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利用RNAi技术对拟南芥液泡H~+-ATPase c亚基功能的初步研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-17页
   ·液泡H~+-ATPase的研究进展第9-13页
     ·液泡H~+-ATPase的结构、组成和功能第9-10页
     ·液泡H~+-ATPase c亚基的结构、功能第10-11页
     ·液泡H~+-ATPase在胁迫响应中的作用第11-12页
     ·拟南芥液泡H~+-ATPase c亚基的相关研究第12-13页
   ·RNA干扰技术第13-16页
     ·RNA干扰现象的认识过程第13-14页
     ·RNA干扰的作用机制第14页
     ·RNAi作用的特点第14-15页
     ·RNAi的生物学意义第15页
     ·转基因植物中的RNA干扰第15-16页
     ·RNAi在植物中的应用第16页
   ·研究目的和意义第16-17页
2 材料与方法第17-32页
   ·实验材料第17页
     ·植物材料第17页
     ·菌株和质粒第17页
     ·试剂第17页
   ·实验方法第17-32页
     ·植物培养第17-18页
     ·VHA-c基因RNAi表达载体的构建第18-26页
     ·植物表达载体的农杆菌转化第26-27页
     ·转基因植物的获得及纯合体的获得第27-28页
     ·转基因植物的分子鉴定第28-31页
     ·转基因植物的表型分析第31-32页
3 结果与分析第32-45页
   ·VHA-c基因RNAi载体的构建第32-37页
     ·中间载体pHAN-c_n-s-as的构建第32-36页
     ·植物表达载体pART27-cn的构建第36-37页
   ·pART27-c_n表达载体的农杆菌转化第37-40页
   ·转基因植株的筛选第40页
   ·转基因植株目标基因转录水平的检测第40-43页
     ·拟南芥总RNA的提取第40-41页
     ·转基因纯合体植株目标基因沉默程度的半定量RT-PCR检测第41-43页
   ·部分转基因纯合体表型分析和盐胁迫处理第43-45页
     ·表型分析第43-44页
     ·暗培养后VHA-c1沉默纯合体根和下胚轴的变化第44页
     ·盐胁迫下VHA-c4和VHA-c2双沉默纯合体根伸长的变化第44-45页
4 结论与讨论第45-50页
   ·植物中高效基因沉默载体的设计第45-46页
   ·拟南芥VHA-c基因的沉默效率第46-47页
   ·V-ATPase在细胞扩展中的作用第47页
   ·VHA-c1与光和激素的关系第47-48页
   ·VHA-c4与盐胁迫的关系第48页
   ·结论第48-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-56页
作者简介第56页

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