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七种贵州地方猪品种的三种遗传缺陷主效基因多态性研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
一 前言第10-23页
   ·猪的遗传缺陷概述第10-11页
     ·遗传缺陷第10页
     ·染色体病第10页
     ·单基因遗传缺陷第10页
     ·多基因遗传缺陷第10-11页
   ·猪应激综合征主效基因RYR1基因研究进展第11-12页
     ·猪应激综合征产生的原因第11页
     ·RYR1基因的结构、功能及其染色体定位第11-12页
     ·RYR1基因隐形突变的检测及其原理第12页
   ·猪载脂蛋白缺陷的研究进展第12-13页
     ·猪载脂蛋白缺陷产生的原因第12页
     ·ApoB基因的结构及其染色体定位第12-13页
   ·猪白细胞粘附缺陷的研究进展第13-14页
     ·猪白细胞粘附缺陷及其产生的原因第13页
     ·CD18基因的结构、功能及其染色体定位第13-14页
     ·CD18基因A383G突变的检测第14页
   ·DNA多态性检测方法第14-19页
     ·限制性内切酶片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)第14-15页
     ·单链构象多态性(PCR-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)第15-17页
     ·等位基因特异PCR(allele specific PCR,AS-PCR)第17页
     ·四引物扩增受阻突变体系PCR(tetra-primer amplification refractory mutation system PCR,Tetra-primer ARMS-PCR)第17-18页
     ·随机引物扩增多态性DNA(random amplified polymorphism DNA,RAPD)第18-19页
   ·贵州地方猪品种第19-23页
     ·黔北型地方猪第19-20页
     ·黔西北高原型地方猪第20-21页
     ·黔中型地方猪第21页
     ·黔东型地方猪第21-22页
     ·黔东型边缘小型香猪第22-23页
二 研究的目的与意义第23-24页
三 材料与方法第24-42页
   ·实验材料第24-28页
     ·实验样本的来源及采样方法第24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·主要实验仪器第25-26页
     ·抽提基因组DNA溶液和试剂配制第26页
     ·琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂第26-27页
     ·感受态细胞制备及转化相关试剂第27-28页
   ·实验方法第28-40页
     ·基因组DNA的提取第28-29页
     ·PCR引物的选择及PCR反应条件的确定第29-32页
     ·PCR产物的检测第32-33页
     ·RYR1基因的PCR-RFLP分析第33-34页
     ·ApoB基因的PCR-RFLP分析第34页
     ·ApoB基因的PCR-SSCP分析第34-36页
     ·CD18基因的AS-PCR检测第36页
     ·CD18基因的PCR-RFLP分析第36-37页
     ·PCR产物的纯化回收第37-38页
     ·克隆载体第38页
     ·纯化的PCR产物与载体的连接第38页
     ·感受态细胞的制备第38-39页
     ·转化实验第39页
     ·阳性菌落的筛选与鉴定第39-40页
   ·碱基序列的测定与保种第40页
   ·统计分析第40-41页
     ·基因型频率和基因频率第40-41页
     ·杂合度和有效等位基因数的计算第41页
   ·分析软件第41-42页
四 结果第42-55页
   ·基因组DNA提取结果第42页
   ·RYR1基因片段的扩增与多态性检测第42-48页
     ·RYR1基因片段PCR的扩增结果第42-43页
     ·重组质粒的构建和鉴定第43-45页
     ·RYR1基因片段的核苷酸序列测定及分析第45页
     ·RYR1基因片段PCR-RFLP多态性的检测第45-46页
     ·RYR1不同基因型的碱基序列分析第46-47页
     ·RYR1基因型频率和基因频率第47-48页
   ·ApoB基因片段的扩增及多态性检测第48-51页
     ·ApoB基因片段扩增第48-49页
     ·ApoB基因片段PCR-RFLP分析第49-50页
     ·ApoB基因片段PCR-SSCP分析第50页
     ·ApoB基因片段多态性检测结果与分析第50-51页
   ·CD18基因片段的扩增及多态性检测第51-55页
     ·CD18基因片段AS-PCR检测第51页
     ·重组质粒的构建和鉴定第51-52页
     ·CD18不同基因型的碱基序列分析第52-53页
     ·CD18基因片段PCR扩增第53-54页
     ·CD18基因片段的PCR-RFLP多态性检测第54页
     ·CD18基因片段多态性检测结果与分析第54-55页
五 讨论第55-60页
   ·实验材料的选择第55页
   ·贵州地方猪品种RYR1基因多态性分析第55-57页
   ·太湖猪RYR1基因多态性分析第57页
   ·贵州地方猪品种ApoB基因的多态性分析第57-58页
   ·贵州地方猪品种CD18基因的多态性分析第58-60页
小结第60-61页
参考文献第61-69页
缩略语表第69-70页
附录第70-71页
致谢第71-73页

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