致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
文献综述 | 第12-16页 |
1 草莓镶脉病毒研究现状 | 第12-13页 |
1.1 草莓镶脉病毒主要特性及发生地区 | 第12页 |
1.2 草莓镶脉病毒的全基因组及编码的蛋白和功能 | 第12页 |
1.3 SVBV的研究情况 | 第12-13页 |
2 在细胞间移动蛋白介导病毒运动的机制 | 第13-14页 |
2.1 病毒移动蛋白与植物蛋白的互作 | 第13-14页 |
2.2 利用酵母双杂交系统筛选与SVBV P1蛋白互作的寄主因子 | 第14页 |
3 叶绿素a/b结合蛋白(LHC Ⅱ)的结构及生物学功能 | 第14-16页 |
3.1 叶绿体蛋白参与病毒侵染过程 | 第15-16页 |
引言 | 第16-17页 |
材料和方法 | 第17-22页 |
1 材料 | 第17页 |
1.1 病毒材料来源 | 第17页 |
1.2 模式植物 | 第17页 |
1.3 菌种 | 第17页 |
1.4 载体和质粒 | 第17页 |
1.5 酶和常用试剂 | 第17页 |
2 试验方法 | 第17-22页 |
2.1 带毒草莓叶片总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.2 目的片段的PCR扩增 | 第18页 |
2.3 PCR产物回收 | 第18页 |
2.4 载体构建 | 第18-20页 |
2.5 免疫共沉淀(pull-down)验证P1与LHC Ⅱ互作 | 第20-21页 |
2.6 免疫共沉淀(Co-IP)验证P1与LHC Ⅱ互作(invivo) | 第21-22页 |
结果与分析 | 第22-33页 |
1 利用酵母双杂交系统筛选与SVBVP1蛋白互作的寄主因子 | 第22-24页 |
1.1 P1蛋白的毒性和自激活的检测 | 第22页 |
1.2 阳性酵母菌株的筛选 | 第22-23页 |
1.3 PCR筛选酵母菌阳性克隆 | 第23页 |
1.4 森林草莓中与SVBVP1蛋白互作的寄主因子 | 第23-24页 |
2 SVBVP1蛋白和LHC Ⅱ蛋白的互作研究 | 第24-30页 |
2.1 Real-timeRT-PCR分析森林草莓LHC Ⅱ基因的mRNA积累水平 | 第24-25页 |
2.2 P1和LHC Ⅱ亚细胞定位及共定位 | 第25-26页 |
2.3 酵母双杂(Y2H)验证P1与LHC Ⅱ互作 | 第26-27页 |
2.4 双分子荧光互补(BiFC)验证P1与LHC Ⅱ互作 | 第27-28页 |
2.5 免疫共沉淀(Pull-down)验证P1与LHC Ⅱ互作 | 第28-29页 |
2.6 免疫共沉淀(Co-IP)验证P1与LHC Ⅱ互作 | 第29-30页 |
3 P1与LHC Ⅱ互作对病毒侵染与扩散的机制研究 | 第30-33页 |
3.1 P1蛋白超表达对本氏烟植株的影响 | 第30-31页 |
3.2 LHC Ⅱ蛋白能协助P1蛋白,促进病毒局部扩散 | 第31-33页 |
讨论 | 第33-36页 |
1 利用酵母双杂交系统筛选与SVBV P1蛋白互作的寄主因子 | 第33页 |
2 Real-time RT-PCR分析森林草莓LHC Ⅱ基因的RNA积累水平 | 第33页 |
3 P1和LHC Ⅱ亚细胞定位及共定位 | 第33-34页 |
4 P1蛋白和LHC Ⅱ蛋白互作研究 | 第34页 |
5 本氏烟的转化和P1转基因植株的获得 | 第34-35页 |
6 LHC Ⅱ蛋白的表达能帮助P1蛋白促进病毒局部扩散 | 第35-36页 |
总结 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
作者简介 | 第42页 |