| 摘要 | 第1-4页 |
| abstract | 第4-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一章 材料与方法 | 第10-28页 |
| ·仪器、试剂和材料 | 第10-12页 |
| ·主要仪器 | 第10页 |
| ·主要试剂和材料 | 第10-11页 |
| ·常用试剂配制 | 第11-12页 |
| ·实验动物的选择 | 第12页 |
| ·载体的选择 | 第12-14页 |
| ·质粒载体的选择 | 第12-13页 |
| ·T载体的选择 | 第13-14页 |
| ·BHRF1基因的克隆 | 第14-15页 |
| ·BHRF1引物设计 | 第14页 |
| ·B95-8细胞RNA的提取 | 第14-15页 |
| ·RT-PCR扩增BHRF1基因扩增 | 第15页 |
| ·pMD18-T-BHRF1的制备 | 第15-17页 |
| ·BHRF1与pMD18-T载体连接 | 第15-16页 |
| ·BHRF1与pMD18-T连接产物的转化及阳性克隆筛选 | 第16页 |
| ·pMD18-T-BHRF1的PCR鉴定 | 第16页 |
| ·pMD18-T-BHRF1的酶切鉴定 | 第16-17页 |
| ·pMD18-T-BHRF1的测序鉴定 | 第17页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1重组质粒的制备 | 第17-18页 |
| ·BHRF1与pcDNA3.1质粒载体连接 | 第17-18页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1连接产物的转化及阳性克隆筛选 | 第18页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1重组质粒的PCR鉴定 | 第18页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1重组质粒的酶切鉴定 | 第18页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1重组质粒的测序鉴定 | 第18页 |
| ·大量制备pcDNA3.1-BHRF1重组质粒 | 第18页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1重组质粒酶切及溶解 | 第18-20页 |
| ·供体小鼠的准备及显微注射 | 第20-25页 |
| ·雄鼠的结扎 | 第21页 |
| ·超排小鼠的准备 | 第21-22页 |
| ·采集受精卵 | 第22页 |
| ·显微注射 | 第22-25页 |
| ·受精卵的输卵管移植 | 第25-27页 |
| ·取出输卵管 | 第25-26页 |
| ·准备移植胚胎 | 第26页 |
| ·移植前对胚胎的鉴定 | 第26页 |
| ·输卵管移植 | 第26-27页 |
| ·复苏 | 第27页 |
| ·首建鼠PCR鉴定 | 第27-28页 |
| ·鼠尾DNA提取 | 第27页 |
| ·首建鼠DNA PCR检测 | 第27-28页 |
| 第二章 结果 | 第28-34页 |
| ·BHRF1基因扩增及重组质粒构建 | 第28-32页 |
| ·RT-PCR扩增BHRF1基因 | 第28页 |
| ·pMD18-T-BHRF1载体的酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·pMD18-T-BHRF1载体的测序结果 | 第29页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1重组质粒的构建 | 第29-30页 |
| ·pcDNA3.1-BHRF1重组质粒的测序结果 | 第30-32页 |
| ·显微注射DNA片段的制备 | 第32页 |
| ·显微注射和胚胎移植 | 第32页 |
| ·PCR检测 | 第32-34页 |
| 第三章 讨论 | 第34-42页 |
| ·EBV早期基因BHRF1的研究 | 第34-36页 |
| ·BHRF1基因及BHRF1蛋白的结构 | 第34-35页 |
| ·BHRF1与Bcl-2的同源性 | 第35页 |
| ·EBV早期基因BHRF1的功能 | 第35-36页 |
| ·转基因小鼠基本原理 | 第36-37页 |
| ·影响基因转移效率的因素 | 第37-40页 |
| ·DNA的结构与纯度 | 第38页 |
| ·溶解DNA的缓冲液与DNA的浓度 | 第38页 |
| ·显微注射和受精卵移植 | 第38-40页 |
| ·关于目的基因的整合及检测 | 第40-42页 |
| 第四章 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 综述 | 第45-67页 |
| 综述参考文献 | 第63-67页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
