中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
一 前言 | 第10-23页 |
·猪的遗传缺陷概述 | 第10-11页 |
·遗传缺陷 | 第10页 |
·染色体病 | 第10页 |
·单基因遗传缺陷 | 第10页 |
·多基因遗传缺陷 | 第10-11页 |
·猪应激综合征主效基因RYR1基因研究进展 | 第11-12页 |
·猪应激综合征产生的原因 | 第11页 |
·RYR1基因的结构、功能及其染色体定位 | 第11-12页 |
·RYR1基因隐形突变的检测及其原理 | 第12页 |
·猪载脂蛋白缺陷的研究进展 | 第12-13页 |
·猪载脂蛋白缺陷产生的原因 | 第12页 |
·ApoB基因的结构及其染色体定位 | 第12-13页 |
·猪白细胞粘附缺陷的研究进展 | 第13-14页 |
·猪白细胞粘附缺陷及其产生的原因 | 第13页 |
·CD18基因的结构、功能及其染色体定位 | 第13-14页 |
·CD18基因A383G突变的检测 | 第14页 |
·DNA多态性检测方法 | 第14-19页 |
·限制性内切酶片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP) | 第14-15页 |
·单链构象多态性(PCR-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP) | 第15-17页 |
·等位基因特异PCR(allele specific PCR,AS-PCR) | 第17页 |
·四引物扩增受阻突变体系PCR(tetra-primer amplification refractory mutation system PCR,Tetra-primer ARMS-PCR) | 第17-18页 |
·随机引物扩增多态性DNA(random amplified polymorphism DNA,RAPD) | 第18-19页 |
·贵州地方猪品种 | 第19-23页 |
·黔北型地方猪 | 第19-20页 |
·黔西北高原型地方猪 | 第20-21页 |
·黔中型地方猪 | 第21页 |
·黔东型地方猪 | 第21-22页 |
·黔东型边缘小型香猪 | 第22-23页 |
二 研究的目的与意义 | 第23-24页 |
三 材料与方法 | 第24-42页 |
·实验材料 | 第24-28页 |
·实验样本的来源及采样方法 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·主要实验仪器 | 第25-26页 |
·抽提基因组DNA溶液和试剂配制 | 第26页 |
·琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂 | 第26-27页 |
·感受态细胞制备及转化相关试剂 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-40页 |
·基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
·PCR引物的选择及PCR反应条件的确定 | 第29-32页 |
·PCR产物的检测 | 第32-33页 |
·RYR1基因的PCR-RFLP分析 | 第33-34页 |
·ApoB基因的PCR-RFLP分析 | 第34页 |
·ApoB基因的PCR-SSCP分析 | 第34-36页 |
·CD18基因的AS-PCR检测 | 第36页 |
·CD18基因的PCR-RFLP分析 | 第36-37页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第37-38页 |
·克隆载体 | 第38页 |
·纯化的PCR产物与载体的连接 | 第38页 |
·感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
·转化实验 | 第39页 |
·阳性菌落的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
·碱基序列的测定与保种 | 第40页 |
·统计分析 | 第40-41页 |
·基因型频率和基因频率 | 第40-41页 |
·杂合度和有效等位基因数的计算 | 第41页 |
·分析软件 | 第41-42页 |
四 结果 | 第42-55页 |
·基因组DNA提取结果 | 第42页 |
·RYR1基因片段的扩增与多态性检测 | 第42-48页 |
·RYR1基因片段PCR的扩增结果 | 第42-43页 |
·重组质粒的构建和鉴定 | 第43-45页 |
·RYR1基因片段的核苷酸序列测定及分析 | 第45页 |
·RYR1基因片段PCR-RFLP多态性的检测 | 第45-46页 |
·RYR1不同基因型的碱基序列分析 | 第46-47页 |
·RYR1基因型频率和基因频率 | 第47-48页 |
·ApoB基因片段的扩增及多态性检测 | 第48-51页 |
·ApoB基因片段扩增 | 第48-49页 |
·ApoB基因片段PCR-RFLP分析 | 第49-50页 |
·ApoB基因片段PCR-SSCP分析 | 第50页 |
·ApoB基因片段多态性检测结果与分析 | 第50-51页 |
·CD18基因片段的扩增及多态性检测 | 第51-55页 |
·CD18基因片段AS-PCR检测 | 第51页 |
·重组质粒的构建和鉴定 | 第51-52页 |
·CD18不同基因型的碱基序列分析 | 第52-53页 |
·CD18基因片段PCR扩增 | 第53-54页 |
·CD18基因片段的PCR-RFLP多态性检测 | 第54页 |
·CD18基因片段多态性检测结果与分析 | 第54-55页 |
五 讨论 | 第55-60页 |
·实验材料的选择 | 第55页 |
·贵州地方猪品种RYR1基因多态性分析 | 第55-57页 |
·太湖猪RYR1基因多态性分析 | 第57页 |
·贵州地方猪品种ApoB基因的多态性分析 | 第57-58页 |
·贵州地方猪品种CD18基因的多态性分析 | 第58-60页 |
小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
缩略语表 | 第69-70页 |
附录 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-73页 |