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美洲异源四倍体野生稻中倍增基因的进化与表达差异研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 综述第9-13页
   ·美洲异源四倍体野生稻的分布和形态特征概述第9-10页
   ·多倍体中倍增基因的分子进化第10-11页
   ·异源多倍体中倍增基因的表达第11-12页
   ·研究中存在的问题:第12-13页
第二章 异源四倍体中低拷贝核基因的分子进化第13-42页
 1 引言第13-14页
 2 材料和方法第14-21页
   ·植物材料第14-15页
   ·单拷贝基因的选择第15-16页
   ·实验方法第16-20页
     ·总DNA提取第16-17页
     ·PCR扩增和纯化回收第17-18页
     ·克隆第18-19页
       ·连接第18页
       ·转化第18-19页
       ·提取包含目的片段的质粒DNA第19页
     ·序列测定第19-20页
       ·DNA的测序策略第19-20页
       ·测序方法第20页
   ·数据处理第20-21页
 3 结果第21-39页
   ·总DNA的提取、PCR扩增、质粒酶切和DNA测序第21-22页
   ·三个单拷贝核基因的分子进化分析第22-39页
     ·Lhs1基因序列第22-28页
       ·基因序列特点第22-24页
       ·核苷酸多态性第24-25页
       ·基因谱系第25页
       ·重组、中性进化和核苷酸置换速率第25-28页
     ·Waxy基因序列第28-34页
       ·基因序列特点第28-30页
       ·核苷酸多态性第30页
       ·基因谱系树第30页
       ·重组、中性进化和核苷酸置换速率第30-34页
     ·Gbss Ⅱ基因序列第34-39页
       ·基因序列特点第34页
       ·核苷酸多态性第34-37页
       ·基因谱系第37页
       ·重组、中性进化和核苷酸置换速率第37-39页
 4 讨论第39-42页
   ·稻属CCDD染色体组异源四倍体低水平的核苷酸多样性第39-40页
   ·稻属异源四倍体中C和D染色体组进化动态比较第40-42页
第三章 异源四倍体倍增基因的表达差异研究第42-56页
 1 引言第42-43页
 2 研究方法第43-51页
   ·植物材料和引物设计第43-44页
   ·引物设计第44页
   ·实验流程第44-51页
     ·前期处理去除外源性RNase的污染第44-45页
     ·总RNA的提取第45页
     ·甲醛-变性琼脂糖凝胶电泳第45-46页
     ·除去RNA中的基因组DNA第46页
     ·反转录第46-47页
     ·反转录产物的纯化回收第47-48页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第48页
       ·准备工作见分子克隆指南第48页
       ·制胶方法见分子克隆指南第48页
       ·不同浓度溶液的配制第48页
     ·上样与变性第48页
     ·电泳第48-49页
     ·银染第49页
     ·序列测定第49-51页
 3 结果第51-53页
   ·样品总RNA的提取、RT-PCR扩增第51页
   ·DNA测序结果第51-52页
   ·cDNA-SSCP聚丙烯酰胺凝胶电泳结果第52-53页
   ·幼苗期叶片中5对同源基因的cDNA-SSCP统计结果第53页
 4 讨论第53-56页
   ·倍增基因对异源四倍体转录物的贡献第53-54页
   ·异源多倍体中同源基因沉默机制第54-56页
参考文献第56-63页
读研期间发表的论文第63-64页
致谢第64页

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