支气管炎病毒的分子变异第24-26页
     ·鸡传染性支气管炎病毒分子变异研究的目的基因第24页
     ·鸡传染性支气管炎病毒分子变异机制第24-26页
   ·鸡传染性支气管炎国内外的流行情况第26-36页
     ·国外IB 流行情况第27-34页
     ·国内IB流行情况第34-36页
 4 研究目的和意义第36-38页
试验一 10株鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定第38-47页
 1 材料与方法第38-42页
   ·材料第38-39页
     ·病料的收集第38页
     ·SPF 鸡胚、SPF 雏鸡及鸡外周血红细胞第38-39页
     ·主要试剂及试剂盒第39页
     ·主要仪器设备第39页
     ·引物第39页
   ·方法第39-42页
     ·病料处理第39页
     ·病毒的增殖第39-40页
     ·病毒形态学观察第40页
     ·致鸡胚矮小化试验第40页
     ·病毒干扰试验第40页
     ·血凝试验第40-41页
     ·半数鸡胚感染量(EID50)测定第41页
     ·动物回归试验第41页
     ·病毒RNA 的提取(Trizol 法)第41-42页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第42页
     ·琼脂糖凝胶电泳分析第42页
 2 结果第42-45页
   ·IBV 的形态学观察第42-43页
   ·致鸡胚矮小化试验第43-44页
   ·病毒干扰试验第44页
   ·血凝试验第44页
   ·半数鸡胚感染量(EID50)测定结果第44页
   ·动物回归试验第44-45页
   ·N 基因的扩增及电泳结果第45页
 3 结论与讨论第45-47页
试验二 鸡肾型IBV山东分离株核蛋白基因的遗传变异分析第47-65页
 1 材料与方法第47-55页
   ·材料第47-49页
     ·病毒第47页
     ·SPF 鸡胚第47页
     ·载体与受体菌第47页
     ·主要试剂及试剂盒第47页
     ·主要仪器设备第47-48页
     ·溶液配制第48-49页
     ·引物第49页
   ·方法第49-55页
     ·病毒的扩增第49页
     ·病毒RNA 的提取(Trizol 法)第49-50页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第50页
     ·琼脂糖凝胶电泳分析第50页
     ·PCR 产物的回收第50-51页
     ·IBV N 基因的克隆第51-53页
       ·PCR产物与载体的连接第51-52页
       ·感受态细胞的制备——氯化钙法第52页
       ·连接产物的转化第52-53页
     ·重组质粒的提取与鉴定第53-54页
       ·重组质粒的提取第53-54页
       ·重组质粒的PCR 鉴定第54页
     ·重组阳性质粒的序列测定第54页
     ·N 基因核苷酸及其推导氨基酸序列的比较分析第54-55页
 2 结果第55-62页
   ·IBV 各分离毒株N 基因的序列确定第55-56页
   ·IBV 分离株N 基因序列比较分析第56页
   ·IBV 分离株N 基因序列同源性第56-60页
   ·N 蛋白3 个保守碱性氨基酸区的序列分析第60页
   ·IBV分离株N基因核苷酸及其推导的氨基酸系统进化树分析第60-62页
 3 讨论第62-65页
结论第65-66页
参考文献第66-77页
附录第77-78页
致谢第78-80页
个人简介及攻读学位期间发表论文情况第80页

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