| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-34页 |
| ·燃料乙醇生产概况 | 第13-16页 |
| ·工业乙醇生产 | 第14-15页 |
| ·发酵法生产乙醇 | 第15-16页 |
| ·酿酒酵母菌株改造的遗传操作策略 | 第16-21页 |
| ·随机诱变 | 第17-18页 |
| ·进化工程 | 第18页 |
| ·代谢工程 | 第18-19页 |
| ·有性重组 | 第19页 |
| ·基因组重排 | 第19-21页 |
| ·全局转录因子及整体转录系统工程 | 第21-24页 |
| ·转录因子SPT15 | 第21-22页 |
| ·转录因子SPT3 | 第22页 |
| ·整体转录系统工程（gTME） | 第22-24页 |
| ·酿酒酵母基因组、交配型及染色体倍数 | 第24-31页 |
| ·酿酒酵母基因组 | 第24-25页 |
| ·酿酒酵母交配型 | 第25-26页 |
| ·HO 基因 | 第26-28页 |
| ·多倍体酿酒酵母 | 第28-31页 |
| ·芬苯达唑及非整倍体酿酒酵母 | 第31页 |
| ·本文的研究背景、内容及目的 | 第31-34页 |
| ·研究背景 | 第31-32页 |
| ·主要研究内容及目的 | 第32-34页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第34-60页 |
| ·实验材料 | 第34-43页 |
| ·质粒、菌种及引物 | 第34-36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37-39页 |
| ·酶制剂 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-41页 |
| ·主要溶液 | 第41-43页 |
| ·主要基因操作方法 | 第43-55页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·大肠杆菌转化（CaC1_2 法） | 第43-44页 |
| ·电转化法 | 第44页 |
| ·小规模提取大肠杆菌质粒法（CTAB 法） | 第44-45页 |
| ·PCR 反应 | 第45-46页 |
| ·定点突变方法 | 第46-48页 |
| ·DNA 片段回收纯化 | 第48页 |
| ·酶切反应 | 第48-49页 |
| ·DNA 连接反应 | 第49页 |
| ·DNA 纯化 | 第49-50页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第50页 |
| ·酵母细胞转化 | 第50-51页 |
| ·酵母染色体快速分离 | 第51页 |
| ·酵母等位基因分离及遗传分析 | 第51-53页 |
| ·不同交配型酵母细胞之间的杂交 | 第53页 |
| ·验证酵母交配型 | 第53-54页 |
| ·MBC 处理方法 | 第54页 |
| ·酵母EMS 诱变 | 第54-55页 |
| ·酵母高效产孢法 | 第55页 |
| ·孢子纯化方法 | 第55页 |
| ·发酵过程的准备及主要分析方法 | 第55-60页 |
| ·发酵培养基制备 | 第55-56页 |
| ·菌种扩大培养与接种 | 第56页 |
| ·发酵样品的收集及细胞生长状态的测定 | 第56-57页 |
| ·还原糖的测定（DNS 法） | 第57-58页 |
| ·乙醇的测定 | 第58-59页 |
| ·抗性分析 | 第59-60页 |
| 第三章 多倍体与非整倍体酿酒酵母菌株的构建及发酵特性研究 | 第60-79页 |
| ·酿酒酵母发酵后期的影响因素 | 第60-63页 |
| ·酿酒酵母的乙醇发酵 | 第60-61页 |
| ·酿酒酵母发酵后期的影响因素 | 第61-63页 |
| ·质粒YCplac33-GHK 的构建 | 第63-64页 |
| ·多倍体酵母菌株的构建 | 第64-68页 |
| ·多倍体酵母菌株的构建 | 第64-68页 |
| ·多倍体细胞的形态大小 | 第68页 |
| ·非整倍体酵母菌株的构建 | 第68-70页 |
| ·多倍体及非整倍体酵母菌株乙醇发酵 | 第70-75页 |
| ·多倍体酵母菌株乙醇发酵 | 第70-73页 |
| ·非整倍体酵母菌株乙醇发酵 | 第73-75页 |
| ·实验结果分析 | 第75-77页 |
| ·重组菌株对乙醇及高渗透压的抗性分析 | 第75-77页 |
| ·实验结果分析 | 第77页 |
| ·本章小结 | 第77-79页 |
| 第四章 全局转录因子调控对乙醇发酵的影响 | 第79-90页 |
| ·质粒的构建 | 第79-85页 |
| ·质粒YEplac195-SPT15-SPT3 的构建 | 第79-81页 |
| ·质粒pUC18-spt15 的构建 | 第81-83页 |
| ·质粒YEplac195-spt15-SPT3 的构建 | 第83页 |
| ·质粒YEplac195-spt15 的构建 | 第83页 |
| ·质粒YEplac195-SPT15 的构建 | 第83-84页 |
| ·质粒YEplac195-SPT3 的构建 | 第84-85页 |
| ·菌株的构建 | 第85页 |
| ·乙醇发酵 | 第85-86页 |
| ·实验结果分析 | 第86-89页 |
| ·重组菌株对高渗透压及乙醇的抗性分析 | 第86-88页 |
| ·实验结果分析 | 第88-89页 |
| ·本章小结 | 第89-90页 |
| 第五章 采用基因组重排技术改造酿酒酵母菌株及其乙醇发酵特性的研究 | 第90-103页 |
| ·EMS 最佳剂量的确定 | 第90-92页 |
| ·原始突变群体的获得 | 第92-93页 |
| ·选择平板 | 第92页 |
| ·EMS 诱变 | 第92-93页 |
| ·基因组重排 | 第93-96页 |
| ·第一轮基因组重排 | 第93-94页 |
| ·第二轮基因组重排 | 第94-95页 |
| ·第三轮基因组重排 | 第95-96页 |
| ·乙醇发酵 | 第96-100页 |
| ·实验结果分析 | 第100-101页 |
| ·重组菌株对高渗透压及乙醇的抗性分析 | 第100-101页 |
| ·实验结果分析 | 第101页 |
| ·本章小结 | 第101-103页 |
| 第六章 总结与展望 | 第103-108页 |
| ·主要研究工作总结 | 第103-105页 |
| ·主要创新点 | 第105-106页 |
| ·相关工作的前景展望 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-120页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文和参加科研情况 | 第120-121页 |
| 附录 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
