| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| ·盐胁迫对植物的影响 | 第11-12页 |
| ·盐胁迫对离子分布的影响 | 第11页 |
| ·盐胁迫对光合作用影响 | 第11页 |
| ·盐胁迫对渗透调节物质积累的影响 | 第11-12页 |
| ·盐胁迫对活性氧代谢和细胞质膜透性的影响 | 第12页 |
| ·植物耐盐机理 | 第12-13页 |
| ·渗透调节物质的累积 | 第12页 |
| ·离子区域化 | 第12页 |
| ·维护膜系统的完整性 | 第12页 |
| ·大分子蛋白的积累 | 第12-13页 |
| ·植物耐盐相关基因 | 第13页 |
| ·与活性氧解毒相关的酶基因 | 第13页 |
| ·与水分胁迫相关的基因 | 第13页 |
| ·与渗透胁迫信号转导有关的基因 | 第13页 |
| ·与渗透保护物质合成有关的基因 | 第13页 |
| ·Ca~(2+)/H~+逆向转运蛋白研究进展 | 第13-14页 |
| ·东方山羊豆研究现状 | 第14-15页 |
| ·抑制性差减杂交技术 | 第15-18页 |
| ·SSH 操作流程 | 第15-16页 |
| ·SSH 技术的特点及应用 | 第16-18页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 东方山羊豆盐诱导抑制差减杂交cDNA 文库的构建 | 第19-34页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·试剂和仪器 | 第19-20页 |
| ·主要化学试剂 | 第19页 |
| ·试剂盒 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·菌株及克隆载体 | 第20页 |
| ·溶液的配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·总RNA 提取与mRNA 的分离、纯化 | 第20-21页 |
| ·文库构建 | 第21-26页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第26-27页 |
| ·消减文库生成 | 第27页 |
| ·连接产物的转化 | 第27页 |
| ·重组子的鉴定 | 第27-28页 |
| ·保存文库 | 第28页 |
| ·文库质量分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·总RNA 以及mRNA 的质量分析和酶切效率检测 | 第28-30页 |
| ·消减产物第二次PCR 结果 | 第30-31页 |
| ·Actin 检测消减效率 | 第31页 |
| ·抑制消减cDNA 文库的扩增及初步鉴定 | 第31-32页 |
| ·消减文库质量鉴定分析 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 文库中EST 片段的生物信息学分析 | 第34-40页 |
| ·方法 | 第34页 |
| ·测序 | 第34页 |
| ·载体和接头序列的去除 | 第34页 |
| ·聚类和拼接 | 第34页 |
| ·序列同源性比对及基因功能分类 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-38页 |
| ·序列聚类拼接及BLAST 和SWISS-PROT 数据库比对结果 | 第34-37页 |
| ·GO 分类 | 第37页 |
| ·COG 分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 Ca~(2+)/H~+逆向转运蛋白基因的克隆及生物信息学分析 | 第40-53页 |
| · | 第40页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂盒 | 第40页 |
| ·其他常有试剂盒仪器同前 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-42页 |
| ·反转录合成cDNA | 第40-41页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·分别扩增5′和3′序列 | 第41页 |
| ·ORF 序列扩增 | 第41-42页 |
| ·序列分析 | 第42页 |
| ·RT-PCR 分析东方山羊豆中GoCAX 基因表达特性 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-52页 |
| ·GoCAX 基因3'端cDNA 的克隆 | 第42-43页 |
| ·GoCAX 基因5'端cDNA 的克隆 | 第43页 |
| ·GoCAX 基因ORF 扩增 | 第43-45页 |
| ·GoCAX 基因生物信息学分析 | 第45-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 结论和展望 | 第53-54页 |
| ·主要结论 | 第53页 |
| ·后续工作展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |