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东方山羊豆盐胁迫下抑制差减杂交文库的构建和分析及Ca2+/H+反向转运体基因的克隆

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 绪论第11-19页
   ·盐胁迫对植物的影响第11-12页
     ·盐胁迫对离子分布的影响第11页
     ·盐胁迫对光合作用影响第11页
     ·盐胁迫对渗透调节物质积累的影响第11-12页
     ·盐胁迫对活性氧代谢和细胞质膜透性的影响第12页
   ·植物耐盐机理第12-13页
     ·渗透调节物质的累积第12页
     ·离子区域化第12页
     ·维护膜系统的完整性第12页
     ·大分子蛋白的积累第12-13页
   ·植物耐盐相关基因第13页
     ·与活性氧解毒相关的酶基因第13页
     ·与水分胁迫相关的基因第13页
     ·与渗透胁迫信号转导有关的基因第13页
     ·与渗透保护物质合成有关的基因第13页
   ·Ca~(2+)/H~+逆向转运蛋白研究进展第13-14页
   ·东方山羊豆研究现状第14-15页
   ·抑制性差减杂交技术第15-18页
     ·SSH 操作流程第15-16页
     ·SSH 技术的特点及应用第16-18页
   ·本研究的目的及意义第18-19页
第二章 东方山羊豆盐诱导抑制差减杂交cDNA 文库的构建第19-34页
   ·材料第19页
   ·试剂和仪器第19-20页
     ·主要化学试剂第19页
     ·试剂盒第19页
     ·主要仪器设备第19-20页
     ·菌株及克隆载体第20页
     ·溶液的配制第20页
   ·实验方法第20-28页
     ·总RNA 提取与mRNA 的分离、纯化第20-21页
     ·文库构建第21-26页
     ·PCR 产物的纯化第26-27页
     ·消减文库生成第27页
     ·连接产物的转化第27页
     ·重组子的鉴定第27-28页
     ·保存文库第28页
     ·文库质量分析第28页
   ·结果与分析第28-32页
     ·总RNA 以及mRNA 的质量分析和酶切效率检测第28-30页
     ·消减产物第二次PCR 结果第30-31页
     ·Actin 检测消减效率第31页
     ·抑制消减cDNA 文库的扩增及初步鉴定第31-32页
     ·消减文库质量鉴定分析第32页
   ·讨论第32-34页
第三章 文库中EST 片段的生物信息学分析第34-40页
   ·方法第34页
     ·测序第34页
     ·载体和接头序列的去除第34页
     ·聚类和拼接第34页
     ·序列同源性比对及基因功能分类第34页
   ·结果第34-38页
     ·序列聚类拼接及BLAST 和SWISS-PROT 数据库比对结果第34-37页
     ·GO 分类第37页
     ·COG 分析第37-38页
   ·讨论第38-40页
第四章 Ca~(2+)/H~+逆向转运蛋白基因的克隆及生物信息学分析第40-53页
   ·第40页
     ·材料第40页
     ·试剂盒第40页
     ·其他常有试剂盒仪器同前第40页
   ·方法第40-42页
     ·反转录合成cDNA第40-41页
     ·引物设计第41页
     ·分别扩增5′和3′序列第41页
     ·ORF 序列扩增第41-42页
     ·序列分析第42页
     ·RT-PCR 分析东方山羊豆中GoCAX 基因表达特性第42页
   ·结果与分析第42-52页
     ·GoCAX 基因3'端cDNA 的克隆第42-43页
     ·GoCAX 基因5'端cDNA 的克隆第43页
     ·GoCAX 基因ORF 扩增第43-45页
     ·GoCAX 基因生物信息学分析第45-52页
   ·讨论第52-53页
第五章 结论和展望第53-54页
   ·主要结论第53页
   ·后续工作展望第53-54页
参考文献第54-58页
附录第58-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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