| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第14-27页 |
| 1.1 RLRS模式识别受体研究进展 | 第14-17页 |
| 1.1.1 维甲酸诱导基因Ⅰ | 第15-16页 |
| 1.1.2 黑色素瘤分化相关因子5 | 第16-17页 |
| 1.1.3 遗传学和生理学实验室蛋白2 | 第17页 |
| 1.2 口蹄疫简介 | 第17-22页 |
| 1.2.1 口蹄疫病毒基因组结构特征 | 第18-19页 |
| 1.2.2 口蹄疫病毒的前体蛋白酶 | 第19页 |
| 1.2.3 口蹄疫病毒的结构蛋白 | 第19-20页 |
| 1.2.4 口蹄疫病毒的非结构蛋白 | 第20-22页 |
| 1.3 口蹄疫病毒拮抗宿主的抗病毒反应 | 第22-25页 |
| 1.3.1 FMDV的前体蛋白在免疫逃逸中的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.3.2 FMDV的结构蛋白在免疫逃逸中的研究进展 | 第24页 |
| 1.3.3 FMDV的非结构蛋白在免疫逃逸中的研究进展 | 第24-25页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 口蹄疫病毒2B蛋白抑制Ⅰ型干扰素相关因子的转录激活 | 第27-43页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-35页 |
| 2.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂和耗材 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第28页 |
| 2.1.4 相关溶液和试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.1.5 重组质粒的构建 | 第29-32页 |
| 2.1.6 重组质粒的表达鉴定 | 第32-33页 |
| 2.1.7 反转录实时定量PCR检测2B蛋白对IFN-β、IL-6、ISG15 转录的影响 | 第33-34页 |
| 2.1.8 双荧光素酶报告实验检测2B蛋白对IFN-β、NF-κB、ISRE启动子的影响 | 第34-35页 |
| 2.1.9 重组表达质粒的剂量依赖性检测 | 第35页 |
| 2.2 实验结果 | 第35-41页 |
| 2.2.1 pEGFP-C1-2B重组质粒的构建 | 第35-36页 |
| 2.2.2 重组质粒的表达鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.3 FMDV2B抑制由Poly(I:C)或SeV介导的IFN-β、IL-6、ISG15转录水平 | 第37-38页 |
| 2.2.4 FMDV2B抑制由Poly(I:C)或SeV介导的IFN-β、NF-κB、SRE启动子的激活 | 第38-39页 |
| 2.2.5 HEK293T细胞中Poly(I:C)介导的Ⅰ型干扰素与pEGFP-C1-2B转染剂量负相关 | 第39-40页 |
| 2.2.6 HEK293T细胞中SeV介导的Ⅰ型干扰素与pEGFP-C1-2B转染剂量负相关 | 第40-41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 口蹄疫病毒2B蛋白对RLRS通路的抑制作用研究 | 第43-59页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-51页 |
| 3.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第43页 |
| 3.1.2 主要试剂和耗材 | 第43-44页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第44页 |
| 3.1.4 相关溶液和试剂的配制 | 第44页 |
| 3.1.5 RLR通路基因重组质粒的构建 | 第44-47页 |
| 3.1.6 FMDV2B对TBK1和IRF3磷酸化的影响 | 第47-48页 |
| 3.1.7 FMDV2B对外源性RLRs通路分子表达的影响 | 第48页 |
| 3.1.8 FMDV2B对内源性RLRs通路分子表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.1.9 免疫共沉淀检测FMDV2B与外源性RLRs通路分子的相互作用 | 第49-50页 |
| 3.1.10 Pull-Down检测FMDV2B与内源性RLRs通路分子的相互作用 | 第50-51页 |
| 3.2 实验结果 | 第51-57页 |
| 3.2.1 RLRs通路重组质粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.2.2 FMDV2B抑制TBK1和IRF3的磷酸化 | 第52页 |
| 3.2.3 FMDV2B抑制外源性RIG-Ⅰ和MDA5的表达 | 第52-53页 |
| 3.2.4 FMDV2B抑制内源性RIG-Ⅰ和MDA5的表达 | 第53-55页 |
| 3.2.5 FMDV2B与外源性RIG-Ⅰ和MDA5发生相互作用 | 第55-56页 |
| 3.2.6 FMDV2B与内源性RIG-Ⅰ和MDA5发生相互作用 | 第56-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 口蹄疫病毒3B蛋白对RLRS通路调控的初步研究 | 第59-74页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59-66页 |
| 4.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第59页 |
| 4.1.2 主要试剂和耗材 | 第59-60页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第60页 |
| 4.1.4 相关溶液和试剂的配制 | 第60页 |
| 4.1.5 重组质粒的构建 | 第60-63页 |
| 4.1.6 重组质粒的表达鉴定 | 第63页 |
| 4.1.7 反转录实时定量PCR检测3B蛋白对IFN-β、IL-6、ISG15 转录的影响 | 第63-64页 |
| 4.1.8 双荧光素酶实验检测3B蛋白对IFN-β、NF-κB、ISRE启动子的影响 | 第64-65页 |
| 4.1.9 FMDV3B调节RLR信号通路靶向分子的初步鉴定 | 第65页 |
| 4.1.10 FMDV3B对 RLR通路分子mRNA表达的影响 | 第65页 |
| 4.1.11 FMDV3B1/3B2/3B3蛋白对IFN-β、NF-κB、ISRE启动子的影响 | 第65-66页 |
| 4.2 实验结果 | 第66-72页 |
| 4.2.1 pEGFP-C1-3B和pEGFP-C1-3B1/3B2/3B3重组质粒的构建 | 第66页 |
| 4.2.2 重组质粒的表达鉴定 | 第66-67页 |
| 4.2.3 FMDV3B抑制由Poly(I:C)或SeV介导的IFN-β、IL-6、ISG15 转录水平 | 第67-68页 |
| 4.2.4 FMDV3B抑制由Poly(I:C)或SeV介导的IFN-β、NF-κB、ISRE启动子的激活 | 第68-69页 |
| 4.2.5 FMDV3B在 RIG-Ⅰ和MDA5水平调节RLRs通路 | 第69-70页 |
| 4.2.6 FMDV3B抑制RIG-Ⅰ和MDA5分子mRNA的表达 | 第70-71页 |
| 4.2.7 FMDV 3B1/3B2/3B3 蛋白均能抑制IFN-β、NF-κB、ISRE启动子的激活 | 第71-72页 |
| 4.3 讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 全文结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
