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桑螟嗅觉相关基因的鉴定、组织表达谱及体外表达的研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 绪论第16-24页
    1.1 昆虫的嗅觉感受机制第16-17页
    1.2 昆虫OBPs研究进展第17-19页
    1.3 昆虫其他化学感受基因的研究进展第19-20页
        1.3.1 昆虫CSPs第19页
        1.3.2 昆虫SNMPs第19页
        1.3.3 昆虫ORs第19-20页
        1.3.4 昆虫IRs第20页
    1.4 昆虫ODEs研究进展第20-21页
        1.4.1 昆虫触角GSTs第20-21页
        1.4.2 昆虫AOXs第21页
    1.5 转录组测序在昆虫嗅觉研究中的应用第21-22页
    1.6 研究对象第22页
    1.7 研究的目的和主要内容第22-24页
        1.7.1 研究目的和意义第22-23页
        1.7.2 研究内容和技术路线第23-24页
第2章 桑螟触角化学感受基因的鉴定与序列分析第24-46页
    2.1 材料与方法第24-26页
        2.1.1 供试昆虫第24页
        2.1.2 主要试剂与仪器设备第24-25页
        2.1.3 总RNA的提取第25页
        2.1.4 桑螟触角cDNA文库的构建和Illumina深度测序第25-26页
        2.1.5 转录组序列的组装和功能注释第26页
        2.1.6 桑螟化学感受基因的鉴定及生物信息学分析第26页
    2.2 结果与分析第26-45页
        2.2.1 Illumina测序和转录组组装第26-28页
        2.2.2 触角unigenes的GO和KOG分类第28-29页
        2.2.3 桑螟化学感受基因的鉴定第29页
        2.2.4 GpOBPs序列特征及系统进化树构建第29-34页
        2.2.5 GpCSPs序列特征及系统进化树构建第34-38页
        2.2.6 GpORs序列特征及系统进化树构建第38-42页
        2.2.7 GpIRs序列特征及系统进化树构建第42-44页
        2.2.8 GpSNMPs序列特征及系统进化树构建第44-45页
    2.3 讨论第45页
    2.4 本章小结第45-46页
第3章 桑螟GpOBPs基因的组织表达谱分析及GpPBP1和GpOBP12的原核表达第46-64页
    3.1 材料与方法第46-53页
        3.1.1 供试昆虫第46页
        3.1.2 主要试剂及仪器设备第46-47页
        3.1.3 桑螟不同组织的总RNA提取及c DNA链第一链的合成第47页
        3.1.4 PCR引物设计第47-49页
        3.1.5 荧光定量PCR反应第49页
        3.1.6 原核表达载体的构建第49-51页
        3.1.7 重组蛋白的表达与纯化第51-52页
        3.1.8 重组蛋白His-tag标签的切除和纯化第52页
        3.1.9 重组蛋白与气味物质的体外结合实验第52-53页
    3.2 结果与分析第53-62页
        3.2.1 桑螟不同组织中OBPs的表达差异分析第53-58页
        3.2.2 桑螟Gp PBP1重组蛋白的诱导表达及纯化第58-59页
        3.2.3 桑螟Gp OBP12重组蛋白的诱导表达及纯化第59-61页
        3.2.4 桑螟Gp PBP1蛋白与气味物质的结合能力分析第61-62页
    3.3 讨论第62-63页
    3.4 本章小结第63-64页
第4章 桑螟气味降解酶基因的鉴定、组织表达谱及GpGST-D1原核表达研究第64-84页
    4.1 材料与方法第64-70页
        4.1.1 供试昆虫第64页
        4.1.2 主要试剂及仪器设备第64-65页
        4.1.3 桑螟ODEs基因的鉴定及生物信息学分析第65页
        4.1.4 桑螟不同组织的总RNA提取及cDNA链第一链的合成第65-66页
        4.1.5 PCR引物设计第66页
        4.1.6 荧光定量PCR反应第66-67页
        4.1.7 原核表达载体的构建第67-68页
        4.1.8 GpGST-D1蛋白的表达与纯化第68-69页
        4.1.9 GpGST-D1重组蛋白酶活力分析第69-70页
    4.2 结果与分析第70-81页
        4.2.1 桑螟气ODEs基因的鉴定第70页
        4.2.2 GpGSTs序列特征及系统进化树构建第70-72页
        4.2.3 GpAOXs序列特征及系统进化树构建第72-75页
        4.2.4 桑螟不同组织中GpGSTs基因的表达差异分析第75-77页
        4.2.5 桑螟不同组织中GpAOXs基因的表达差异分析第77-78页
        4.2.6 桑螟GpGST-D1蛋白原核表达载体的构建与鉴定第78页
        4.2.7 桑螟GpGST-D1重组蛋白的诱导表达及纯化第78-79页
        4.2.8 桑螟GpGST-D1重组蛋白酶活力分析第79-81页
    4.3 讨论第81-83页
    4.4 本章小结第83-84页
结论第84-86页
参考文献第86-92页
攻读学位期间发表的学术论文第92-94页
致谢第94-95页

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