| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·蛋白质折叠 | 第12-15页 |
| ·蛋白质折叠简介 | 第12-13页 |
| ·蛋白质折叠机制的理论模型 | 第13-14页 |
| ·蛋白质折叠进展 | 第14-15页 |
| ·分子伴侣 | 第15-22页 |
| ·分子伴侣简介 | 第15-16页 |
| ·硫矿硫化叶菌分子伴侣 | 第16-19页 |
| ·分子伴侣对蛋白质折叠的影响 | 第19-22页 |
| ·ATPase活性 | 第22-24页 |
| ·ATPase依赖型蛋白酶 | 第22页 |
| ·ATPase依赖型分子伴侣 | 第22-24页 |
| 第2章 ATPase活性突变的硫矿硫化叶菌分子伴侣的构建,克隆表达和纯化 | 第24-41页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·硫矿硫化叶菌P2分子伴侣基因cpnB质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·重叠延伸pcr构建定点突变 | 第25页 |
| ·PCR产物的纯化与连接 | 第25-26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·连接产物的转化 | 第26页 |
| ·阳性克隆的筛选鉴定 | 第26-27页 |
| ·序列测定及序列分析 | 第27页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·P2突变分子伴侣在大肠杆菌中的诱导表达 | 第28页 |
| ·突变分子伴侣表达产物的纯化 | 第28-29页 |
| ·突变分子伴侣的体外聚合 | 第29页 |
| ·突变分子伴侣的纯化 | 第29页 |
| ·突变分子伴侣的ATPase活力测定 | 第29页 |
| ·实验结果 | 第29-40页 |
| ·重叠延伸PCR引物的设计 | 第29-30页 |
| ·突变分子伴侣基因BA和BD的PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·序列测定及序列分析 | 第31-34页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第34-37页 |
| ·分子伴侣β亚基突变在大肠杆菌中的诱导表达 | 第37页 |
| ·分子伴侣β亚基突变的纯化 | 第37-38页 |
| ·突变分子伴侣的体外聚合 | 第38-39页 |
| ·分子伴侣CPNB、CPNBA和CPNBD的ATPase活性 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第3章 ATPase活性对于分子伴侣功能的影响 | 第41-47页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·菌株、酶及主要生化试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·培养基和培养条件 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·GFP蛋白的表达纯化 | 第42页 |
| ·分子伴侣折叠变性GFP | 第42页 |
| ·分子伴侣促进CS柠檬酸合酶的折叠 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-46页 |
| ·帮助GFP重新折叠 | 第43-44页 |
| ·提高CS的热稳定性 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 硕士期间发表论文 | 第53-54页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第54页 |