中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
前言 | 第13-16页 |
研究现状、成果 | 第13-15页 |
研究目的、方法 | 第15-16页 |
一、miR-99b-5p调控mTOR信号通路修复脊髓损伤的体外研究 | 第16-29页 |
1.1 对象和方法 | 第16-24页 |
1.1.1 主要实验设备与试剂 | 第16-17页 |
1.1.2 脊髓运动神经元的分离、培养 | 第17-18页 |
1.1.3 脊髓损伤神经元的制备 | 第18页 |
1.1.4 脊髓运动神经元的鉴定 | 第18-19页 |
1.1.5 荧光实时定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR) | 第19-20页 |
1.1.6 细胞凋亡分析 | 第20页 |
1.1.7 双荧光素酶检测分析 | 第20-21页 |
1.1.8 免疫荧光染色 | 第21页 |
1.1.9 免疫印迹实验 | 第21-24页 |
1.1.10 统计学处理 | 第24页 |
1.2 结果 | 第24-26页 |
1.2.1 培养神经元形态及鉴定 | 第24-25页 |
1.2.2 荧光实时定量PCR结果 | 第25页 |
1.2.3 双荧光素酶检测分析结果 | 第25页 |
1.2.4 细胞凋亡分析结果 | 第25页 |
1.2.5 免疫荧光染色结果 | 第25页 |
1.2.6 免疫印迹实验结果 | 第25-26页 |
1.3 讨论 | 第26-28页 |
1.3.1 miR-99b-5p与脊髓损伤的关系 | 第26页 |
1.3.2 miR-99b-5p与mTOR的关系 | 第26-27页 |
1.3.3 miR-99b-5p抑制剂与脊髓损伤的修复之间的关系 | 第27页 |
1.3.4 miR-99b-5p抑制剂作用于mTOR产生的变化 | 第27-28页 |
1.4 小结 | 第28-29页 |
二、miR-99b-5p调控mTOR信号通路修复脊髓损伤的体内研究 | 第29-41页 |
2.1 对象和方法 | 第29-35页 |
2.1.1 主要实验设备与试剂 | 第29-31页 |
2.1.2 实验动物分组 | 第31页 |
2.1.3 小鼠脊髓损伤模型制备 | 第31-33页 |
2.1.3.1 实验动物的麻醉 | 第31-32页 |
2.1.3.2 暴露小鼠脊髓组织 | 第32页 |
2.1.3.3 制备脊髓损伤模型 | 第32页 |
2.1.3.4 术后护理 | 第32-33页 |
2.1.4 运动功能评分(BMS评分) | 第33页 |
2.1.5 脊髓组织的取材与石蜡切片制备 | 第33-34页 |
2.1.5.1 脊髓损伤组织灌注及取材 | 第33页 |
2.1.5.2 脊髓损伤组织包埋与石蜡切片制备 | 第33-34页 |
2.1.6 免疫组织化学染色 | 第34-35页 |
2.1.7 蛋白质印迹分析 | 第35页 |
2.1.8 图像采集和数据分析 | 第35页 |
2.2 结果 | 第35-37页 |
2.2.1 BMS评分 | 第35-36页 |
2.2.2 免疫组化 | 第36-37页 |
2.2.2.1 GFAP染色结果 | 第36页 |
2.2.2.2 NeuN染色结果 | 第36-37页 |
2.2.2.3 NF-200染色结果 | 第37页 |
2.2.2.4 Nestin染色结果 | 第37页 |
2.2.3 蛋白质印迹分析结果 | 第37页 |
2.3 讨论 | 第37-40页 |
2.3.1 脊髓损伤动物模型的建立及行为学评分 | 第38页 |
2.3.2 miR-99b-5p抑制剂对脊髓损伤的修复作用 | 第38-39页 |
2.3.3 miR-99b-5p抑制剂对Akt/mTOR/STAT3信号通路的作用 | 第39-40页 |
2.4 小结 | 第40-41页 |
全文结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-51页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第51-52页 |
附录 | 第52-59页 |
综述 中国脊髓损伤的流行病学研究进展 | 第59-73页 |
综述参考文献 | 第66-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
个人简历 | 第74页 |