摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 前言 | 第12-19页 |
1.1 单核细胞增生性李斯特菌(L. monocytogenes)的研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 单核细胞增生性李斯特菌的概述 | 第12页 |
1.1.2 单核细胞增生性李斯特菌的检测研究进展 | 第12-13页 |
1.2 免疫磁分离技术研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 免疫磁珠的结构与组成 | 第13页 |
1.2.2 免疫磁分离技术的概述 | 第13-14页 |
1.2.3 免疫磁分离技术与其他方法结合在单核细胞增生性李斯特菌检测中的研究进展 | 第14-17页 |
1.3 研究的目的及意义 | 第17-19页 |
第二章 10mL免疫磁富集单核细胞增生性李斯特菌方法的建立 | 第19-42页 |
2.1 前言 | 第19-22页 |
2.2 试剂与材料 | 第22-25页 |
2.2.1 主要实验材料 | 第22-23页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第23页 |
2.2.3 主要实验试剂的配制 | 第23-25页 |
2.3 实验方法 | 第25-31页 |
2.3.1 菌株的培养 | 第25页 |
2.3.2 抗李斯特菌抗体特异性验证 | 第25-26页 |
2.3.3 不同比例生物素化抗体的制备 | 第26-27页 |
2.3.4 免疫磁珠的合成 | 第27页 |
2.3.5 一步法磁富集单核细胞增生性李斯特菌 | 第27-29页 |
2.3.6 两步法磁富集单核细胞增生性李斯特 | 第29-31页 |
2.4 结果与讨论 | 第31-41页 |
2.4.1 抗体特异性 | 第31-32页 |
2.4.2 生物素化抗体的表征 | 第32-33页 |
2.4.3 制备高梯度的外加磁场 | 第33-34页 |
2.4.4 一步法磁富集单核细胞增生性李斯特菌 | 第34-37页 |
2.4.5 两步法富集捕获大体系单核细胞增生性李斯特菌实验中条件的优化 | 第37-41页 |
2.5 小结 | 第41-42页 |
第三章 10mL免疫磁富集在实际样本中检测单核细胞增生性李斯特菌的应用 | 第42-58页 |
3.1 前言 | 第42-43页 |
3.2 试剂与材料 | 第43-44页 |
3.2.1 主要实验材料 | 第43页 |
3.2.2 主要仪器设 | 第43页 |
3.2.3 主要实验试剂的配制 | 第43-44页 |
3.3 实验方法 | 第44-49页 |
3.3.1 一步法免疫磁富集实际样本中的单核细胞增生性李斯特菌和绵羊李斯特菌 | 第44-45页 |
3.3.2 两步法富集浓缩实际样本中的单核细胞增生性李斯特菌 | 第45页 |
3.3.3 通过多重PCR对免疫磁分离的结果进行检测 | 第45-49页 |
3.4 结果与讨论 | 第49-56页 |
3.4.1 一步法的纯溶液与实际样本磁捕获 | 第49-50页 |
3.4.2 两步法富集浓缩法在纯溶液与实际样本中的检测 | 第50-51页 |
3.4.3 多重PCR条件优化结果 | 第51-56页 |
3.4.4 mPCR分析 | 第56页 |
3.5 小结 | 第56-58页 |
第四章 结论与展望 | 第58-59页 |
4.1 结论 | 第58页 |
4.1.1 10mL免疫磁富集单核细胞增生性李斯特菌方法的建立 | 第58页 |
4.1.2 10mL免疫磁富集在实际样本中的应用 | 第58页 |
4.2 展望 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录A1 试剂 | 第66-67页 |
附录A2 仪器设备 | 第67-68页 |
个人简介 | 第68页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第68页 |
获奖情况 | 第68页 |