| 缩略语表 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-16页 |
| ABSTRACT | 第16-22页 |
| 前言 | 第22-23页 |
| 文献回顾 | 第23-65页 |
| 正文 | 第65-140页 |
| 实验一 FRAT1基因在人脑胶质细胞瘤中的表达及意义 | 第65-95页 |
| 1 材料 | 第65-70页 |
| ·组织标本 | 第65-67页 |
| ·细胞系 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67-69页 |
| ·主要仪器 | 第69-70页 |
| 2 方法 | 第70-82页 |
| ·细胞培养 | 第70-71页 |
| ·细胞爬片的制备 | 第71-72页 |
| ·免疫组化染色 | 第72-73页 |
| ·原位细胞凋亡检测（荧光TUNEL 法） | 第73-74页 |
| ·染色结果判定 | 第74-75页 |
| ·逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR） | 第75-79页 |
| ·Western blot | 第79-82页 |
| ·统计学分析 | 第82页 |
| 3 结果 | 第82-92页 |
| ·FRAT1 mRNA 在人脑胶质瘤细胞系中的表达 | 第82-83页 |
| ·FRAT1 蛋白在人脑胶质瘤细胞系中的表达和定位 | 第83-84页 |
| ·FRAT1 mRNA 在人脑胶质细胞瘤组织和正常人脑组织中的表达 | 第84-85页 |
| ·FRAT1 蛋白在人脑胶质细胞瘤组织和正常人脑组织中的表达和定位 | 第85-87页 |
| ·FRAT1 mRNA 和蛋白在表达上的相互关系 | 第87页 |
| ·β-catenin 蛋白在人脑胶质细胞瘤组织和正常人脑组织中的表达和定位 | 第87-89页 |
| ·PI 与人脑胶质细胞瘤病理级别及FRAT1 蛋白表达的关系 | 第89-90页 |
| ·AI 与人脑胶质细胞瘤病理级别及FRAT1 蛋白表达的关系 | 第90-92页 |
| 4 讨论 | 第92-95页 |
| 实验二 稳定整合 FRAT1 基因 RNA 干涉载体的胶质瘤细胞系的建立 | 第95-116页 |
| 1 材料 | 第96-99页 |
| ·细胞系 | 第96页 |
| ·菌种 | 第96页 |
| ·质粒 | 第96-97页 |
| ·主要试剂 | 第97-98页 |
| ·主要仪器 | 第98-99页 |
| 2 方法 | 第99-107页 |
| ·人FRAT1 基因RNAi 特异性片段的设计及合成 | 第99-100页 |
| ·设计并合成编码shRNA 序列的DNA oligo 模板 | 第100-101页 |
| ·人FRAT1 基因shRNA 真核干涉表达载体pRNAT-FRAT1 的构建和鉴定 | 第101-104页 |
| ·pRNAT-FRAT1 干涉载体转染人脑胶质瘤细胞系U251 | 第104-106页 |
| ·RT-PCR | 第106-107页 |
| ·Western blot | 第107页 |
| ·统计学分析 | 第107页 |
| 3 结果 | 第107-112页 |
| ·人FRAT1 基因shRNA 真核干涉表达载体的构建和鉴定 | 第107-108页 |
| ·三种pRNAT-FRAT1 质粒转染人脑胶质瘤细胞系U251 的转染效率 | 第108-110页 |
| ·三种pRNAT-FRAT1 质粒干涉效果的鉴定 | 第110页 |
| ·重组质粒稳定转染细胞系U251-S、U251-neo 和U251-NC 的建立 | 第110-111页 |
| ·shRNA 抑制FRAT1 mRNA 在U251-S 细胞中的表达水平 | 第111页 |
| ·shRNA 抑制FRAT1 蛋白在U251-S 细胞中的表达水平 | 第111-112页 |
| 4 讨论 | 第112-116页 |
| 实验三 FRAT1 基因 RNAi 对人脑胶质瘤细胞体外增殖及侵袭的影响 | 第116-131页 |
| 1 材料 | 第116-118页 |
| ·主要试剂 | 第116-117页 |
| ·主要仪器 | 第117-118页 |
| 2 方法 | 第118-122页 |
| ·细胞培养 | 第118页 |
| ·MTT 法绘制细胞生长曲线 | 第118页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第118-119页 |
| ·软琼脂集落形成实验 | 第119-120页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第120页 |
| ·单层细胞划痕实验 | 第120-121页 |
| ·Transwell 侵袭小室实验 | 第121-122页 |
| ·统计学分析 | 第122页 |
| 3 结果 | 第122-129页 |
| ·细胞生长曲线结果 | 第122-123页 |
| ·平板克隆形成实验结果 | 第123-124页 |
| ·软琼脂集落形成实验结果 | 第124-125页 |
| ·流式细胞术测定细胞周期结果 | 第125-127页 |
| ·单层细胞划痕实验结果 | 第127-128页 |
| ·Transwell 侵袭小室实验结果 | 第128-129页 |
| 4 讨论 | 第129-131页 |
| 实验四 FRAT1 基因 RNAi 对人脑胶质瘤细胞裸鼠体内成瘤、增殖、侵袭的影响 | 第131-140页 |
| 1 材料 | 第131-133页 |
| ·细胞系 | 第131-132页 |
| ·实验动物及分组 | 第132页 |
| ·主要试剂 | 第132页 |
| 主要仪器 | 第132-133页 |
| 2 方法 | 第133-134页 |
| ·人脑胶质细胞瘤裸鼠皮下移植瘤模型的建立及观测 | 第133页 |
| ·HE 染色 | 第133-134页 |
| ·免疫组化染色 | 第134页 |
| ·统计学分析 | 第134页 |
| 3 结果 | 第134-138页 |
| ·裸鼠皮下移植瘤生长情况的观察与测量 | 第134-137页 |
| ·HE 染色结果 | 第137页 |
| ·FRAT1 蛋白在裸鼠移植瘤组织中的表达 | 第137-138页 |
| 4 讨论 | 第138-140页 |
| 小结 | 第140-142页 |
| 参考文献 | 第142-169页 |
| 个人简历和研究成果 | 第169-170页 |
| 致谢 | 第170-173页 |
