摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第16-24页 |
1.1 昆虫的嗅觉感受机制 | 第16-17页 |
1.2 昆虫OBPs研究进展 | 第17-19页 |
1.3 昆虫其他化学感受基因的研究进展 | 第19-20页 |
1.3.1 昆虫CSPs | 第19页 |
1.3.2 昆虫SNMPs | 第19页 |
1.3.3 昆虫ORs | 第19-20页 |
1.3.4 昆虫IRs | 第20页 |
1.4 昆虫ODEs研究进展 | 第20-21页 |
1.4.1 昆虫触角GSTs | 第20-21页 |
1.4.2 昆虫AOXs | 第21页 |
1.5 转录组测序在昆虫嗅觉研究中的应用 | 第21-22页 |
1.6 研究对象 | 第22页 |
1.7 研究的目的和主要内容 | 第22-24页 |
1.7.1 研究目的和意义 | 第22-23页 |
1.7.2 研究内容和技术路线 | 第23-24页 |
第2章 桑螟触角化学感受基因的鉴定与序列分析 | 第24-46页 |
2.1 材料与方法 | 第24-26页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.3 总RNA的提取 | 第25页 |
2.1.4 桑螟触角cDNA文库的构建和Illumina深度测序 | 第25-26页 |
2.1.5 转录组序列的组装和功能注释 | 第26页 |
2.1.6 桑螟化学感受基因的鉴定及生物信息学分析 | 第26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-45页 |
2.2.1 Illumina测序和转录组组装 | 第26-28页 |
2.2.2 触角unigenes的GO和KOG分类 | 第28-29页 |
2.2.3 桑螟化学感受基因的鉴定 | 第29页 |
2.2.4 GpOBPs序列特征及系统进化树构建 | 第29-34页 |
2.2.5 GpCSPs序列特征及系统进化树构建 | 第34-38页 |
2.2.6 GpORs序列特征及系统进化树构建 | 第38-42页 |
2.2.7 GpIRs序列特征及系统进化树构建 | 第42-44页 |
2.2.8 GpSNMPs序列特征及系统进化树构建 | 第44-45页 |
2.3 讨论 | 第45页 |
2.4 本章小结 | 第45-46页 |
第3章 桑螟GpOBPs基因的组织表达谱分析及GpPBP1和GpOBP12的原核表达 | 第46-64页 |
3.1 材料与方法 | 第46-53页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第46页 |
3.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第46-47页 |
3.1.3 桑螟不同组织的总RNA提取及c DNA链第一链的合成 | 第47页 |
3.1.4 PCR引物设计 | 第47-49页 |
3.1.5 荧光定量PCR反应 | 第49页 |
3.1.6 原核表达载体的构建 | 第49-51页 |
3.1.7 重组蛋白的表达与纯化 | 第51-52页 |
3.1.8 重组蛋白His-tag标签的切除和纯化 | 第52页 |
3.1.9 重组蛋白与气味物质的体外结合实验 | 第52-53页 |
3.2 结果与分析 | 第53-62页 |
3.2.1 桑螟不同组织中OBPs的表达差异分析 | 第53-58页 |
3.2.2 桑螟Gp PBP1重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第58-59页 |
3.2.3 桑螟Gp OBP12重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第59-61页 |
3.2.4 桑螟Gp PBP1蛋白与气味物质的结合能力分析 | 第61-62页 |
3.3 讨论 | 第62-63页 |
3.4 本章小结 | 第63-64页 |
第4章 桑螟气味降解酶基因的鉴定、组织表达谱及GpGST-D1原核表达研究 | 第64-84页 |
4.1 材料与方法 | 第64-70页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第64页 |
4.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第64-65页 |
4.1.3 桑螟ODEs基因的鉴定及生物信息学分析 | 第65页 |
4.1.4 桑螟不同组织的总RNA提取及cDNA链第一链的合成 | 第65-66页 |
4.1.5 PCR引物设计 | 第66页 |
4.1.6 荧光定量PCR反应 | 第66-67页 |
4.1.7 原核表达载体的构建 | 第67-68页 |
4.1.8 GpGST-D1蛋白的表达与纯化 | 第68-69页 |
4.1.9 GpGST-D1重组蛋白酶活力分析 | 第69-70页 |
4.2 结果与分析 | 第70-81页 |
4.2.1 桑螟气ODEs基因的鉴定 | 第70页 |
4.2.2 GpGSTs序列特征及系统进化树构建 | 第70-72页 |
4.2.3 GpAOXs序列特征及系统进化树构建 | 第72-75页 |
4.2.4 桑螟不同组织中GpGSTs基因的表达差异分析 | 第75-77页 |
4.2.5 桑螟不同组织中GpAOXs基因的表达差异分析 | 第77-78页 |
4.2.6 桑螟GpGST-D1蛋白原核表达载体的构建与鉴定 | 第78页 |
4.2.7 桑螟GpGST-D1重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第78-79页 |
4.2.8 桑螟GpGST-D1重组蛋白酶活力分析 | 第79-81页 |
4.3 讨论 | 第81-83页 |
4.4 本章小结 | 第83-84页 |
结论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-92页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第92-94页 |
致谢 | 第94-95页 |