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Gabra-3基因A至ⅠRNA编辑位点的鉴定及其分子机制的研究

致谢第1-3页
摘要第3-5页
Abstract第5-10页
缩略语表第10-12页
第一章 文献综述第12-30页
   ·RNA编辑的研究进展第12-24页
     ·各种机制作用下的RNA编辑第12-17页
       ·锥体虫细胞质中的RNA编辑第12-13页
       ·原生动物tRNA的编辑第13页
       ·胞嘧啶脱氨基酶介导的哺乳动物载脂蛋白BC至U的RNA编辑第13页
       ·腺苷酸脱氨基酶介导的高等动物A至I的RNA编辑第13-17页
     ·参与RNA编辑的相关酶第17-20页
       ·RNA编辑酶的结构特征第17-19页
       ·ADARs对编辑位点的选择第19-20页
     ·RNA编辑的功能第20-23页
       ·调节疾病相关基因的表达第20-21页
       ·调节基因的选择性剪切第21页
       ·调节microRNA的合成过程以及改变其沉默靶基因第21-22页
       ·RNA编辑与RNA干涉(RNA interference,RNAi)途径的相互交叉第22页
       ·其它重要功能第22-23页
     ·定性及定量分析RNA编辑效率第23-24页
       ·从测序图谱对A/G进行定性分析第23页
       ·利用限制性内切酶进行酶切定量分析第23-24页
       ·克隆测序定量分析编辑效率第24页
       ·引物延伸实验对编辑效率进行定量分析第24页
   ·非洲爪蟾卵母细胞表达系统第24-26页
     ·非洲爪蟾卵母细胞特点及其生物学优势第25页
     ·非洲爪蟾卵母细胞表达体系的用途第25-26页
   ·实验方案设计第26-30页
     ·研究目的与意义第26-27页
     ·研究内容第27-28页
     ·技术路线第28-30页
第二章 Gabra-3基因RNA编辑位点的鉴定及系统进化分析第30-50页
   ·材料与方法第30-41页
     ·所用数据库及计算软件第30页
     ·实验材料、试剂及仪器第30-41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·Gabra-3基因I/M编辑位点的鉴定第41-42页
     ·Gabra-3基因RNA编辑的组织特异性分析第42-48页
   ·讨论第48-50页
第三章 Gabra-3基因A至I RNA编辑的分子机制第50-79页
   ·材料与方法第51-58页
     ·所用数据库及计算软件第51页
     ·实验材料、试剂及仪器第51-58页
   ·结果与分析第58-75页
     ·GABAA受体基因I/M位点的系统进化分析第58-61页
     ·Gabra-3基因编辑靶序列的RNA茎环结构模型第61-62页
     ·非洲爪蟾卵母细胞编辑系统检测突变体的I/M位点第62-63页
     ·薄层层析实验检测突变体I/M位点的编辑第63-64页
     ·RNA茎环结构不同区的突变对编辑的影响第64-66页
     ·编辑位点临近序列对Gabra-3基因编辑的影响第66-67页
     ·删除突变探索茎Ⅱ对编辑的重要性第67-70页
     ·RNA茎环结构中可变区对编辑发生的影响第70-75页
   ·讨论第75-79页
第四章 Gabra迷你基因RNA二级结构的分析第79-89页
   ·材料与方法第79-82页
     ·实验材料、试剂及仪器第79-82页
   ·结果与分析第82-87页
     ·Gabra迷你基因RNA二级结构的分析第82-87页
   ·讨论第87-89页
第五章 温度调控RNA分子结构从而激活编辑系统第89-100页
   ·材料与方法第89-92页
     ·所用数据库及计算软件第89页
     ·实验材料、试剂及仪器第89-92页
   ·结果与分析第92-98页
     ·28℃条件下五种Gabra迷你基因I/M位点的编辑检测第92-94页
     ·33℃条件下五种Gabra迷你基因I/M位点的编辑检测第94-95页
     ·37℃条件下五种Gabra迷你基因I/M位点都能够发生编辑第95-97页
     ·25℃、37℃折叠后RNA结构的差异第97-98页
   ·讨论第98-100页
第六章 小鼠Gabra-3与EGFP融合基因RNA编辑的检测第100-107页
   ·材料与方法第100-103页
     ·实验材料、试剂及仪器第100-101页
     ·小鼠Gabr3a迷你基因的扩增第101页
     ·EGFP基因的扩增以及起始密码子的删除突变第101页
     ·EGFP基因与小鼠Gabar-3基因片段的重组载体的构建第101-102页
     ·小鼠Gabra-3基因片段与EGFP的融合载体的非洲爪蟾卵母细胞核注射第102-103页
   ·构建以及实验流程第103页
   ·结果与分析第103-105页
     ·小鼠Gabra-3与EGFP融合基因RNA编辑的检测第103-105页
   ·讨论第105-107页
第七章 RNA编辑对小鼠GABAA电生理特性的影响第107-113页
   ·材料与方法第107-110页
     ·实验材料、试剂及仪器第107-108页
     ·GABAA受体重组载体的构建第108页
     ·GABAA受体重组载体的转染第108-109页
     ·全细胞电压钳电生理记录以及给药实验步骤第109-110页
   ·结果与分析第110-111页
     ·RNA编辑对小鼠GABAA受体电生理特性的影响第110-111页
   ·讨论第111-113页
第八章 结论、创新性以及展望第113-116页
   ·结论、创新性第113-114页
   ·展望第114-116页
参考文献第116-132页
附表第132-137页
攻读博士期间的研究成果第137-138页
作者简介第138页

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