| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 引言 | 第15-33页 |
| 1 植物内生细菌的研究概况 | 第15-26页 |
| ·植物内生细菌的定义 | 第15页 |
| ·植物内生细菌的普遍存在性和生物多样性 | 第15-16页 |
| ·植物和内生细菌的微生态系统 | 第16-17页 |
| ·植物内生细菌的内生定殖研究概况 | 第17-22页 |
| ·植物内生细菌的来源 | 第17页 |
| ·植物内生细菌的侵染定殖过程研究 | 第17-19页 |
| ·植物内生细菌定殖影响因子研究 | 第19-20页 |
| ·内生细菌的性状 | 第19页 |
| ·寄主植物品种及类型 | 第19页 |
| ·相关微生物 | 第19页 |
| ·植物寄生线虫 | 第19-20页 |
| ·植物内生细菌定殖检测方法研究 | 第20-22页 |
| ·抗生素标记法 | 第20页 |
| ·免疫学方法 | 第20-21页 |
| ·基因标记法 | 第21-22页 |
| ·特异性寡核苷酸片段标记法 | 第22页 |
| ·植物内生细菌作为生防因子的研究进展 | 第22-24页 |
| ·植物内生细菌作为生防因子的优点 | 第22-23页 |
| ·内生细菌占据有利于生防的生态位 | 第22页 |
| ·内生细菌可与病菌直接相互作用 | 第22-23页 |
| ·内生细菌可作为外源基因的载体 | 第23页 |
| ·内生细菌的防病机制 | 第23-24页 |
| ·分泌抗菌活性物质 | 第23页 |
| ·营养和生态位的竞争 | 第23页 |
| ·增强宿主植物的抗逆性 | 第23-24页 |
| ·诱导植物系统抗性 | 第24页 |
| ·植物内生细菌的开发与应用前景 | 第24-25页 |
| ·内生生物菌剂的应用 | 第24-25页 |
| ·植物内生工程细菌的构建 | 第25页 |
| ·其他方面 | 第25页 |
| ·植物内生细菌研究中存在的问题 | 第25-26页 |
| 2 洋葱伯克霍尔德氏菌的研究概况 | 第26-29页 |
| ·洋葱伯克霍尔德氏菌概述 | 第26-28页 |
| ·洋葱伯克霍尔德氏菌的分类地位研究 | 第27页 |
| ·洋葱伯克霍尔德氏菌的分离鉴定 | 第27-28页 |
| ·洋葱伯克霍尔德氏菌作为生防菌的应用 | 第28-29页 |
| 3 绿色荧光蛋白作为分子标记物在微生物学中的应用研究进展 | 第29-30页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第29页 |
| ·新型报告基因—绿色荧光蛋白基因 | 第29页 |
| ·gfp 基因标记微生物的检测方法 | 第29-30页 |
| ·gfp 基因在植物与微生物之间互作研究中的应用 | 第30页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第30-33页 |
| 第一章 桑树内生拮抗细菌Burkholderia cepacia Lu10-1 的分离鉴定 | 第33-51页 |
| 1 材料与方法 | 第33-41页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·供试植物材料 | 第33页 |
| ·供试病原菌 | 第33页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-41页 |
| ·桑树内生细菌分离 | 第34页 |
| ·内生拮抗菌株的筛选及Lu10-1 菌株抑菌谱的测定 | 第34-35页 |
| ·菌株鉴定 | 第35-41页 |
| ·菌株培养特征和菌体形态观察 | 第35页 |
| ·菌株培养特征观察 | 第35页 |
| ·菌体形态观察 | 第35页 |
| ·生理生化指标测定 | 第35-39页 |
| ·16S rRNA 基因序列测定及其系统进化树的构建 | 第39-40页 |
| ·细菌基因组DNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·16S rRNA基因的PCR扩增及序列分析 | 第40页 |
| ·recA 基因特异引物PCR 检测法鉴定Lu10-1 菌株的基因型 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-49页 |
| ·不同品种桑树内生细菌的数量测定结果 | 第41-42页 |
| ·内生拮抗菌株的筛选及Lu10-1 菌株抑菌谱的测定 | 第42-43页 |
| ·Lu10-1菌株的菌体形态及菌落特征 | 第43页 |
| ·Lu10-1菌株的生理生化特征 | 第43-45页 |
| ·16S rRNA基因序列测定及其系统发育树的构建 | 第45-48页 |
| ·Lu10-1菌株的基因型鉴定 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| ·关于桑树内生细菌的分离 | 第49页 |
| ·关于桑树内生拮抗细菌 Lu10-1 的筛选 | 第49页 |
| ·关于桑树内生拮抗细菌 Lu10-1 的鉴定 | 第49-50页 |
| ·关于进一步研究的设想 | 第50-51页 |
| 第二章 桑树内生拮抗细菌Burkholderia cepacia Lu10-1 的侵染定殖规律研究 | 第51-70页 |
| 1 材料与方法 | 第51-57页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·菌株与质粒 | 第51页 |
| ·供试植物材料 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-57页 |
| ·内生细菌Lu10-1 在桑树体内的数量消长动态测定 | 第52-53页 |
| ·内生细菌双抗药性突变菌株的筛选 | 第52页 |
| ·双抗药性突变菌株Lu10-1R 桑树体内定殖测定接种方法 | 第52-53页 |
| ·双抗药性突变菌株Lu10-1R 的回收与计数 | 第53页 |
| ·回收菌株Lu10-1P 的鉴定及拮抗作用测定 | 第53页 |
| ·内生细菌Lu10-1 侵染桑树根的扫描电镜观察 | 第53-54页 |
| ·桑树种子消毒及菌液制备 | 第53-54页 |
| ·桑树幼苗接菌与培养 | 第54页 |
| ·取样及扫描电子显微镜(SEM) 观察 | 第54页 |
| ·取样 | 第54页 |
| ·扫描电镜样品制作方法 | 第54页 |
| ·gfp 基因标记法检测内生细菌 Lu10-1 对桑树的侵染与定殖 | 第54-57页 |
| ·内生细菌Lu10-1的gfp基因标记 | 第54-57页 |
| ·pGFP4412 质粒的提取 | 第54-55页 |
| ·菌株Lu10-1 感受态细胞的制备 | 第55页 |
| ·质粒pGFP4412转化菌株Lu10-1感受态细胞 | 第55-56页 |
| ·转化子的筛选 | 第56页 |
| ·转化子的鉴定 | 第56-57页 |
| ·转化菌株质粒遗传稳定性测定 | 第57页 |
| ·桑树幼苗的培养和接种 | 第57页 |
| ·用激光共聚焦扫描显微镜 (CLSM) 监测 gfp 基因标记菌 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-66页 |
| ·内生细菌Lu10-1 在桑树体内的数量消长动态测定结果 | 第57-61页 |
| ·双抗药性突变菌株Lu10-1R 的筛选 | 第57-58页 |
| ·不同方法接种双抗标记菌株Lu10-1R 在桑树体内的定殖测定 | 第58页 |
| ·浸种接种检测菌株在桑树体内的消长动态 | 第58-59页 |
| ·浸根接种检测菌株在桑树体内的消长动态 | 第59-60页 |
| ·回收菌株常规鉴定及拮抗作用测定 | 第60-61页 |
| ·内生细菌Lu10-1 侵染桑树根的 SEM 观察 | 第61-62页 |
| ·内生细菌 Lu10-1 在桑树幼根表面的吸附和分布观察 | 第61页 |
| ·内生细菌Lu10-1 侵入桑树根的途径观察 | 第61-62页 |
| ·gfp 基因标记法检测内生细菌 Lu10-1 对桑树的侵染与定殖 | 第62-66页 |
| ·内生细菌Lu10-1的gfp基因标记 | 第62-64页 |
| ·用CLSM监测gfp基因标记菌株Lu10-1对桑树的侵染和定殖 | 第64-66页 |
| ·gfp 基因标记菌株Lu10-1 对桑树根的侵染与定殖 | 第64-65页 |
| ·gfp 基因标记菌株从桑树根部向茎、叶部的迁移 | 第65页 |
| ·gfp 基因标记菌株在桑树中的稳定定殖 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-70页 |
| ·关于内生细菌 Lu10-1 在桑树体内的数量消长动态 | 第66页 |
| ·关于内生细菌 Lu10-1 在桑树根表面的吸附和分布规律 | 第66-67页 |
| ·关于内生细菌 Lu10-1 侵入桑树根的途径 | 第67页 |
| ·关于内生细菌 Lu10-1 的 gfp 基因标记 | 第67-68页 |
| ·关于内生细菌 Lu10-1 对桑树的侵染和定殖 | 第68-69页 |
| ·关于进一步研究的设想 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-83页 |
| 图版 | 第83-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 硕士研究生期间发表的论文 | 第93页 |
