| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·我国重组蛋白药物概况 | 第11-12页 |
| ·重组蛋白复性的意义 | 第12-14页 |
| ·重组蛋白复性方法研究进展 | 第14-21页 |
| ·稀释法、透析法、超滤法 | 第14-15页 |
| ·分子伴侣及人工分子伴侣辅助复性 | 第15-16页 |
| ·折叠促进剂协助复性 | 第16页 |
| ·反胶束复性 | 第16页 |
| ·蛋白折叠液相色谱法 | 第16-21页 |
| ·重组人干扰素概况 | 第21-24页 |
| ·干扰素概述 | 第21-23页 |
| ·重组人干扰素-γ的复性及纯化研究进展 | 第23-24页 |
| ·研究思路 | 第24-26页 |
| 第二章 实验部分 | 第26-36页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·实验试剂 | 第26-27页 |
| ·试剂配制 | 第27-28页 |
| ·rhIFN-γ的菌体清洗液 | 第27页 |
| ·rhIFN-γ的包涵体清洗液 | 第27页 |
| ·rhIFN-γ的包涵体提取液 | 第27页 |
| ·色谱流动相 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-30页 |
| ·rhIFN-γ的包涵体制备 | 第28-29页 |
| ·rhSCF的包涵体制备 | 第29页 |
| ·人血清样品粗溶液的制备 | 第29页 |
| ·rhIFN-γ的HIC复性并同时纯化 | 第29页 |
| ·rhSCF的HIC分离纯化 | 第29-30页 |
| ·rhIFN-γ的SEC除盐 | 第30页 |
| ·rhIFN-γ冷冻干燥 | 第30页 |
| ·分析方法 | 第30-36页 |
| ·Bradford法测定蛋白含量 | 第30-31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)测定蛋白纯度 | 第31-33页 |
| ·RPLC分析rhIFN-γ纯品干粉的纯度 | 第33-34页 |
| ·rhIFN-γ活性测定 | 第34-35页 |
| ·MALDI-TOF-MS检测rhIFN-γ分子量 | 第35-36页 |
| 第三章 蛋白折叠的理论依据 | 第36-46页 |
| ·概述 | 第36-37页 |
| ·蛋白质的变性与复性 | 第37页 |
| ·蛋白质折叠的策略 | 第37-38页 |
| ·蛋白质的疏水色谱折叠机理 | 第38-45页 |
| ·STHIC对蛋白折叠的贡献 | 第39-41页 |
| ·流动相对蛋白折叠的贡献 | 第41-42页 |
| ·STHIC和流动相的协同作用在蛋白折叠过程中的作用 | 第42-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第四章 固定相对rhIFN-γ复性效率的影响 | 第46-57页 |
| ·概述 | 第46页 |
| ·实验结果与讨论 | 第46-55页 |
| ·七种STHIC分离性能的比较 | 第46-48页 |
| ·rhIFN-γ抽提液进样量的选择 | 第48-49页 |
| ·STHIC对rhIFN-γ的复性并同时纯化 | 第49-50页 |
| ·rhIFN-γ复性效率的比较 | 第50-52页 |
| ·STHIC疏水性的比较 | 第52-53页 |
| ·不同疏水性的STHIC对rhSCF分离纯化 | 第53-55页 |
| ·提高rhIFN-γ质量回收率的策略 | 第55页 |
| ·小结 | 第55-57页 |
| 第五章 流动相对rhIFN-γ复性效率的影响 | 第57-67页 |
| ·概述 | 第57-58页 |
| ·实验结果与讨论 | 第58-66页 |
| ·流动相组成对rhIFN-γ复性效率的影响 | 第58-61页 |
| ·不同梯度洗脱模式对rhIFN-γ复性效率的影响 | 第61-63页 |
| ·不同流速对rhIFN-γ复性效率的影响 | 第63-64页 |
| ·流动相pH对rhIFN-γ复性效率的影响 | 第64-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第六章 rhIFN-γ的制备和鉴定 | 第67-74页 |
| ·概述 | 第67页 |
| ·实验结果与讨论 | 第67-73页 |
| ·rhIFN-γ的HPHIC复性并同时纯化 | 第67-68页 |
| ·rhIFN-γ的排阻色谱除盐和冷冻干燥 | 第68-69页 |
| ·SDS-PAGE测定rhIFN-γ的纯度和活性测定 | 第69-70页 |
| ·RPLC测定rhIFN-γ的纯度 | 第70-71页 |
| ·MALD1-TOF-MS测定rhIFN-γ的分子量 | 第71页 |
| ·与文献中复性及纯化rhIFN-γ工艺的比较 | 第71-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第七章 色谱饼的分离性能及应用研究 | 第74-83页 |
| ·概述 | 第74-75页 |
| ·实验结果与讨论 | 第75-81页 |
| ·流速对色谱饼分离性能的影响 | 第75-77页 |
| ·样品粘度对色谱饼分离性能的影响 | 第77-78页 |
| ·不同进样体积对色谱饼分离性能的影响 | 第78-80页 |
| ·色谱饼在纯化与复性重组蛋白中的应用 | 第80-81页 |
| ·小结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第91页 |
