摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-13页 |
1 引言 | 第13-41页 |
·绵羊卵泡生长发育动态变化及调控因子 | 第14-31页 |
·绵羊卵泡的类波(wave-like)模式发育 | 第14页 |
·卵泡生长发育的调控 | 第14-17页 |
·繁殖相关主要基因的结构与功能 | 第17-31页 |
·绵羊分子标记研究进展 | 第31-36页 |
·限制性片段长度多态性(RFLP)简介 | 第31-33页 |
·PCR-SSCP 技术 | 第33-36页 |
·基因差异表达研究方法 | 第36-40页 |
·消减杂交法(Subtractive Hybridization) | 第36页 |
·mRNA 差异显示技术(mRNA Differential Display) | 第36-37页 |
·代表性序列差别分析(Representational Difference Analysis) | 第37页 |
·抑制消减杂交法(Suppression Subtractive Hybridization) | 第37-39页 |
·基因表达系列分析(Serial Analysis of Gene Expression) | 第39-40页 |
·本研究的目的和意义 | 第40-41页 |
2 研究一候选基因法研究绵羊的排卵主效基因 | 第41-69页 |
·实验材料 | 第41-43页 |
·实验样品 | 第41页 |
·仪器设备 | 第41-42页 |
·主要试剂和溶液 | 第42-43页 |
·主要分子生物学软件及相关网站 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-47页 |
·基因组DNA 的提取与检测 | 第43-44页 |
·PCR 反应 | 第44-45页 |
·绵羊BMP15、BMPRIB 和GDF9 基因的多态性分析 | 第45-47页 |
·数据分析 | 第47-49页 |
·序列分析 | 第47页 |
·基因多态性的统计方法 | 第47-49页 |
·结果与分析 | 第49-65页 |
·基因组DNA 的提取与检测结果 | 第49页 |
·BMP15 基因的多态性分析 | 第49-60页 |
·BMPRIB 基因的多态性分析 | 第60-64页 |
·绵羊GDF9 基因的多态性分析 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-69页 |
·BMP15 基因与绵羊繁殖性能的关系 | 第65-67页 |
·BMPRIB 基因与绵羊繁殖性能的关系 | 第67页 |
·GDF9 基因与绵羊繁殖性能的关系 | 第67-68页 |
·关于各基因位点的群体遗传学分析 | 第68-69页 |
3 研究二 蒙古羊卵巢组织差异表达基因的筛选和特征分析 | 第69-93页 |
·实验样品 | 第69页 |
·实验试剂 | 第69-70页 |
·实验仪器 | 第70页 |
·载体和菌株 | 第70页 |
·实验方法 | 第70-82页 |
·蒙古羊单、双羔卵巢组织总 RNA 的制备 | 第70页 |
·蒙古羊单、双羔卵巢组织mRNA 的分离 | 第70-71页 |
·Driver 和 Tester cDNA 的制备 | 第71-73页 |
·cDNA RsaI 酶切 | 第73-74页 |
·Driver cDNA 的制备 | 第74页 |
·Tester cDNA 的制备——接头连接 | 第74-75页 |
·差减杂交 | 第75-78页 |
·差减文库构建 | 第78-79页 |
·差减cDNA 文库的筛选 | 第79-82页 |
·阳性克隆cDNA 片段测序及序列分析 | 第82页 |
·结果分析 | 第82-93页 |
·蒙古羊卵巢组织总RNA 电泳结果 | 第82-83页 |
·蒙古羊卵巢组织总RNA 的mRNA 纯化结果 | 第83页 |
·蒙古羊卵巢组织mRNA 的cDNA 电泳结果 | 第83页 |
·抑制消减杂交 | 第83-85页 |
·消减cDNA 文库的构建和筛选 | 第85-86页 |
·阳性克隆测序及序列分析 | 第86-88页 |
·讨论 | 第88-93页 |
4 研究三 蒙古羊骨形态发生蛋白基因15 的克隆与序列分析 | 第93-118页 |
·实验材料 | 第93-95页 |
·实验样品 | 第93页 |
·主要仪器和设备 | 第93页 |
·主要试剂 | 第93-94页 |
·主要试剂和溶液的配制 | 第94-95页 |
·主要分子生物学软件及相关网站 | 第95页 |
·实验方法 | 第95-101页 |
·基因组DNA 的提取与检测 | 第95页 |
·PCR 反应 | 第95-97页 |
·蒙古羊 BMP15 基因的克隆与测序 | 第97-101页 |
·数据分析 | 第101页 |
·结果与分析 | 第101-118页 |
·蒙古羊基因组 DNA 的提取与检测结果 | 第101-102页 |
·蒙古羊 BMP15 基因的 PCR 扩增结果 | 第102-103页 |
·扩增产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第103-104页 |
·外显子1 和2 引物扩增片断与GenBank 中人BMP15 基因相应片断的比对结果 | 第104-105页 |
·序列的拼接 | 第105-108页 |
·蒙古羊BMP15 基因核苷酸序列分析 | 第108-109页 |
·蒙古羊BMP15 基因编码氨基酸序列分析 | 第109-114页 |
·蒙古羊BMP15 蛋白结构预测 | 第114-118页 |
·讨论 | 第118页 |
5 结论 | 第118-120页 |
本课题主要创新之处 | 第120-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-133页 |
作者简介 | 第133-134页 |