| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 研究背景 | 第13页 |
| 1.2 研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 1.3 国内外研究现状分析 | 第14-15页 |
| 1.3.1 玉米的真实性和纯度鉴定 | 第14-15页 |
| 1.3.2 玉米的正反交鉴定 | 第15页 |
| 1.4 分子标记技术 | 第15-17页 |
| 1.4.1 SSR标记 | 第15-16页 |
| 1.4.2 InDel标记 | 第16页 |
| 1.4.3 SNP标记 | 第16-17页 |
| 1.4.4 测序技术简介 | 第17页 |
| 1.5 分子标记的应用 | 第17-21页 |
| 1.5.1 多重PCR研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5.2 DNA指纹数据库的构建 | 第18-19页 |
| 1.5.3 玉米种质资源与类群划分 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 引物筛选及体系优化研究的材料 | 第21页 |
| 2.1.2 标准DNA指纹数据库的构建研究材料 | 第21-22页 |
| 2.1.3 叶绿体InDel标记引物筛选及类群划分材料 | 第22-23页 |
| 2.1.4 引物材料 | 第23-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 核酸DNA提取及定量 | 第25-27页 |
| 2.2.2 引物设计与合成 | 第27页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第27页 |
| 2.2.4 电泳 | 第27-28页 |
| 2.2.5 引物评估筛选及多重组合的建立 | 第28页 |
| 2.2.6 数据统计及分析 | 第28-29页 |
| 2.2.7 数据库构建 | 第29页 |
| 2.2.8 试验仪器及耗材 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-57页 |
| 3.1 PCR扩增体系及反应程序优化 | 第30-34页 |
| 3.1.1 DNA浓度的确定 | 第30-32页 |
| 3.1.2 循环数的优化调整 | 第32-34页 |
| 3.2 SSR标记的评估及优化 | 第34-36页 |
| 3.2.1 40对PerfectSSR引物的表现情况 | 第34-35页 |
| 3.2.2 PerfectSSR引物的优化 | 第35-36页 |
| 3.3 SSR标记多重PCR构建 | 第36-47页 |
| 3.3.1 引物分组情况 | 第36页 |
| 3.3.2 核心引物组合的构建 | 第36-39页 |
| 3.3.3 8重引物组合的构建 | 第39-40页 |
| 3.3.4 多重PCR中N+1峰的去除 | 第40-41页 |
| 3.3.5 各组多重组合浓度的平衡调整 | 第41-42页 |
| 3.3.6 Panel的构建 | 第42-47页 |
| 3.4 小型DNA指纹数据库的构建 | 第47-50页 |
| 3.4.1 等位基因频率与多态性评估 | 第47-50页 |
| 3.4.2 指纹数据库建立情况 | 第50页 |
| 3.4.3 与现行标准中的SSR数据库的优势比较 | 第50页 |
| 3.5 适用于毛细管电泳平台的叶绿体InDel标记的开发与验证 | 第50-57页 |
| 3.5.1 叶绿体InDel标记开发 | 第50页 |
| 3.5.2 叶绿体InDel标记引物验证 | 第50-53页 |
| 3.5.3 正反交检测方法的确定与二重PCR的组建 | 第53-55页 |
| 3.5.4 利用叶绿体InDel标记对骨干玉米自交系划群分析 | 第55-57页 |
| 4 结论与讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 PerfectSSR多重PCR体系建立及数据库的构建 | 第57-58页 |
| 4.2 基于叶绿体InDel标记对玉米杂交种正反交的鉴定 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位论文期间发表的文章 | 第64-65页 |
