| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-16页 |
| 1. 鸡新城疫概述 | 第11-12页 |
| 2. 鸡新城疫的免疫程序 | 第12-13页 |
| ·用Ⅰ系苗进行免疫 | 第12页 |
| ·用Ⅱ系苗进行免疫 | 第12页 |
| ·用Ⅰ系苗和Ⅱ系苗进行混合免疫 | 第12-13页 |
| 3. 鸡新城疫的诊断 | 第13-16页 |
| ·ND微生物学诊断方法 | 第14页 |
| ·ND清学诊断方法 | 第14-15页 |
| ·ND分子生物学诊断方法 | 第15-16页 |
| 第二章 检测新城疫强毒RT-PCR方法的验证和优化 | 第16-32页 |
| 1. 材料 | 第16-17页 |
| ·病毒和细胞 | 第16-17页 |
| ·生化试剂 | 第17页 |
| ·RT-PCR引物 | 第17页 |
| ·泄殖腔棉拭样品 | 第17页 |
| ·其他试剂 | 第17页 |
| 2. 方法 | 第17-20页 |
| ·引物设计 | 第17页 |
| ·引物验证及区分NDV强弱毒RT-PCR方法的建立 | 第17-19页 |
| ·用标准强毒对PCR引物进行验证 | 第17-18页 |
| ·用中毒Ⅰ系对PCR引物进行验证 | 第18-19页 |
| ·用标准弱毒对PCR引物进行验证 | 第19页 |
| ·用RT—PCR对Ⅰ系毒的纯化克隆进行检测 | 第19页 |
| ·用蚀斑克隆法纯化工系疫苗毒 | 第19页 |
| ·用RT—PCR方法检测细胞培养液 | 第19页 |
| ·引物对的特异性检验 | 第19页 |
| ·对鸡胚分离毒的尿囊液样品进行检测 | 第19页 |
| ·直接对泄殖腔样品进行RT-PCR方法检测 | 第19-20页 |
| 3. 结论与分析 | 第20-29页 |
| ·设计并合成了下列四条引物 | 第20页 |
| ·验证引物对的结果 | 第20-22页 |
| ·标准强毒株的RT—PCR结果 | 第20-21页 |
| ·中毒工系的RT—PCR结果 | 第21页 |
| ·标准弱毒株Lasota(Ⅳ系)的RT-PCR结果 | 第21-22页 |
| ·中毒工系克隆毒的克隆RT—PCR结果 | 第22-24页 |
| ·工系克隆毒蚀斑的结果 | 第22-23页 |
| ·工系克隆毒的RT—PCR结果 | 第23-24页 |
| ·特异性试验结果 | 第24-26页 |
| ·引物对NDV1+NDV2的特异性试验结果 | 第24页 |
| ·引物对NDV1+NDV3的特异性试验结果 | 第24-25页 |
| ·引物对NDV1+NDV4的特异性试验结果 | 第25-26页 |
| ·鸡胚分离毒的尿囊液样品的RT—PCR结果 | 第26-27页 |
| ·泄殖腔样品直接进行RT—PCR结果 | 第27-28页 |
| ·阴性样品的RT—PCR结果 | 第28-29页 |
| 4. 讨论 | 第29-32页 |
| 第三章 应用RT-PCR快速检测NDV强毒方法调查鸡群NDV抗体与ND强毒感染的关系 | 第32-39页 |
| 1. 材料 | 第32页 |
| ·病毒和检测样品 | 第32页 |
| ·生化试剂 | 第32页 |
| ·RT—PCR引物 | 第32页 |
| ·ND血清抗体检测试剂盒 | 第32页 |
| ·本试验相关的其他药品、试剂 | 第32页 |
| 2. 方法 | 第32-34页 |
| ·泄殖腔样品的RT-PCR检测 | 第32-33页 |
| ·用检测NDV强毒RT-PCR检测样品 | 第33-34页 |
| ·病料中病毒总RNA的提取 | 第33页 |
| ·将反转录成CDNA | 第33页 |
| ·PCR扩增病毒核酸 | 第33-34页 |
| ·PCR产物电泳 | 第34页 |
| ·应用检测NDV强毒RT-PCR方法检测阳性、阴性和空白对照 | 第34页 |
| ·应用试剂盒检测NDV血清抗体效价 | 第34页 |
| 3. 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·应用检测NDV强毒方法检测NDV强毒AG68的RT-PCR结果 | 第34-35页 |
| ·应用检测NDV弱毒方法检测NDV弱毒C30的RT-PCR结果 | 第35-36页 |
| ·应用检测NDV弱毒方法检测生理盐水的RT-PCR结果 | 第36页 |
| ·30份样品的RT-PCR结果统计 | 第36-37页 |
| ·30份样品的RT-PCR详细结果及对应的抗体ELISA检测结果 | 第37页 |
| 4. 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 应用检测NDV强毒RT-PCR方法筛选ND疫免疫程序试验 | 第39-44页 |
| 1. 材料 | 第39-40页 |
| ·病毒和动物 | 第39页 |
| ·生化试剂 | 第39页 |
| ·RT-PCR引物 | 第39页 |
| ·疫苗 | 第39-40页 |
| 2. 方法 | 第40-42页 |
| ·分组免疫及采样 | 第40页 |
| ·检测NDV强毒RT-PCR方法检测ND免疫鸡泄殖腔样品 | 第40-42页 |
| ·泄殖腔样品处理 | 第40页 |
| ·用检测NDV强毒RT-PCR检测样品 | 第40-41页 |
| ·应用检测NDV强毒RT-PCR方法检测阳性、阴性和空白对照 | 第41-42页 |
| 3. 结果 | 第42页 |
| ·应用检测NDV强毒RT-PCR方法检测阳性、阴性和空白对照结果 | 第42页 |
| ·检测NDV强毒RT-PCR方法监测结果 | 第42页 |
| 4. 讨论与分析 | 第42-44页 |
| 第五章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简介 | 第51页 |
