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免疫荧光法和免疫酶标法检测新城疫病毒的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
插图和附表清单第10-12页
本文常用缩写词第12-13页
文献综述第13-21页
 1 新城疫病毒的概述第13-16页
   ·病原学第13页
   ·理化学特性第13页
   ·病毒的致病力和病毒株分类第13页
   ·生物学特性第13-14页
   ·NDV 的培养特性第14页
   ·NDV 致病性及其致病的分子基础第14-15页
   ·NDV 流行病学研究及防制第15-16页
 2 ND 的诊断技术的研究第16-21页
   ·NDV的常规分离与鉴定第16页
   ·NDV 血清学诊断方法第16-18页
   ·分子生物学诊断技术第18-21页
引言第21-22页
正文 免疫荧光法和免疫组化法检测新城疫病毒的研究第22-53页
 1 材料和方法第22-36页
   ·实验动物第22页
   ·实验材料第22页
   ·主要试剂第22-28页
   ·主要器材第28-29页
   ·病毒的增殖、测定及纯化第29-30页
     ·SPF 鸡胚增殖病毒第29页
     ·鸡胚成纤维细胞增殖病毒第29页
     ·NDV F_(48)E_8 株组织半数感染量(TCID_(50))的测定第29-30页
       ·单层鸡胚成纤维细胞的制备第29页
       ·细胞病变试验第29页
       ·NDV 的TCID_(50) 的计算第29-30页
     ·血凝试验检测 NDV 病毒第30页
     ·NDV 病毒的纯化第30页
   ·鸡抗 NDV 多克隆抗体的制备第30页
     ·鸡的免疫第30页
     ·鸡抗 NDV 多克隆抗体效价测定第30页
   ·鸡血清IgG 的纯化与鉴定第30-33页
     ·硫酸铵分步沉淀法粗提鸡血清免疫球蛋白第30-31页
     ·透析除盐第31页
     ·凝胶过滤层析纯化鸡IgG第31页
     ·Folin-酚法测鸡 IgG 的浓度第31-32页
     ·SDS-PAGE 电泳检测鸡IgG 纯度第32页
     ·免疫电泳检测鸡 IgG 的纯度第32-33页
   ·兔抗鸡血清IgG 多克隆抗体的制备第33页
   ·兔抗鸡 IgG 多克隆抗体的鉴定第33-34页
     ·兔抗鸡血清 IgG 隆抗体多克的检测第33页
     ·Western-Blotting 检测兔抗鸡血清 IgG 多克隆抗体特异性第33-34页
   ·兔抗鸡血清IgG 多克隆抗体的纯化第34页
   ·酶标记兔抗鸡血清IgG 抗体的制备及鉴定第34-35页
     ·酶标记兔抗鸡血清IgG 抗体的制备第34页
     ·酶标记兔抗鸡血清 IgG 抗体使用效果的检测第34-35页
   ·免疫酶标细胞化学法检测 NDV 在细胞中的定位第35页
   ·免疫荧光化学法检测 NDV 在细胞中的定位第35-36页
 2 结果与分析第36-48页
   ·病毒的增殖及检测第36页
     ·病毒的增殖第36页
       ·SPF 鸡胚增殖NDV第36页
       ·成纤维细胞增殖 ND 病毒第36页
     ·ND 病毒效价的测定第36页
   ·鸡抗NDV 抗体效价的测定第36页
   ·鸡血清IgG 的纯化与鉴定第36-39页
     ·鸡免疫球蛋白分离产物浓度的测定第36-37页
     ·Sephadex G-200 柱洗脱曲线的绘制第37-38页
     ·鸡 IgG 纯度鉴定第38-39页
       ·SDS-PAGE 电泳检测鸡 IgG 的纯度第38页
       ·免疫电泳检测层析鸡 IgG 的纯度第38-39页
   ·兔抗鸡IgG 多抗的鉴定第39-40页
     ·免疫双扩散法检测兔抗鸡 IgG 多抗的效价第39-40页
     ·Western Blotting 鉴定兔抗鸡 IgG 多抗的特异性第40页
   ·ND 病毒TCID50 的测定第40-41页
   ·兔抗鸡IgG 酶标记多克隆抗体的制备和检测第41-44页
     ·兔抗鸡 IgG 酶标记多抗的制备第41-43页
     ·兔抗鸡 IgG 酶标记多抗的检测结果第43-44页
   ·免疫酶标细胞化学法检测NDV 的结果第44-45页
     ·免疫酶标细胞化学法检测NDV 在CEF 中的定位第44-45页
     ·免疫酶标细胞化学法检测NDV 在COS-7 细胞中的定位第45页
   ·免疫荧光细胞化学法检测NDV 的结果第45-46页
     ·免疫荧光细胞化学法检测NDV 在CEF 中的定位第45-46页
     ·免疫荧光细胞化学法检测NDV 在COS-7 细胞中的定位第46页
   ·最佳病毒浓度和病毒反应时间的条件的选择第46-48页
 3 讨论第48-52页
   ·免疫原的制备第48页
   ·分离方法的选择第48-49页
   ·纯化蛋白的检测第49页
   ·Western Blot 分析 IgG 的免疫原性和反应原性第49页
   ·抗血清的制备第49-50页
   ·酶标记抗体的制备与检测第50页
   ·免疫酶标细胞化学法和免疫荧光细胞化学法检测方法的建立第50-52页
 4 结论第52-53页
参考文献第53-58页
致谢第58-59页
作者简介第59页

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