个人简历 | 第3-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
1.前言 | 第12-16页 |
1.1 microRNA | 第12-13页 |
1.2 肺癌 | 第13页 |
1.3 miR-30a在肺癌中的作用 | 第13-14页 |
1.4 糖酵解途径 | 第14-16页 |
2.实验材料 | 第16-19页 |
2.1 细胞株 | 第16页 |
2.2 主要仪器设备 | 第16-17页 |
2.3 主要试剂 | 第17-18页 |
2.4 主要溶液配制 | 第18-19页 |
3.实验方法 | 第19-32页 |
3.1 细胞培养 | 第19-21页 |
3.2 细胞瞬时转染 | 第21-22页 |
3.3 乳酸含量测定 | 第22-23页 |
3.4 细胞RNA提取 | 第23页 |
3.5 miRNA逆转录 | 第23-24页 |
3.6 mRNA逆转录 | 第24-25页 |
3.7 实时荧光定量PCR反应 | 第25-26页 |
3.8 BCA试剂盒测蛋白浓度 | 第26-27页 |
3.9 干细胞因子检测 | 第27-29页 |
3.10 Western blot检测观察蛋白表达量 | 第29-31页 |
3.11 CCK8实验 | 第31页 |
3.12平板克隆形成实验 | 第31页 |
3.13 流式细胞术测细胞凋亡 | 第31-32页 |
4.统计学分析 | 第32页 |
5.实验结果 | 第32-52页 |
5.1 LDHA是 miR-30a的靶基因 | 第32-34页 |
5.2 mRNA水平LDHA和HIF-1α表达分析 | 第34-36页 |
5.3 miR-30a-LDHA-HIF-1α信号轴可抑制乳酸的产生 | 第36-37页 |
5.4 miR-30a-LDHA-HIF-1α信号轴可抑制肺腺癌A549 体外增殖 | 第37-38页 |
5.5 miR-30a和 siR-LDHA可抑制肺腺癌A549 体外克隆形成 | 第38-40页 |
5.6 miR-30a-LDHA-HIF-1α信号轴可促进肺腺癌A549 体外凋亡 | 第40-41页 |
5.7 miR-30a-LDHA-HIF-1α信号轴可调控肿瘤干细胞标志分子的表达 | 第41-45页 |
5.8 miR-30a对肺腺癌A549 mRNA转录组的影响 | 第45-49页 |
5.9 编码蛋白的差异基因表达 | 第49-52页 |
6.讨论 | 第52-60页 |
7.结论 | 第60页 |
8.问题与展望 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
附录 | 第72-73页 |
综述 miR-30a在肺癌中的研究进展 | 第73-86页 |
1.肺癌 | 第73-74页 |
2.miR-30a基因结构与功能 | 第74页 |
3.miR-30a在恶性肿瘤中的表达 | 第74-75页 |
4.miR-30a在肺癌中的表达 | 第75-76页 |
5.miR-30a在肺癌中的作用 | 第76页 |
6.miR-30a与肿瘤诊断、治疗及预后 | 第76-77页 |
7.miR-30a与肺癌诊断、治疗及预后 | 第77-78页 |
8.问题及展望 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第87页 |