| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 绪论 | 第10-15页 |
| ·盐酸克伦特罗简介 | 第10-11页 |
| ·盐酸克伦特罗理化性质 | 第10页 |
| ·盐酸克伦特罗的毒理性质 | 第10-11页 |
| ·盐酸克伦特罗的主要检测方法 | 第11-12页 |
| ·酶联免疫吸附分析方法介绍 | 第12-13页 |
| ·酶联免疫吸附分析方法原理 | 第12页 |
| ·酶联免疫吸附分析技术在药残检测的应用 | 第12-13页 |
| ·胶体金快速免疫层析技术介绍 | 第13-15页 |
| ·胶体金快速免疫层析技术原理 | 第13页 |
| ·胶体金免疫层析技术在药残检测的应用 | 第13-15页 |
| 2 盐酸克伦特罗完全抗原的制备 | 第15-21页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要溶液的配制 | 第15-16页 |
| ·方法 | 第16-17页 |
| ·CL的偶氮化 | 第16页 |
| ·偶氮化CL与载体蛋白的偶联 | 第16页 |
| ·紫外分光光度计法鉴定CL-BSA人工抗原 | 第16页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定CL-BSA人工抗原 | 第16页 |
| ·抗CL血清的制备 | 第16页 |
| ·间接ELISA操作步骤 | 第16-17页 |
| ·棋盘法优化抗原CL-OVA最佳包被浓度 | 第17页 |
| ·结果 | 第17-19页 |
| ·CL的偶氮化及偶氮化CL与载体蛋白的偶联 | 第17页 |
| ·紫外扫描分析 | 第17-18页 |
| ·偶联物的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第18页 |
| ·间接ELISA检测结果分析 | 第18页 |
| ·棋盘法优化抗原CL-OVA的最佳包被浓度 | 第18-19页 |
| ·讨论 | 第19-20页 |
| ·本章小结 | 第20-21页 |
| 3 盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·主要设备 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·免疫动物 | 第23-24页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第24页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第24页 |
| ·免疫细胞的制备 | 第24页 |
| ·细胞融合流程 | 第24-25页 |
| ·抗体的检测 | 第25页 |
| ·有限稀释法筛选阳性细胞克隆 | 第25页 |
| ·阳性孔细胞克隆株的冻存与复苏 | 第25页 |
| ·腹水的制备 | 第25-26页 |
| ·单克隆抗体的提纯 | 第26页 |
| ·单抗效价的测定 | 第26页 |
| ·单克隆抗体亚型鉴定 | 第26页 |
| ·McAb的交叉反应性 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-29页 |
| ·免疫小鼠血清效价测定结果 | 第26-27页 |
| ·融合细胞的筛选结果 | 第27页 |
| ·腹水制备及腹水效价检测 | 第27-28页 |
| ·单克隆抗体的提纯 | 第28页 |
| ·McAb的Ig亚型鉴定 | 第28页 |
| ·单克隆抗体交叉反应分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 4 盐酸克伦特罗ELISA检测方法的研究 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·最佳抗体工作浓度的确定 | 第31页 |
| ·CL-OVA包被缓冲液的优化 | 第31-32页 |
| ·CL-OVA包被方式优化(包被温度和时间) | 第32页 |
| ·封闭液筛选 | 第32页 |
| ·最佳竞争反应时间和反应时间的确定 | 第32页 |
| ·线性范围和灵敏度的确定 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·最佳单抗工作浓度的确定 | 第32-33页 |
| ·最佳包被缓冲液的确定 | 第33页 |
| ·CL-OVA包被方式的确定 | 第33页 |
| ·封闭液的选择 | 第33-34页 |
| ·最佳竞争反应时间和反应温度的确定 | 第34页 |
| ·线性范围和灵敏度的确定 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 5 盐酸克伦特罗胶体金免疫层析检测方法的研究 | 第37-48页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| ·胶体金的制备 | 第37页 |
| ·金标抗体的制备 | 第37-38页 |
| ·金标抗体的鉴定 | 第38页 |
| ·结合垫、样品垫的预处理 | 第38页 |
| ·喷涂 | 第38页 |
| ·胶体金免疫测试条的组装 | 第38页 |
| ·胶体金颗粒大小的选择 | 第38-39页 |
| ·待标记抗体最低稳定量的选择 | 第39页 |
| ·抗体标记过程中缓冲液的选择 | 第39页 |
| ·金标抗体稳定剂的选择 | 第39页 |
| ·结合垫处理液的选择 | 第39-40页 |
| ·样品垫处理液的优化 | 第40页 |
| ·样品的检测 | 第40-41页 |
| ·灵敏度试验 | 第41页 |
| ·特异性试验 | 第41页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条稳定性研究 | 第41页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条重复性研究 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-46页 |
| ·胶体金颗粒大小的选择 | 第41-42页 |
| ·待标记抗体试剂稳定量的确定 | 第42页 |
| ·抗体标记过程中缓冲液的选择 | 第42页 |
| ·抗体稳定剂的选择 | 第42页 |
| ·结合垫处理液的选择 | 第42页 |
| ·样品垫处理液的选择 | 第42页 |
| ·灵敏度试验 | 第42-43页 |
| ·特异性试验 | 第43页 |
| ·金标免疫层析试纸条稳定性研究 | 第43-45页 |
| ·金标免疫层析试纸条重复性研究 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |