摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
1 绪论 | 第16-41页 |
1.1 植物抗寒生理研究进展 | 第16-20页 |
1.1.1 植物组织结构与抗寒性 | 第16-17页 |
1.1.2 相对电导率与抗寒性 | 第17页 |
1.1.3 丙二醛含量与抗寒性 | 第17-18页 |
1.1.4 抗氧化酶活性与抗寒性 | 第18-19页 |
1.1.5 渗透调节物质与抗寒性 | 第19-20页 |
1.2 植物抗寒性的评价方法 | 第20-23页 |
1.2.1 田间自然鉴定法 | 第20-21页 |
1.2.2 QTL定位法 | 第21页 |
1.2.3 室内恢复生长法 | 第21页 |
1.2.4 镜检法 | 第21-22页 |
1.2.5 电导法 | 第22页 |
1.2.6 隶属函数法 | 第22-23页 |
1.3 植物抗寒分子机理研究进展 | 第23-34页 |
1.3.1 植物响应低温信号的主要转导途径 | 第23-27页 |
1.3.2 植物抗寒相关基因研究进展 | 第27-34页 |
1.4 转录组技术在植物低温逆境研究中的应用 | 第34-35页 |
1.5 木兰科植物抗寒性研究进展 | 第35-36页 |
1.6 研究目的和意义 | 第36-38页 |
1.7 主要研究内容和方法 | 第38-40页 |
1.7.1 抗寒常绿木兰科植物资源的收集、保存和优树初选 | 第38页 |
1.7.2 6种木兰科植物抗寒性分析与综合评价 | 第38页 |
1.7.3 乐东拟单性木兰响应低温的生理变化和叶片解剖结构 | 第38-39页 |
1.7.4 乐东拟单性木兰响应低温的转录组分析和候选基因的挖掘 | 第39页 |
1.7.5 乐东拟单性木兰抗寒相关候选基因的qRT-PCR分析 | 第39页 |
1.7.6 乐东拟单性木兰抗寒相关基因的功能分析和抗寒机理 | 第39-40页 |
1.8 技术路线 | 第40-41页 |
2 木兰科植物资源调查分析与收集保存 | 第41-56页 |
2.1 研究方法 | 第42-43页 |
2.1.1 资料查阅 | 第42页 |
2.1.2 实地调查 | 第42页 |
2.1.3 数据处理 | 第42页 |
2.1.4 研究区域概况 | 第42-43页 |
2.2 结果与分析 | 第43-53页 |
2.2.1 木兰科植物资源在中国的分布情况 | 第43-44页 |
2.2.2 木兰科植物在中国各省区的物种丰富度 | 第44-46页 |
2.2.3 湖南省木兰科植物资源状况 | 第46-48页 |
2.2.4 湖南省木兰科植物资源的地理分布 | 第48-52页 |
2.2.5 湖南省与邻近省区的木兰科植物资源比较 | 第52页 |
2.2.6 常绿木兰科植物种质资源的收集 | 第52-53页 |
2.2.7 抗寒常绿木兰科植物优良树种的确定 | 第53页 |
2.3 讨论 | 第53-56页 |
3 6种常绿木兰科植物抗寒性的综合评价与筛选 | 第56-80页 |
3.1 材料及处理 | 第57页 |
3.2 仪器设备 | 第57页 |
3.3 试验方法 | 第57-62页 |
3.3.1 田间冻害调查 | 第57-58页 |
3.3.2 生理生化指标的测定 | 第58-61页 |
3.3.3 石蜡切片及叶片解剖结构观测 | 第61页 |
3.3.4 数据处理 | 第61-62页 |
3.4 结果与分析 | 第62-76页 |
3.4.1 田间冻害等级调查 | 第62-63页 |
3.4.2 叶片组织结构特征比较 | 第63-67页 |
3.4.3 6种木兰科植物叶片结构指标的相关性和聚类分析 | 第67-69页 |
3.4.4 6种木兰科植物对低温的生理响应 | 第69-74页 |
3.4.5 6种木兰科植物抗寒性的综合评价 | 第74-76页 |
3.5 讨论 | 第76-80页 |
4 乐东拟单性木兰响应低温胁迫的转录组分析和调控机理 | 第80-139页 |
4.1 材料及处理 | 第81页 |
4.2 仪器设备 | 第81-82页 |
4.3 试验方法 | 第82-91页 |
4.3.1 叶片结构与生理生化指标的测定 | 第82-83页 |
4.3.2 RNA的提取 | 第83页 |
4.3.3 RNA质量检测和浓度测定 | 第83-84页 |
4.3.4 cDNA合成及文库构建 | 第84页 |
4.3.5 转录组数据分析流程 | 第84-85页 |
4.3.6 转录组测序及序列组装 | 第85页 |
4.3.7 转录组测序质量及完整性评价 | 第85-86页 |
4.3.8 读码框(ORF)预测和基因功能注释 | 第86-88页 |
4.3.9 差异表达基因分析 | 第88页 |
4.3.10 qRT-PCR候选基因与引物设计 | 第88-91页 |
4.4 结果与分析 | 第91-127页 |
4.4.1 乐东拟单性木兰叶片组织结构对低温的响应 | 第91-92页 |
4.4.2 低温胁迫对乐东拟单性木兰叶片生理指标的影响 | 第92-94页 |
4.4.3 乐东拟单性木兰响应低温胁迫的转录组分析 | 第94-123页 |
4.4.4 差异表达基因的qRT-PCR验证分析 | 第123-127页 |
4.5 讨论 | 第127-139页 |
4.5.1 乐东拟单性木兰响应低温胁迫的转录组测序组装质量评估 | 第127页 |
4.5.2 低温胁迫下乐东拟单性木兰差异表达基因的功能分析 | 第127-134页 |
4.5.3 乐东拟单性木兰响应低温胁迫的信号转导途径 | 第134-137页 |
4.5.4 乐东拟单性木兰响应低温胁迫的转导代谢通路和应答机制 | 第137-139页 |
5 结论 | 第139-142页 |
5.1 木兰科植物的资源调查与收集保存 | 第139页 |
5.2 6种常绿木兰科植物抗寒性的综合评价与筛选 | 第139-140页 |
5.3 乐东拟单性木兰转录组测序的生物信息学分析 | 第140-141页 |
5.4 乐东拟单性木兰响应低温胁迫的基因调控机理 | 第141-142页 |
6 创新点及有待研究的问题 | 第142-144页 |
6.1 创新点 | 第142页 |
6.2 待研究的问题 | 第142-144页 |
参考文献 | 第144-180页 |
附录A 常绿木兰科植物种质资源接穗及种质资源保存名录 | 第180-192页 |
附录B 乐东拟单性木兰样品RNA质量检测图谱 | 第192-193页 |
附录C 乐东拟单性木兰RNA-seq测序的基因注释信息 | 第193-198页 |
附录D qRT-PCR候选基因的差异表达分析结果 | 第198-200页 |
附录E qRT-PCR溶解曲线和扩增曲线 | 第200-201页 |
附录F 乐东拟单性木兰响应低温信号的转导通路图 | 第201-202页 |
附录G 攻读博士期间的主要学术成果 | 第202-204页 |
致谢 | 第204页 |